| 中英文缩略词表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 引言 | 第15-17页 |
| 第二章 脂联素、ET-1 及脂联素与 ET-1 共同作用下对肝星状细胞收缩的影响 | 第17-24页 |
| 2.1 试剂材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第17页 |
| 2.1.2 耗材与主要实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂制备 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 肝星状细胞 HSC-T6 的冻存与培养 | 第18-19页 |
| (1) 肝星状细胞 HSC-T6 的冻存 | 第18页 |
| (2) 肝星状细胞 HSC-T6 复苏与传代 | 第18-19页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第19页 |
| 2.2.3 胶原晶格实验步骤 | 第19-20页 |
| 2.3 统计方法 | 第20页 |
| 2.4 结果 | 第20-22页 |
| 2.5 讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 脂联素对活化的肝星状细胞 ET-1 分子生物学的影响 | 第24-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第26页 |
| 3.2.2 实验分组 | 第26-27页 |
| 3.2.3 qRT-PCR 法定量检测各组 HSC-T6 细胞 ET-1 mRNA 的表达 | 第27-29页 |
| （一）qRT-PCR 检测的引物序列设计 | 第27页 |
| （二）细胞总的 RNA 提取 | 第27-28页 |
| （三）逆转录 cDNA 的制备 | 第28页 |
| （四）实时定量 PCR 检测目的基因的 mRNA 表达水平 | 第28-29页 |
| 3.2.4 Western blot 法检测各组 HSC-T6 细胞 ET-1 蛋白的表达 | 第29-33页 |
| 3.2.4.1 细胞样品的制备 | 第29页 |
| 3.2.4.2 细胞蛋白的提取 | 第29页 |
| 3.2.4.3 测定蛋白浓度 | 第29-30页 |
| 3.2.4.4 Western blot 主要溶液的配制 | 第30-31页 |
| 3.2.4.5 SDS-PAGE 电泳 | 第31页 |
| 3.2.4.6 样品处理 | 第31页 |
| 3.2.4.7 灌胶与上样 | 第31-32页 |
| 3.2.4.8 转膜 | 第32页 |
| 3.2.4.9 膜的封闭 | 第32页 |
| 3.2.4.10 抗原抗体反应 | 第32页 |
| 3.2.4.11 ECL 显色，X 片曝光 | 第32页 |
| 3.2.4.12 显影、定影 | 第32-33页 |
| 3.2.4.13 图象分析 | 第33页 |
| 3.2.5 ELISA 法检测各组 HSC-T6 细胞培养上清液 ET-1 蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 3.3 统计学处理 | 第34页 |
| 3.4 结果 | 第34-37页 |
| 3.4.1 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞中的 mRNA 表达水平 | 第34-35页 |
| 3.4.2 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞中的蛋白表达 | 第35-36页 |
| 3.4.3 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞培养上清液中的蛋白表达 | 第36-37页 |
| 3.5 讨论 | 第37-40页 |
| 第四章 脂联素影响 ET-1 诱导的肝星状细胞收缩的信号传导机制 | 第40-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.1.1 研究对象 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 4.2.2 实验分组 | 第40-41页 |
| 4.2.3 采用 qRT-PCR 检测各实验组 HSC-T6 中 iNOS mRNA 的表达 | 第41页 |
| 4.2.4 采用 Western blot 法检测各实验组 HSC-T6 中 iNOS 蛋白水平的表达 | 第41-42页 |
| 4.2.5 采用 Western blot 法检测各实验组 HSC-T6 中 AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 4.3 统计学分析 | 第43页 |
| 4.4 结果 | 第43-47页 |
| 4.4.1 各组 HSC-T6 中 iNOS 的 mRNA 及蛋白表达 | 第43-45页 |
| 4.4.2 各组 HSC-T6 中 AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt 的蛋白表达 | 第45-47页 |
| 4.5 讨论 | 第47-52页 |
| 第五章 结语 | 第52-53页 |
| 第六章 问题和展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 文献综述 | 第56-65页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
