| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第3-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 主要缩略词 | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-26页 |
| 1 杀菌性/通透性增强蛋白的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.1 BPI 的分布及蛋白结构 | 第16-17页 |
| 1.2 BPI 的生物学功能 | 第17-19页 |
| 2 cDNA 末端快速扩增技术 | 第19-20页 |
| 2.1 RACE 的原理 | 第19-20页 |
| 2.2 RACE 技术的优点 | 第20页 |
| 3 生物信息学 | 第20-22页 |
| 3.1 生物信息学的产生 | 第20页 |
| 3.2 生物信息学概述 | 第20-21页 |
| 3.3 生物信息学主要研究内容： | 第21-22页 |
| 4 原核表达 | 第22-24页 |
| 4.1 原核表达系统 | 第22-23页 |
| 4.2 原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
| 5 蛋白纯化技术 | 第24-25页 |
| 5.1 根据蛋白质溶解度不同的分离 | 第24页 |
| 5.2 根据蛋白质分子大小的差别的分离方法 | 第24页 |
| 5.3 根据蛋白质带电性质进行分离 | 第24-25页 |
| 5.4 根据配体特异性的分离方法－亲和色谱法 | 第25页 |
| 6 展望 | 第25-26页 |
| 实验一 巴什拜羊及杂交羊 BPI 基因全长 cDNA 序列的扩增 | 第26-42页 |
| 摘要 | 第26-27页 |
| 1.材料与方法 | 第27-32页 |
| 1.1 实验材料 | 第27页 |
| 1.2 试验方法 | 第27-32页 |
| 2.结果 | 第32-39页 |
| 2.1 中性粒细胞的分离及 RNA 的检测 | 第32-33页 |
| 2.2 BPI 基因 cDNA 3′末端的扩增 | 第33-34页 |
| 2.3 BPI 基因 cDNA 5′末端的扩增 | 第34-35页 |
| 2.4 巴什拜羊 BPI 基因 cDNA 序列分析及 RNA 二级结构预测 | 第35-39页 |
| 3.讨论 | 第39-42页 |
| 实验二 BPI全长基因序列的信息学分析 | 第42-53页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1.材料与方法 | 第43页 |
| 1.1 生物信息学数据库和软件 | 第43页 |
| 1.2 方法 | 第43页 |
| 2.结果 | 第43-51页 |
| 2.1 新疆巴什拜羊和杂交羊 BPI 基因基本信息与理化性质分析 | 第43-44页 |
| 2.2 BPI 蛋白的信号肽分析 | 第44-45页 |
| 2.3 BPI 蛋白跨膜区检测 | 第45-46页 |
| 2.4 BPI 蛋白卷曲螺旋的预测分析 | 第46-47页 |
| 2.5 BPI 蛋白亚细胞定位 | 第47页 |
| 2.6 BPI 蛋白二级结构预测分析 | 第47-48页 |
| 2.7 BPI 三级结构预测分析 | 第48-49页 |
| 2.8 BPI 蛋白保守区域预测 | 第49-50页 |
| 2.9 BPI 蛋白的分子进化分析 | 第50-51页 |
| 3.讨论 | 第51-53页 |
| 实验三 巴什拜羊和杂交羊 BPI基因 N-端序列的扩增 | 第53-58页 |
| 摘要 | 第53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-54页 |
| 1.1 实验动物 | 第53页 |
| 1.2 实验仪器 | 第53页 |
| 1.3 实验试剂 | 第53-54页 |
| 1.4 引物设计 | 第54页 |
| 1.5 中性粒细胞的分离及 RNA 的提取 | 第54页 |
| 1.6 目的基因的扩增 | 第54页 |
| 1.7 序列分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-57页 |
| 2.1 巴什拜羊及杂交羊 BPI 基因 N-端序列的克隆 | 第54-56页 |
| 2.2 巴什拜羊及杂交羊 BPI 基因 N-端序列的克隆 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 实验四 巴什拜羊和杂交羊 BPI基因的原核表达 | 第58-65页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| 1 材料和方法 | 第59-62页 |
| 1.1 实验动物 | 第59页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第59页 |
| 1.3 实验材料及试剂 | 第59页 |
| 1.4 实验方法 | 第59-61页 |
| 1.5 序列测定 | 第61页 |
| 1.6 融合诱导表达 | 第61页 |
| 1.7 蛋白表达形式的鉴定 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| 2.1 重组质粒的检测 | 第62页 |
| 2.2 新疆巴什拜羊和杂交羊 pGEX-BPI 的表达 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 实验五 巴什拜羊和杂交羊重组 BPI蛋白的纯化及活性检测 | 第65-72页 |
| 摘要 | 第65页 |
| 1 材料和方法 | 第65-67页 |
| 1.1 实验试剂 | 第65页 |
| 1.2 主要仪器 | 第65-66页 |
| 1.3 实验方法 | 第66-67页 |
| 2 结果 | 第67-70页 |
| 2.1 重组 BPI 蛋白的纯化及鉴定 | 第67-68页 |
| 2.2 微量肉汤稀释法抑菌效果 | 第68-69页 |
| 2.3 琼脂糖抑菌试验效果 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 全文总结 | 第72页 |
| 创新点 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 附录：实验试剂配制 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
