| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 猪传染性胃肠炎病毒研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 TGEV概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 TGEV分子生物学特征 | 第12-15页 |
| 1.2 抗原表位研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 B细胞抗原表位的研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 T细胞抗原表位的研究 | 第16-17页 |
| 1.2.3 噬菌体展示技术在筛选抗原表位中的应用 | 第17-20页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-32页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.3 培养细胞和所用病毒 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 TGEV S_(AD)基因亚克隆及原核表达 | 第22-25页 |
| 2.2.2 S_(AD)重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第25页 |
| 2.2.3 TGEV S_(AD)蛋白单克隆抗体制备及特性鉴定 | 第25-28页 |
| 2.2.4 应用噬菌体展示技术筛选TGEV S_(AD)蛋白抗原表位 | 第28-32页 |
| 3 结果 | 第32-42页 |
| 3.1 重组表达质粒p ET-30a-S_(AD)的构建与鉴定 | 第32页 |
| 3.2 TGEV S_(AD)重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第32-34页 |
| 3.2.1 S_(AD)蛋白的诱导 | 第32-33页 |
| 3.2.2 S_(AD)蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 3.2.3 纯化回收后S_(AD)蛋白的浓度测定 | 第34页 |
| 3.3 TGEV S_(AD)单克隆抗体制备及特性鉴定 | 第34-38页 |
| 3.3.1 融合前抗S_(AD)蛋白抗体效价测定 | 第34页 |
| 3.3.2 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第34页 |
| 3.3.3 单克隆抗体亚类鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.4 腹水制备纯化与效价测定结果 | 第35页 |
| 3.3.5 单克隆抗体与TGEV结合的间接免疫荧光鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.3.6 MAb 2B10 的免疫印迹方法鉴定 | 第36-37页 |
| 3.3.7 单克隆抗体特异性分析 | 第37-38页 |
| 3.4 TGEV S_(AD)蛋白抗原表位的筛选 | 第38-42页 |
| 3.4.1 噬菌体筛选与富集 | 第38页 |
| 3.4.2 亲和能力的鉴定与测序 | 第38-40页 |
| 3.4.3 多肽与MAb 2B10 的结合性 | 第40页 |
| 3.4.4 多肽的竞争性阻断实验 | 第40-41页 |
| 3.4.5 荧光定量RT-PCR鉴定多肽对病毒的抑制作用 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 靶蛋白的选择和单克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
| 4.2 通过噬菌体展示技术筛选TGEV S_(AD)单克隆抗体抗原表位 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第57页 |
