附录 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 构建去泛素化酶库和筛选寻找调控TNF诱导细胞信号通路的新基因 | 第14-29页 |
1.材料 | 第14-17页 |
1.1 细胞株、质粒及细胞培养等材料 | 第14页 |
1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
1.3 主要试剂配制 | 第15-17页 |
1.4 主要仪器设备 | 第17页 |
2.方法 | 第17-25页 |
2.1 去泛素化酶基因载体构建 | 第17-21页 |
2.2 去泛素化酶基因的鉴定 | 第21-23页 |
2.3 去泛素化酶基因慢病毒载体包装和感染 | 第23-24页 |
2.4 筛选调控TNF诱导的细胞坏死的去泛素化酶 | 第24页 |
2.5 统计学方法 | 第24-25页 |
3.结果 | 第25-29页 |
3.1 PCR鉴定去泛素化酶基因DNA | 第25页 |
3.2 去泛素化酶基因载体DNA酶切检测 | 第25-26页 |
3.3 利用绿色荧光蛋白表达载体检测实验转染效率 | 第26页 |
3.4 Western-blot检测蛋白表达情况 | 第26-27页 |
3.5 筛选调控TNF诱导细胞坏死信号通路的新基因 | 第27-29页 |
第二部分 USP13调控TNF诱导的细胞坏死机制的初步研究 | 第29-35页 |
1.材料 | 第29页 |
1.1 细胞株和质粒及细胞培养材料 | 第29页 |
1.2 试剂 | 第29页 |
2.方法 | 第29-30页 |
2.1 USP13-C345A突变和USP13结构域缺失的重组载体的构建 | 第29-30页 |
2.2 USP13及其突变缺失病毒载体对TNF诱导的细胞坏死作用 | 第30页 |
3.结果 | 第30-35页 |
3.1 USP13对TNF诱导的细胞坏死的作用 | 第30-31页 |
3.2 USP13-C345A突变对TNF诱导的细胞坏死的作用 | 第31-32页 |
3.3 USP13结构域缺失体对TNF诱导的细胞坏死的作用 | 第32-35页 |
讨论 | 第35-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
综述 | 第41-50页 |
参考文献 | 第49-50页 |