| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略词对照表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 植物NAC家族基因研究概况 | 第10-15页 |
| 1.1.1 NAC转录因子的结构及其分类 | 第10-12页 |
| 1.1.2 NAC转录因子在植物生长发育中的作用 | 第12-13页 |
| 1.1.3 NAC转录因子在植物抗非生物胁迫中的作用 | 第13-15页 |
| 1.1.4 NAC转录因子在植物中抗生物胁迫的作用 | 第15页 |
| 1.2 黄花苜蓿的研究概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 黄花苜蓿的分布及特性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 黄花苜蓿抗逆性研究 | 第16-17页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 菌种与载体 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制方法 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 黄花苜蓿幼苗培养 | 第20页 |
| 2.2.2 黄花苜蓿基因组DNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.3 黄花苜蓿总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 反转录合成cDNA第一条链 | 第22页 |
| 2.2.5 引物的设计与合成 | 第22-23页 |
| 2.2.6 RT-PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.7 连接及转化 | 第23-24页 |
| 2.2.8 快速提质粒法筛选重组菌 | 第24页 |
| 2.2.9 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第24页 |
| 2.2.10 重组质粒的酶切鉴定及测序分析 | 第24-25页 |
| 2.2.11 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.2.12 MfNAC基因DNA分析 | 第26页 |
| 2.2.13 MfNAC基因的表达分析 | 第26-28页 |
| 2.2.14 表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-48页 |
| 3.1 黄花苜蓿幼苗培养 | 第30页 |
| 3.2 黄花苜蓿基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.3 黄花苜蓿总RNA的提取 | 第31页 |
| 3.4 RT-PCR扩增 | 第31页 |
| 3.5 重组质粒的筛选 | 第31-32页 |
| 3.6 重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.7 目的基因的测序分析 | 第33-35页 |
| 3.8 黄花苜蓿MfNAC3的生物信息学分析 | 第35-38页 |
| 3.9 野生黄花苜蓿MfNAC3蛋白进化树分析 | 第38-40页 |
| 3.10 MfNAC3基因组DNA分析 | 第40-42页 |
| 3.11 MfNAC3基因的表达分析 | 第42-45页 |
| 3.11.1 组织特性分析 | 第42页 |
| 3.11.2 表达模式分析 | 第42-45页 |
| 3.12 超表达载体的构建 | 第45-48页 |
| 4 讨论与结论 | 第48-51页 |
| 4.1 讨论 | 第48-50页 |
| 4.2 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57页 |