| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语/符号说明 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 研究现状、成果 | 第17-19页 |
| 研究目的、方法 | 第19-20页 |
| 一、实验仪器和材料 | 第20-28页 |
| 1.1 主要实验试剂 | 第20-23页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第23-25页 |
| 1.3 主要实验溶液的配制 | 第25-28页 |
| 二、小鼠汗腺全发育模型 | 第28-39页 |
| 2.1 对象与方法 | 第28-32页 |
| 2.1.1 C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)10sb/J小鼠汗腺细胞的纯化与培养 | 第28页 |
| 2.1.2 细胞免疫荧光检测不同时期汗腺细胞角质蛋白的表达 | 第28-29页 |
| 2.1.3 不同时期汗腺细胞RNA的提取 | 第29页 |
| 2.1.4 Real-time PCR检测不同时期汗腺细胞角质蛋白的表达 | 第29-31页 |
| 2.1.5 组织切片免疫荧光检测角质蛋白在汗腺细胞的具体表达位置 | 第31页 |
| 2.1.6 统计学分析 | 第31-32页 |
| 2.2 结果 | 第32-36页 |
| 2.2.1 不同时期小鼠原代汗腺细胞的形态学观察 | 第32-33页 |
| 2.2.2 细胞免疫荧光检测不同时期小鼠汗腺细胞角蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 2.2.3 RT-PCR检测不同时期小鼠汗腺细胞角蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 2.2.4 组织切片免疫荧光检测不同时期小鼠汗腺细胞角蛋白的表达 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 三、关键时间点汗腺与表皮的差异性研究 | 第39-46页 |
| 3.1 对象与方法 | 第39-41页 |
| 3.1.1 汗腺细胞与表皮细胞的纯化分离 | 第39页 |
| 3.1.2 组织切片HE染色观察表皮干细胞与汗腺细胞的不同 | 第39-40页 |
| 3.1.3 细胞免疫荧光检测小鼠表皮干细胞和汗腺细胞中不同角质蛋白的表达 | 第40页 |
| 3.1.4 组织切片免疫荧光检测E12.5和P5小鼠足部皮肤的角蛋白表达差异 | 第40页 |
| 3.1.5 组织切片HE染色观察E12.5小鼠足部表皮干细胞与背部表皮干细胞的一致性 | 第40页 |
| 3.1.6 免疫荧光观察E12.5 小鼠足部表皮干细胞与背部表皮干细胞的一致性 | 第40页 |
| 3.1.7 统计学分析 | 第40-41页 |
| 3.2 结果 | 第41-44页 |
| 3.2.1 表皮干细胞与汗腺细胞的形态学差异 | 第41页 |
| 3.2.2 组织切片HE染色显示E12.5 小鼠足部皮肤结构与P5小鼠足部皮肤结构的差异 | 第41-42页 |
| 3.2.3 表皮干细胞和汗腺细胞对不同角质蛋白的表达情况 | 第42页 |
| 3.2.4 组织切片免疫荧光检测E12.5 和P5小鼠足部皮肤的角蛋白表达差异 | 第42-43页 |
| 3.2.5 组织切片HE染色观察E12.5小鼠足部表皮干细胞与背部表皮干细胞的一致性 | 第43-44页 |
| 3.2.6 免疫荧光法观察E12.5小鼠足部表皮干细胞与背部表皮干细胞的一致性 | 第44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 四、基于RNA-seq测序与生物信息学分析的关键转录因子筛选 | 第46-55页 |
| 4.1 对象与方法 | 第46-48页 |
| 4.1.1 通过RNA-seq测序及生物信息学分析筛选出关键转录因子 | 第46页 |
| 4.1.2 Trizol法提取表皮干细胞和汗腺细胞中RNA及蛋白质 | 第46-47页 |
| 4.1.3 RT-PCR和Western blot法分别检测表皮干细胞和汗腺细胞在基因和蛋白水平对关键转录因子Fox-c1和Irf-6 的表达 | 第47-48页 |
| 4.1.4 统计学分析 | 第48页 |
| 4.2 结果 | 第48-52页 |
| 4.2.1 通过RNA-seq测序及生物信息学分析筛选出关键转录因子 | 第48-50页 |
| 4.2.2 关键转录因子的生物信息学和分子生物学验证 | 第50-52页 |
| 4.3 讨论 | 第52-54页 |
| 4.4 小结 | 第54-55页 |
| 五、关键转录因子在表皮干细胞向汗腺细胞特化过程中的分子机制研究 | 第55-69页 |
| 5.1 对象和方法 | 第55-58页 |
| 5.1.1 慢病毒的包装 | 第55页 |
| 5.1.2 细胞转染与筛选 | 第55-56页 |
| 5.1.3 细胞活性的测定 | 第56-57页 |
| 5.1.4 细胞免疫荧光法检测转染后不同组细胞角质蛋白的表达情况 | 第57页 |
| 5.1.5 Q-PCR法检测转染后不同组细胞角质蛋白的表达情况 | 第57页 |
| 5.1.6 小鼠脚掌深II度烫伤模型的构建以及转染后细胞的注入 | 第57-58页 |
| 5.1.7 表皮干细胞诱导为汗腺细胞形成的体内检测 | 第58页 |
| 5.1.8 碘-淀粉试验检测小鼠发汗情况 | 第58页 |
| 5.1.9 统计学分析 | 第58页 |
| 5.2 结果 | 第58-65页 |
| 5.2.1 以慢病毒为载体转染小鼠表皮干细胞 14d后细胞形态学变化 | 第58-59页 |
| 5.2.2 CCK-8 检测表皮干细胞向汗腺细胞转分化的活性变化 | 第59-60页 |
| 5.2.3 细胞免疫荧光检测表皮干细胞向汗腺细胞的转分化 | 第60-61页 |
| 5.2.4 实时定量PCR检测表皮干细胞向汗腺细胞的转分化 | 第61-62页 |
| 5.2.5 组织切片HE染色检测表皮干细胞向汗腺细胞在体内转分化情况 | 第62-63页 |
| 5.2.6 组织切片免疫荧光检测表皮干细胞向汗腺细胞在体内转分化情况 | 第63-64页 |
| 5.2.7 碘-淀粉试验检测汗腺功能 | 第64-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-68页 |
| 5.4 小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第75-77页 |
| 综述 汗腺发育与汗液分泌的相关机制 | 第77-88页 |
| 综述参考文献 | 第84-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
