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脂联素对内皮素-1诱导的肝星状细胞收缩的影响及作用机制研究

中英文缩略词表第6-8页
中文摘要第8-11页
Abstract第11-14页
第一章 引言第15-17页
第二章 脂联素、ET-1 及脂联素与 ET-1 共同作用下对肝星状细胞收缩的影响第17-24页
    2.1 试剂材料第17-18页
        2.1.1 研究对象第17页
        2.1.2 耗材与主要实验试剂第17页
        2.1.3 主要试剂制备第17-18页
        2.1.4 主要实验仪器第18页
    2.2 试验方法第18-20页
        2.2.1 肝星状细胞 HSC-T6 的冻存与培养第18-19页
            (1) 肝星状细胞 HSC-T6 的冻存第18页
            (2) 肝星状细胞 HSC-T6 复苏与传代第18-19页
        2.2.2 细胞计数第19页
        2.2.3 胶原晶格实验步骤第19-20页
    2.3 统计方法第20页
    2.4 结果第20-22页
    2.5 讨论第22-24页
第三章 脂联素对活化的肝星状细胞 ET-1 分子生物学的影响第24-40页
    3.1 实验材料第24-26页
        3.1.1 研究对象第24页
        3.1.2 主要试剂第24-25页
        3.1.3 主要仪器第25-26页
    3.2 实验方法第26-34页
        3.2.1 细胞培养第26页
        3.2.2 实验分组第26-27页
        3.2.3 qRT-PCR 法定量检测各组 HSC-T6 细胞 ET-1 mRNA 的表达第27-29页
            (一)qRT-PCR 检测的引物序列设计第27页
            (二)细胞总的 RNA 提取第27-28页
            (三)逆转录 cDNA 的制备第28页
            (四)实时定量 PCR 检测目的基因的 mRNA 表达水平第28-29页
        3.2.4 Western blot 法检测各组 HSC-T6 细胞 ET-1 蛋白的表达第29-33页
            3.2.4.1 细胞样品的制备第29页
            3.2.4.2 细胞蛋白的提取第29页
            3.2.4.3 测定蛋白浓度第29-30页
            3.2.4.4 Western blot 主要溶液的配制第30-31页
            3.2.4.5 SDS-PAGE 电泳第31页
            3.2.4.6 样品处理第31页
            3.2.4.7 灌胶与上样第31-32页
            3.2.4.8 转膜第32页
            3.2.4.9 膜的封闭第32页
            3.2.4.10 抗原抗体反应第32页
            3.2.4.11 ECL 显色,X 片曝光第32页
            3.2.4.12 显影、定影第32-33页
            3.2.4.13 图象分析第33页
        3.2.5 ELISA 法检测各组 HSC-T6 细胞培养上清液 ET-1 蛋白的表达第33-34页
    3.3 统计学处理第34页
    3.4 结果第34-37页
        3.4.1 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞中的 mRNA 表达水平第34-35页
        3.4.2 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞中的蛋白表达第35-36页
        3.4.3 ET-1 在各组 HSC-T6 细胞培养上清液中的蛋白表达第36-37页
    3.5 讨论第37-40页
第四章 脂联素影响 ET-1 诱导的肝星状细胞收缩的信号传导机制第40-52页
    4.1 实验材料第40页
        4.1.1 研究对象第40页
        4.1.2 主要试剂第40页
        4.1.3 实验仪器第40页
    4.2 实验方法第40-43页
        4.2.1 细胞培养第40页
        4.2.2 实验分组第40-41页
        4.2.3 采用 qRT-PCR 检测各实验组 HSC-T6 中 iNOS mRNA 的表达第41页
        4.2.4 采用 Western blot 法检测各实验组 HSC-T6 中 iNOS 蛋白水平的表达第41-42页
        4.2.5 采用 Western blot 法检测各实验组 HSC-T6 中 AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt蛋白的表达第42-43页
    4.3 统计学分析第43页
    4.4 结果第43-47页
        4.4.1 各组 HSC-T6 中 iNOS 的 mRNA 及蛋白表达第43-45页
        4.4.2 各组 HSC-T6 中 AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt 的蛋白表达第45-47页
    4.5 讨论第47-52页
第五章 结语第52-53页
第六章 问题和展望第53-54页
参考文献第54-56页
文献综述第56-65页
    参考文献第62-65页
攻读硕士期间发表文章第65-66页
致谢第66-67页

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