第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 研究背景 | 第13-14页 |
1.2 AD病理研究 | 第14-15页 |
1.2.1 老年斑(SP) | 第14页 |
1.2.2 神经元纤维缠结(NFT) | 第14-15页 |
1.2.3 神经元的大量缺失 | 第15页 |
1.3 神经干细胞 | 第15-16页 |
1.3.1 神经干细胞的概念 | 第15页 |
1.3.2 神经干细胞在AD治疗中的应用 | 第15-16页 |
1.3.3 神经干细胞治疗存在的问题 | 第16页 |
1.4 提高神经干细胞治疗效果的策略 | 第16-19页 |
1.4.1 促进神经干细胞可控分化 | 第16-18页 |
1.4.2 实现神经干细胞的实时追踪 | 第18-19页 |
1.5 纳米药物载体 | 第19-20页 |
1.6 立题依据 | 第20-23页 |
第二章 大分子前药PHEMA_m-RA-PCB_n-CPP的合成及表征 | 第23-32页 |
2.1 试剂及仪器 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-27页 |
2.2.1 CB的合成 | 第24页 |
2.2.2 PHEMA_m-PCB_n的合成 | 第24-25页 |
2.2.3 PHEMA_m-PEG的合成 | 第25页 |
2.2.4 PHEMA_m-RA-PCB_n的合成 | 第25页 |
2.2.5 大分子前药PHEMA_m-RA-PCB_n-CPP的合成 | 第25-26页 |
2.2.6 大分子前药中RA载药率的测定 | 第26-27页 |
2.2.7 大分子前药中CPP连接效率的测定 | 第27页 |
2.2.8 临界胶束浓度的测定(CMC) | 第27页 |
2.3 结果与讨论 | 第27-31页 |
2.3.1 CB单体的合成 | 第27-28页 |
2.3.2 大分子前药PHEMA_m-RA-PCB_n-CPP的合成 | 第28-29页 |
2.3.3 PHEMA_m-RA-PEG-CPP的合成 | 第29页 |
2.3.4 RA的载药率 | 第29-30页 |
2.3.5 大分子前药中CPP的连接效率 | 第30页 |
2.3.6 大分子前药的临界胶束浓度 | 第30-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 纳米载药体系的构建及表征 | 第32-42页 |
3.1 试剂及仪器 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-36页 |
3.2.1 纳米载药体系的制备 | 第33-34页 |
3.2.2 纳米药物载体pH缓冲作用的测定 | 第34页 |
3.2.3 纳米药物载体复合siRNA的能力检测 | 第34-35页 |
3.2.4 纳米载药体系的粒径电位检测 | 第35页 |
3.2.5 纳米载药体系形貌表征 | 第35页 |
3.2.6 纳米载药体系NMR弛豫率分析 | 第35页 |
3.2.7 纳米载药体系体外释药能力的测定 | 第35-36页 |
3.3 结果与讨论 | 第36-40页 |
3.3.1 纳米药物载体的质子缓冲能力 | 第36-37页 |
3.3.2 纳米药物载体对siRNA药物的复合能力 | 第37-38页 |
3.3.3 纳米载药体系在不同N/P时的粒径和电位 | 第38-39页 |
3.3.4 纳米药物体系的形貌 | 第39页 |
3.3.5 纳米载药体系的磁性能 | 第39页 |
3.3.6 纳米载药体系在不同液体环境中的药物释放情况 | 第39-40页 |
3.4 本章小结 | 第40-42页 |
第四章 纳米载药体系促进神经干细胞分化的体外实验 | 第42-59页 |
4.1 试剂及仪器 | 第42-43页 |
4.2 主要溶液配制 | 第43-44页 |
4.2.1 无血清完全培养基的配制 | 第43页 |
4.2.2 分化培养基的配制 | 第43页 |
4.2.3 4%多聚甲醛溶液的配制 | 第43-44页 |
4.2.4 多聚赖氨酸溶液的配制 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-49页 |
4.3.1 神经干细胞的提取 | 第44页 |
4.3.2 神经干细胞的培养 | 第44页 |
4.3.3 神经干细胞的传代 | 第44-45页 |
4.3.4 神经干细胞的鉴定 | 第45页 |
4.3.5 纳米载药体系的细胞毒性 | 第45-46页 |
4.3.6 纳米载药体系的细胞内吞 | 第46-47页 |
4.3.7 纳米载药体系的内涵体逃逸 | 第47页 |
4.3.8 siRNA药物在细胞内的释放 | 第47-48页 |
4.3.9 神经干细胞的分化 | 第48-49页 |
4.3.10 统计分析 | 第49页 |
4.4 结果与讨论 | 第49-57页 |
4.4.1 神经干细胞的鉴定结果 | 第49-50页 |
4.4.2 细胞毒性试验结果 | 第50-51页 |
4.4.3 神经干细胞对纳米药物体系的内吞实验结果 | 第51-53页 |
4.4.4 细胞超薄切片观察结果 | 第53-54页 |
4.4.5 纳米药物载体的内涵体逃逸及siRNA释放实验结果 | 第54-56页 |
4.4.6 纳米载药体系促进神经干细胞分化的实验结果 | 第56-57页 |
4.5 本章小结 | 第57-59页 |
第五章 纳米载药体系对AD模型鼠的行为学及药效学研究 | 第59-67页 |
5.1 试剂及仪器 | 第59-60页 |
5.2 主要溶液配制 | 第60页 |
5.3 实验方法 | 第60-63页 |
5.3.1 动物饲养 | 第60-61页 |
5.3.2 神经干细胞脑内移植 | 第61页 |
5.3.3 小动物核磁成像检测 | 第61页 |
5.3.4 AD鼠记忆能力的检测 | 第61-62页 |
5.3.5 脑组织的取材及冰冻切片的制备 | 第62-63页 |
5.3.6 组织切片的尼氏染色及普鲁士蓝染色 | 第63页 |
5.3.7 统计分析 | 第63页 |
5.4 结果与讨论 | 第63-66页 |
5.4.1 Mirror水迷宫实验结果 | 第63-64页 |
5.4.2 尼氏染色实验结果 | 第64-65页 |
5.4.3 小鼠大脑核磁成像实验结果 | 第65-66页 |
5.4.4 普鲁士蓝染色实验结果 | 第66页 |
5.5 本章小结 | 第66-67页 |
第六章 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间发表论文 | 第78页 |