| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 前言 | 第13-14页 |
| 2 LMNA基因的研究现状 | 第14-18页 |
| 2.1 LMNA基因的结构特征 | 第14页 |
| 2.2 LMNA基因的生物功能 | 第14-18页 |
| 2.2.1 LMNA基因相关的信号通路 | 第15-16页 |
| 2.2.2 LMNA对于转录因子的调控 | 第16-18页 |
| 3 肌肉发育和分化相关基因 | 第18-21页 |
| 3.1 成肌分化抗原 | 第18-19页 |
| 3.2 肌细胞生成素 | 第19-20页 |
| 3.3 生肌因子 5 | 第20页 |
| 3.4 配对盒蛋白 3 | 第20-21页 |
| 4 脂肪发育和分化相关基因 | 第21-23页 |
| 4.1 过氧化物酶体增殖蛋白激活受体 γ | 第21页 |
| 4.2 CCAAT/增强子结合蛋白 β | 第21-22页 |
| 4.3 乙酰辅酶A羧化酶 1 | 第22页 |
| 4.4 脂蛋白脂酶 | 第22-23页 |
| 第二章 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第三章 材料和方法 | 第24-46页 |
| 1 材料 | 第24-29页 |
| 1.1 主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
| 1.3 常用化学试剂及其配制 | 第26-28页 |
| 1.3.1 LB培养基的配制 | 第26页 |
| 1.3.2 其他主要化学试剂的配制 | 第26-28页 |
| 1.4 载体 | 第28页 |
| 1.5 主要分子生物学软件及数据库 | 第28-29页 |
| 1.6 主要引物设计 | 第29页 |
| 2 方法 | 第29-46页 |
| 2.1 pcDNA3.1-sLMNA载体的构建 | 第29-38页 |
| 2.1.1 LMNA基因DNA序列加酶切位点 | 第29-30页 |
| 2.1.2 LMNA基因PCR产物和pMD18-T载体双酶切 | 第30-32页 |
| 2.1.3 pMD18-T载体和LMNA基因的连接 | 第32-33页 |
| 2.1.4 菌液克隆检测与载体质粒提取 | 第33-34页 |
| 2.1.5 LMNA基因DNA序列加NheⅠ和KpnⅠ酶切位点 | 第34-35页 |
| 2.1.6 LMNA基因DNA序列和pcDNA 3.1 载体双酶切 | 第35页 |
| 2.1.7 pcDNA3.1-sLMNA质粒提取与检测 | 第35-38页 |
| 2.2 C2C12 细胞的超表达，干扰和分化 | 第38-43页 |
| 2.2.1 C2C12 细胞超表达LMNA基因 | 第38-42页 |
| 2.2.2 C2C12 细胞干扰LMNA基因 | 第42-43页 |
| 2.2.3 C2C12 细胞超表达LMNA基因后分化 | 第43页 |
| 2.2.4 C2C12 细胞干扰LMNA基因后分化 | 第43页 |
| 2.3 3T3-L1 细胞的超表达，干扰和分化 | 第43-46页 |
| 2.3.1 3T3-L1 细胞超表达LMNA基因 | 第43-44页 |
| 2.3.2 3T3-L1 细胞干扰LMNA基因 | 第44页 |
| 2.3.3 3T3-L1 细胞超表达LMNA基因后分化 | 第44-45页 |
| 2.3.4 3T3-L1 细胞干扰LMNA基因后分化 | 第45-46页 |
| 第四章 结果与分析 | 第46-63页 |
| 1 pcDNA3.1-sLMNA载体的构建 | 第46-51页 |
| 1.1 pMD18-T-sLMNA载体的构建及鉴定 | 第46-48页 |
| 1.2 pcDNA3.1-sLMNA载体的构建及鉴定 | 第48-51页 |
| 2 LMNA基因超表达和干扰对于肌肉发育及分化的影响 | 第51-58页 |
| 2.1 LMNA基因超表达对于肌肉发育和分化相关基因的影响 | 第51-52页 |
| 2.2 LMNA 基因干扰对于肌肉相关基因的影响 | 第52-54页 |
| 2.3 超表达LMNA基因对于C2C12 细胞分化的影响 | 第54-56页 |
| 2.4 干扰LMNA基因对于C2C12 细胞分化的影响 | 第56-58页 |
| 3 LMNA基因超表达和干扰对于脂肪发育及分化的影响 | 第58-63页 |
| 3.1 LMNA基因超表达对于脂肪相关基因的影响 | 第58-59页 |
| 3.2 LMNA基因干扰对于脂肪相关基因的影响 | 第59-60页 |
| 3.3 干扰LMNA基因对于 3T3-L1 细胞分化的影响 | 第60-61页 |
| 3.4 超表达LMNA基因对于 3T3-L1 细胞分化的影响 | 第61-63页 |
| 第五章 讨论 | 第63-68页 |
| 1 细胞培养条件的优化 | 第63-64页 |
| 2 肌肉发育和分化相关基因的影响 | 第64-66页 |
| 3 脂肪发育和分化相关基因的影响 | 第66-68页 |
| 第六章 结论 | 第68-70页 |
| 1 主要研究成果 | 第68页 |
| 2 主要创新点 | 第68-69页 |
| 3 研究的不足之处和下一步计划 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 附录1 载体pcDNA3.1-sLMNA序列 | 第81-86页 |
| 附录2 引物 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
