摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 肝脏的发育过程 | 第13-15页 |
1.3 Tmp21基因的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 肝脏发育过程中的关键基因 | 第16-17页 |
1.5 细胞凋亡 | 第17-18页 |
1.6 实验背景介绍 | 第18-21页 |
第二部分 引言 | 第21-23页 |
2.1 研究的选题依据 | 第21页 |
2.2 研究思路和主要内容 | 第21-23页 |
第三部分 材料和方法 | 第23-39页 |
3.1 实验动物 | 第23页 |
3.2 试剂、耗材和仪器 | 第23-24页 |
3.3 培养基和主要试剂配制 | 第24-26页 |
3.3.1 LB培养基的配制 | 第24页 |
3.3.2 原位杂交相关溶液 | 第24-26页 |
3.3.3 其他溶液配制 | 第26页 |
3.4 质粒和菌株 | 第26-27页 |
3.5 实验方法 | 第27-39页 |
3.5.1 斑马鱼总RNA的提取 | 第27页 |
3.5.2 反转录制备cDNA | 第27-28页 |
3.5.3 重组质粒的构建 | 第28-31页 |
3.5.4 反义探针的制备 | 第31-32页 |
3.5.5 mRNA的制备和纯化 | 第32-34页 |
3.5.6 胚胎显微注射 | 第34-35页 |
3.5.7 全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization) | 第35-37页 |
3.5.8 细胞凋亡实验(TUNEL experiment) | 第37-39页 |
第四部分 实验结果 | 第39-55页 |
4.1 从斑马鱼基因组中克隆Tmp21基因序列 | 第39-40页 |
4.2 注射Tmp21 morpholino对斑马鱼胚胎肝脏的影响 | 第40-41页 |
4.3 注射Tmp21 morpholino对斑马鱼胰腺发育的影响 | 第41-42页 |
4.4 注射Tmp21 m RNA导致斑马鱼肝脏增殖 | 第42-43页 |
4.5 注射Tmp21 mRNA能够回救Tmp21 MO导致的表型 | 第43-44页 |
4.6 Tmp21基因在斑马鱼胚胎中的表达 | 第44-45页 |
4.7 Tmp21基因对肝脏特异性标记的基因的影响 | 第45-47页 |
4.8 Tmp21基因对肝脏早期发育的影响 | 第47-48页 |
4.9 检测肝脏特异性标记的基因在Tmp21 MO和p53 MO共注射后的变化 | 第48-50页 |
4.10 检测Tmp21基因在内胚层细胞中的特异性表达 | 第50-53页 |
4.11 鉴定Tmp21注射后的斑马鱼胚胎中的细胞凋亡 | 第53-55页 |
第五部分 讨论和分析 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63页 |