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栽培草莓高效遗传转化体系建立及优化研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-17页
2 材料与方法第17-26页
    2.1 植物材料第17页
    2.2 八倍体草莓试管苗无性系的建立第17-18页
        2.2.1 杂交后代实生种子的消毒培养第17页
        2.2.2 试管苗无性系的建立第17-18页
    2.3 草莓离体再生试验设计第18-19页
        2.3.1 离体再生能力的比较第18页
        2.3.2 具有高再生能力单株的初选第18页
        2.3.3 不同基因型再生能力的比较第18-19页
        2.3.4 草莓离体再生体系优化第19页
    2.4 农杆菌介导遗传转化方法以及试验方法第19-20页
        2.4.1 菌株和质粒第19-20页
        2.4.2 制备菌液第20页
        2.4.3 侵染和抗性芽筛选第20页
    2.5 转化试验设计第20-22页
        2.5.1 GUS基因瞬时转化第20-21页
        2.5.2 稳定遗传转化体系优化试验设计第21-22页
    2.6 优系A-19对赤霉素敏感性试验第22-23页
        2.6.1 培养基中外源施加GA_3对A-19组培苗的影响第22-23页
        2.6.2 叶面喷施GA_3对A-19田间植株的影响第23页
        2.6.3 组培苗驯化移栽第23页
    2.7 转基因植株鉴定第23-25页
        2.7.1 卡那霉素抗性的鉴定方法第23-24页
        2.7.2 NPTⅡ基因的PCR检测第24-25页
    2.8 数据统计第25-26页
3 结果与分析第26-46页
    3.1 具有高再生能力且对农杆菌敏感的草莓基因型筛选第26-31页
        3.1.1 草莓试管苗无性系的建立第26-27页
        3.1.2 不同组合再生能力的比较第27页
        3.1.3 初选无性系的再生能力比较第27-29页
        3.1.4 不同基因型对农杆菌敏感性比较第29-31页
    3.2 八倍体栽培草莓再生体系的优化第31-35页
        3.2.1 生长素种类对草莓离体再生不定芽效率的影响第31-33页
        3.2.2 激素组合对草莓叶片离体再生能力的影响第33-35页
    3.3 农杆菌介导的草莓转化体系的优化第35-41页
        3.3.1 不同抗生素种类及浓度对草莓叶片离体的影响第35-36页
        3.3.2 预培养对A-19遗传转化的影响第36-38页
        3.3.3 预培养时间对A-19转化效率的影响第38-39页
        3.3.4 不同基因型转化效率比较第39-41页
    3.4 转基因植株的获得与鉴定第41-42页
        3.4.1 转基因植株的获得第41页
        3.4.2 转基因株系卡那霉素抗性鉴定第41-42页
        3.4.3 转基因植株的PCR鉴定第42页
        3.4.4 GUS组织化学分析第42页
    3.5 外施GA对A-19生长发育的影响第42-46页
        3.5.1 培养基中GA浓度的对A-19试管苗生长发育的影响第42-43页
        3.5.2 叶面喷施GA对A-19田间植株生长发育的影响第43-46页
4 讨论第46-48页
    4.1 高再生能力且对农杆菌敏感的基因型的筛选第46页
    4.2 不同抗生素对草莓叶片再生效率的影响第46-47页
    4.3 预培养时间对栽培草莓遗传转化效率的影响第47-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54页

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