| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 小鼠ES细胞概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 小鼠ES细胞的来源和重要发展回顾 | 第13-14页 |
| 1.1.2 小鼠ES细胞的重要特征 | 第14-15页 |
| 1.1.3 诱导多能性干细胞的研究简述 | 第15-16页 |
| 1.2 转录因子在小鼠ES细胞多能性维持扮演的重要角色 | 第16-20页 |
| 1.2.1 小鼠ES细胞中维持多能性核心转录因子 | 第16-17页 |
| 1.2.2 拓展的核心调控网络 | 第17-18页 |
| 1.2.3 转录因子的模块化工作模式 | 第18-20页 |
| 1.3 小鼠ES细胞多能性相关重要信号通路的综述 | 第20-27页 |
| 1.3.1 LIF/JAK/STAT3 signaling pathway | 第20-22页 |
| 1.3.2 Canonical Wnt/β-catenin signaling pathway | 第22-24页 |
| 1.3.3 FGF/MEK/ERK signaling pathway | 第24-26页 |
| 1.3.4 TGF-β/SMAD signaling pathway | 第26-27页 |
| 1.4 小分子化合物对维持ES细胞多能性的重要进展 | 第27-31页 |
| 1.5 本研究的立项意义和内容 | 第31-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-46页 |
| 2.1 材料 | 第33-37页 |
| 2.1.1 引物 | 第33页 |
| 2.1.2 载体、菌株、细胞 | 第33页 |
| 2.1.3 试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 主要耗材和仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.5 主要实验试剂的配置 | 第35-37页 |
| 2.1.6 实用生物学软件和数据库 | 第37页 |
| 2.2 方法 | 第37-46页 |
| 2.2.1 载体构建 | 第37-40页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.2.3 细胞转染及慢病毒包装 | 第41页 |
| 2.2.4 稳转细胞系的筛选 | 第41-42页 |
| 2.2.5 小分子化合物处理细胞 | 第42页 |
| 2.2.6 总RNA提取与反转录 | 第42-43页 |
| 2.2.7 实时定量PCR试验 | 第43页 |
| 2.2.8 基因芯片检测与分析 | 第43-44页 |
| 2.2.9 免疫荧光染色 | 第44页 |
| 2.2.10 碱性磷酸酶染色 | 第44页 |
| 2.2.11 Western Blotting | 第44-46页 |
| 第三章 不同小分子化合物维持ES细胞多能性功能交集的发掘和研究 | 第46-72页 |
| 3.1 芯片技术揭示不同多能性相关小分子化合物功能交集 | 第46-66页 |
| 3.1.1 利用SPIED富集分析芯片数据的可靠性 | 第46-48页 |
| 3.1.2 聚类分析验证小分子化合物对多能性的作用方向 | 第48-52页 |
| 3.1.3 小分子化合物调控基因的重叠生物功能 | 第52-60页 |
| 3.1.4 小分子化合物共同影响的细胞信号通路研究 | 第60-66页 |
| 3.2 不同小分子化合物下游靶基因的交集研究 | 第66-72页 |
| 3.2.1 小分子化合物上调基因的交集 | 第66页 |
| 3.2.2 小分子化合物上调基因和RA芯片数据重叠 | 第66页 |
| 3.2.3 小分子化合物上调基因和LIF下游靶标重叠 | 第66-67页 |
| 3.2.4 小分子化合物上调基因和重编程相关基因芯片数据重叠 | 第67页 |
| 3.2.5 小分子化合物上调基因列表和ES细胞多能性的关联分析 | 第67-69页 |
| 3.2.6 小分子化合物下调基因的交集 | 第69页 |
| 3.2.7 小分子化合物上调基因列表和ES细胞多能性的关联分析 | 第69-72页 |
| 第四章 Lrrc34和Hesx1在ES细胞多能性维持的作用探究 | 第72-87页 |
| 4.1 Lrrc34在ES细胞多能性维持的作用探究 | 第72-74页 |
| 4.2 Hesx1在ES细胞多能性维持的作用探究 | 第74-87页 |
| 4.2.1 过表达Hesx1可以促进ES细胞的多能性 | 第75-76页 |
| 4.2.2 过表达Hesx1可以拮抗RA诱导的细胞分化 | 第76-77页 |
| 4.2.3 稳定敲降Hesx1的表达对ES细胞多能性的影响 | 第77-79页 |
| 4.2.4 稳定表达Hesx1支持ES细胞的自我更新 | 第79-84页 |
| 4.2.5 LIF通过Jak/Stat3信号转导途径诱导Hesx1的表达 | 第84-85页 |
| 4.2.6 CHIR、PD、LIF通过独立的信号通路诱导Hesx1表达 | 第85-87页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第87-93页 |
| 5.1 讨论 | 第87-91页 |
| 5.2 结论 | 第91页 |
| 5.3 本文创新之处和进一步研究的内容 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-103页 |
| 附录 | 第103-104页 |
| 缩略词表 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简介 | 第106页 |
