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调节性T细胞输注移植对缺血性脑卒中tPA溶栓后出血转换的治疗作用及其机制探讨

缩略词表第5-7页
1. 中文摘要第7-9页
2. Abstract第9-10页
3. 前言第11-14页
4. 材料和方法第14-26页
    4.1 实验材料第14-17页
        4.1.1 实验动物第14页
        4.1.2 主要试剂和来源第14-16页
        4.1.3 仪器第16-17页
    4.2 实验方法第17-25页
        4.2.1 动物模型第17-18页
        4.2.2 免疫磁珠两步法提取CD4+ CD25+调节性T细胞第18页
        4.2.3 中性粒细胞的原代培养以及与Treg细胞共培养第18-19页
        4.2.4 神经功能行为学评价第19-20页
        4.2.5 TTC染色测定脑梗死体积第20页
        4.2.6 Evans Blue渗透进入脑组织定量检测第20页
        4.2.7 血红蛋白浓度分光光度测量定量脑出血量第20-21页
        4.2.8 总蛋白的提取第21页
        4.2.9 考马斯亮蓝法蛋白定量第21-22页
        4.2.11 Western印迹蛋白条带积分光密度分析第22页
        4.2.12 明胶酶谱(gelatin zymography)第22-23页
        4.2.13 组织免疫荧光化学第23页
        4.2.14 免疫组化检测脑梗死体积第23-24页
        4.2.15 中性粒细胞来源的MMP-9的体内实验分析第24-25页
    4.3 统计学分析第25-26页
5. 实验结果第26-44页
    5.1. 调节性T细胞输注移植可以减轻缺血性脑卒中后tPA溶栓治疗导致的出血转换第26-35页
        5.1.1 小鼠缺血性脑卒中再灌注模型的建立第26页
        5.1.2 CD4+CD25+Treg细胞提纯和功能鉴定第26-27页
        5.1.3 调节性T细胞输注移植可明显减轻缺血性脑卒中后tPA溶栓后出血转换第27-28页
        5.1.4 调节性T细胞输注移植可减轻tPA溶栓后出血转换导致的脑损伤第28-29页
        5.1.5 Treg改善了缺血性脑卒中及tPA溶栓后出血转换后的神经功能恢复并具有长时程的神经保护用第29-30页
        5.1.6 Treg细胞输注移植可减少tPA溶栓后出血转换过程中的血脑屏障破坏第30-32页
        5.1.7 Treg细胞输注移植有助于保护tPA溶栓后出血转换过程中的血脑屏障紧密连接相关蛋白的完整性第32-34页
        5.1.8 Treg治疗通过抑制MMP-9的升高对tPA溶栓后出血转换起到了抑制作用第34-35页
    5.2 调节性T细胞输注移植对血脑屏障保护作用机制的探讨第35-44页
        5.2.1 体外实验中Tregs通过PD-L1/PD-1抑制中性粒细胞源性MMP-9第35-38页
        5.2.2 整体模型上进一步证明了PD-L1介导缺血性脑卒中后Tregs对neutrophil源性MMP-9的抑制作用第38-39页
        5.2.3 PD-L1是缺血性脑卒中后Tregs输注移植有效保护血脑屏障完整性机制中的主要靶点第39-42页
        5.2.4 使用PD-L1抗体处理或PD-L1敲除小鼠则废除了Tregs的神经保护作用第42-44页
6. 小结第44-45页
7. 讨论第45-49页
8. 综述第49-59页
9. 参考文献第59-70页
10. 致谢第70-71页
11. 附录第71-72页

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