中英文缩略词对照表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 GST Pull-Down筛选C17.2 神经干细胞内与弓形虫ROP18的互作蛋白 | 第16-38页 |
1 材料与方法 | 第16-31页 |
1.1 实验材料 | 第16-21页 |
1.1.1 实验动物 | 第16页 |
1.1.2 实验虫株 | 第16页 |
1.1.3 实验细胞 | 第16页 |
1.1.4 实验菌种与质粒 | 第16页 |
1.1.5 实验主要试剂 | 第16-17页 |
1.1.6 实验部分试剂配制 | 第17-20页 |
1.1.7 实验主要仪器 | 第20-21页 |
1.2 实验方法 | 第21-31页 |
1.2.1 弓形虫RH株速殖子的复苏、传代、收集与冻存 | 第21-22页 |
1.2.2 弓形虫RH株总RNA的提取与ROP18的扩增及优化 | 第22-24页 |
1.2.3 pGEX-ROP18原核表达载体的构建 | 第24-27页 |
1.2.4 重组菌的诱导表达及鉴定 | 第27-28页 |
1.2.5 C17.2 神经干细胞的复苏、传代与冻存 | 第28-29页 |
1.2.6 C17.2 神经干细胞的诱导分化及总蛋白的提取 | 第29页 |
1.2.7 GST Pull-Down筛选与ROP18的互作蛋白 | 第29-30页 |
1.2.8 质谱分析 | 第30-31页 |
2 结果 | 第31-38页 |
2.1 弓形虫ROP18及ROP18uc的扩增 | 第31页 |
2.2 弓形虫ROP18的密码子优化 | 第31-33页 |
2.3 三种ROP18的p GEX原核表达载体的鉴定 | 第33页 |
2.4 三种ROP18重组蛋白的诱导表达和鉴定 | 第33-35页 |
2.5 弓形虫ROP18u Pull Down分化C17.2 总蛋白 | 第35-36页 |
2.6 质谱分析 | 第36-38页 |
第二部分 免疫共沉淀技术筛选C17.2 神经干细胞内与弓形虫ROP18的互作蛋白 | 第38-55页 |
1 材料与方法 | 第38-47页 |
1.1 实验材料 | 第38-40页 |
1.1.1 实验动物 | 第38页 |
1.1.2 实验细胞 | 第38页 |
1.1.3 实验菌种与质粒 | 第38页 |
1.1.4 实验特殊材料 | 第38页 |
1.1.5 实验主要试剂 | 第38页 |
1.1.6 实验部分试剂配制 | 第38-39页 |
1.1.7 实验主要仪器 | 第39-40页 |
1.2 实验方法 | 第40-47页 |
1.2.1 弓形虫ROP18的扩增 | 第40页 |
1.2.2 弓形虫ROP18慢病毒重组菌的构建 | 第40-41页 |
1.2.3 人胚肾上皮细胞 293T的复苏、传代与冻存 | 第41-42页 |
1.2.4 弓形虫ROP18慢病毒在 293T细胞内的包装 | 第42-44页 |
1.2.5 弓形虫ROP18慢病毒感染分化C17.2 及其总蛋白的提取 | 第44页 |
1.2.6 弓形虫 ROP18 多克隆抗体的制备 | 第44-46页 |
1.2.7 弓形虫ROP18多克隆抗体的鉴定 | 第46-47页 |
1.2.8 弓形虫ROP18与分化C17.2 总蛋白的免疫共沉淀 | 第47页 |
2 结果 | 第47-51页 |
2.1 弓形虫ROP18的扩增及重组慢病毒载体的鉴定 | 第47-48页 |
2.2 弓形虫ROP18慢病毒在 293T细胞内的包装 | 第48-49页 |
2.3 弓形虫ROP18慢病毒感染分化的C17.2 细胞 | 第49页 |
2.4 弓形虫ROP18多克隆抗体效价的ELISA检测 | 第49-50页 |
2.5 弓形虫ROP18多克隆抗体的Western Blot鉴定 | 第50-51页 |
2.6 免疫共沉淀筛选与ROP18互作的蛋白 | 第51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
4 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
附录一 个人简历 | 第59-60页 |
附录二 致谢 | 第60-61页 |
附录三 综述 | 第61-70页 |
参考文献 | 第66-70页 |