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GST pull-down和免疫共沉淀联合质谱分析筛查弓形虫ROP18相互作用蛋白的研究

中英文缩略词对照表第7-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-16页
第一部分 GST Pull-Down筛选C17.2 神经干细胞内与弓形虫ROP18的互作蛋白第16-38页
    1 材料与方法第16-31页
        1.1 实验材料第16-21页
            1.1.1 实验动物第16页
            1.1.2 实验虫株第16页
            1.1.3 实验细胞第16页
            1.1.4 实验菌种与质粒第16页
            1.1.5 实验主要试剂第16-17页
            1.1.6 实验部分试剂配制第17-20页
            1.1.7 实验主要仪器第20-21页
        1.2 实验方法第21-31页
            1.2.1 弓形虫RH株速殖子的复苏、传代、收集与冻存第21-22页
            1.2.2 弓形虫RH株总RNA的提取与ROP18的扩增及优化第22-24页
            1.2.3 pGEX-ROP18原核表达载体的构建第24-27页
            1.2.4 重组菌的诱导表达及鉴定第27-28页
            1.2.5 C17.2 神经干细胞的复苏、传代与冻存第28-29页
            1.2.6 C17.2 神经干细胞的诱导分化及总蛋白的提取第29页
            1.2.7 GST Pull-Down筛选与ROP18的互作蛋白第29-30页
            1.2.8 质谱分析第30-31页
    2 结果第31-38页
        2.1 弓形虫ROP18及ROP18uc的扩增第31页
        2.2 弓形虫ROP18的密码子优化第31-33页
        2.3 三种ROP18的p GEX原核表达载体的鉴定第33页
        2.4 三种ROP18重组蛋白的诱导表达和鉴定第33-35页
        2.5 弓形虫ROP18u Pull Down分化C17.2 总蛋白第35-36页
        2.6 质谱分析第36-38页
第二部分 免疫共沉淀技术筛选C17.2 神经干细胞内与弓形虫ROP18的互作蛋白第38-55页
    1 材料与方法第38-47页
        1.1 实验材料第38-40页
            1.1.1 实验动物第38页
            1.1.2 实验细胞第38页
            1.1.3 实验菌种与质粒第38页
            1.1.4 实验特殊材料第38页
            1.1.5 实验主要试剂第38页
            1.1.6 实验部分试剂配制第38-39页
            1.1.7 实验主要仪器第39-40页
        1.2 实验方法第40-47页
            1.2.1 弓形虫ROP18的扩增第40页
            1.2.2 弓形虫ROP18慢病毒重组菌的构建第40-41页
            1.2.3 人胚肾上皮细胞 293T的复苏、传代与冻存第41-42页
            1.2.4 弓形虫ROP18慢病毒在 293T细胞内的包装第42-44页
            1.2.5 弓形虫ROP18慢病毒感染分化C17.2 及其总蛋白的提取第44页
            1.2.6 弓形虫 ROP18 多克隆抗体的制备第44-46页
            1.2.7 弓形虫ROP18多克隆抗体的鉴定第46-47页
            1.2.8 弓形虫ROP18与分化C17.2 总蛋白的免疫共沉淀第47页
    2 结果第47-51页
        2.1 弓形虫ROP18的扩增及重组慢病毒载体的鉴定第47-48页
        2.2 弓形虫ROP18慢病毒在 293T细胞内的包装第48-49页
        2.3 弓形虫ROP18慢病毒感染分化的C17.2 细胞第49页
        2.4 弓形虫ROP18多克隆抗体效价的ELISA检测第49-50页
        2.5 弓形虫ROP18多克隆抗体的Western Blot鉴定第50-51页
        2.6 免疫共沉淀筛选与ROP18互作的蛋白第51页
    3 讨论第51-54页
    4 结论第54-55页
参考文献第55-59页
附录一 个人简历第59-60页
附录二 致谢第60-61页
附录三 综述第61-70页
    参考文献第66-70页

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