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草鱼RIG-I和MDA5基因在干扰素诱导过程中的功能差异性研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第12-14页
第一章 文献综述第14-39页
    1 先天性免疫第14-34页
        1.1 先天性免疫识别受体第14-27页
            1.1.1 TLR及其成员间功能差异性第15-18页
            1.1.2 RLR及其成员间功能差异性第18-23页
            1.1.3 NLR及其成员间功能差异性第23-26页
            1.1.4 PRR成员之间的协作与互相调控第26-27页
        1.2 IFN第27-34页
            1.2.1 IFN的发现及其功能第27-29页
            1.2.2 IFN的诱导和翻译后修饰在干扰素调控过程中的作用第29-32页
            1.2.3 鱼类与哺乳动物IFN的差异第32-34页
    2 草鱼出血病及其免疫学研究进展第34-37页
        2.1 草鱼呼肠孤病毒第34-35页
        2.2 草鱼抗GCRV感染IFN系统第35-37页
    3 本研究问题的由来、目的和意义第37-39页
第二章 试验材料和试验方法第39-59页
    1 试验材料第39-44页
        1.1 实验鱼、细胞和病毒第39页
        1.2 实验试剂第39-43页
            1.2.1 核酸提取相关试剂第39页
            1.2.2 载体构建相关试剂第39-40页
            1.2.3 细胞试验相关试剂第40-41页
            1.2.4 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)相关试剂第41页
            1.2.5 免疫印迹(Immumoblotting, IB)和免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)相关试剂第41-42页
            1.2.5 试验所需溶液配制第42-43页
        1.3 试验仪器设备第43-44页
    2 试验方法第44-59页
        2.1 DNA和RNA提取第44-45页
            2.1.1 DNA提取第44-45页
            2.1.2 总RNA提取第45页
        2.2 反转录第45-46页
        2.3 载体构建第46-48页
        2.4 细胞试验相关操作第48-52页
            2.4.1 细胞传代、冻存和解冻第48-50页
            2.4.2 细胞瞬时与稳定转染第50-51页
            2.4.3 GCRV和poly(I:C)处理细胞第51页
            2.4.4 细胞取样第51-52页
        2.5 细胞活性检测第52页
        2.6 双荧光素酶报告试验第52-54页
        2.7 IB及IP试验第54-55页
        2.8 激光共聚焦试验第55-56页
        2.9 RT-qPCR和半定量PCR (Semi-qPCR)第56-58页
        2.10 数据处理与统计学分析第58-59页
第三章 试验结果与分析第59-82页
    1 草鱼RIG-I和MDA5诱导了不同IFN的表达第59-67页
        1.1 未受到免疫刺激的情况下,RIG-I和MDA5对IFN基因表达的影响第59-61页
        1.2 GCRV或poly(I:C)刺激下,MDA5比RIG-I诱导出更强的IFN免疫应答第61-67页
    2 草鱼RIG-I和MDA5对IRF3和IRF7的影响第67-78页
        2.1 未受到免疫刺激的情况下,MDA5和RIG-I对IRF3和IRF7的表达无显著影响第67-69页
        2.2 IRF3和IRF7在CIK细胞抗GCRV感染中起到积极作用第69-72页
        2.3 RIG-I和MDA5不同程度地促进IRF3和IRF7的磷酸化第72-76页
        2.4 RIG-I和MDA5不同地诱导了IRF3和IRF7的二聚化第76-78页
    3 草鱼IRF3和IRF7不同的二聚化作用诱导不同的I型IFN应答第78-80页
    4 草鱼RIG-I和MDA5不同地影响IL-4 和IL-12p40的表达第80-82页
第四章 讨论第82-89页
全文总结与展望第89-90页
参考文献第90-122页
作者简历第122-125页
致谢第125-127页

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