| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-13页 |
| 1 绪论 | 第13-20页 |
| ·研究背景 | 第13页 |
| ·立题依据 | 第13-17页 |
| ·绿僵菌在农业害虫上的作用 | 第13-14页 |
| ·绿僵菌的正常产孢 | 第14页 |
| ·绿僵菌的微循环产孢 | 第14-15页 |
| ·MaAGA、Pyk、PP5 基因相关进展 | 第15-16页 |
| ·RNAi 技术在基因功能研究中的应用 | 第16-17页 |
| ·研究目的 | 第17-18页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| ·本研究创新之处 | 第19-20页 |
| 2 MAAGA 调控绿僵菌的微循环产孢过程及耐热性 | 第20-39页 |
| ·材料与方法 | 第20-27页 |
| ·供试菌株和昆虫 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要培养基 | 第20页 |
| ·绿僵菌MaAGA 基因DNA 全长的获取 | 第20页 |
| ·绿僵菌MaAGA 基因cDNA 全长的获取 | 第20-21页 |
| ·生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·MaAGA 基因的干扰 | 第22-23页 |
| ·定量PCR 检测MaAGA 基因转录水平上干扰效率 | 第23-24页 |
| ·酶活分析MaAGA 基因翻译水平上的干扰效率 | 第24页 |
| ·干扰突变株性状分析 | 第24-25页 |
| ·孢子分离分子机制分析 | 第25-26页 |
| ·孢子耐热性分子机制分析 | 第26-27页 |
| ·结果和分析 | 第27-39页 |
| ·MaAGA 基因组DNA 的获得 | 第27-28页 |
| ·MaAGA 基因cDNA 序列的获得 | 第28-30页 |
| ·MaAGA 基因及蛋白结构分析 | 第30-31页 |
| ·MaAGA 干扰结果 | 第31-32页 |
| ·MaAGA 干扰效率的检测 | 第32-33页 |
| ·MaAGA 干扰突变株表型分析 | 第33-35页 |
| ·干扰突变株和野生株产孢量的分析 | 第35-37页 |
| ·MaAGA 调控了细胞分离基因M0b2 和海藻糖相关基因ntl 的表达 | 第37-39页 |
| 3 PYK 调控绿僵菌的微循环孢子形态 | 第39-46页 |
| ·材料与方法 | 第39-40页 |
| ·供试菌株 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第39页 |
| ·绿僵菌Pyk 基因的克隆 | 第39页 |
| ·Pyk 基因的干扰及其产孢模式分析 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR 测定转化菌株干扰效率 | 第40页 |
| ·转化菌株产孢模式分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·绿僵菌Pyk 基因cDNA 全长序列的克隆 | 第40-42页 |
| ·Pyk 蛋白进化关系分析 | 第42-43页 |
| ·Pyk 基因的干扰 | 第43-44页 |
| ·Pyk 基因被干扰后对微循环产孢模式的影响 | 第44-46页 |
| 4 PP5 基因的克隆及其在两种产孢模式中的表达特征分析 | 第46-54页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·供试菌株 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第46页 |
| ·绿僵菌PP5 基因的克隆 | 第46页 |
| ·PP5 编码蛋白的结构分析 | 第46-47页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测PP5 基因在两种产孢模式中的表达特征 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-54页 |
| ·绿僵菌PP5 基因DNA 和cDNA 全长序列的获取 | 第47页 |
| ·PP5 基因结构分析 | 第47-49页 |
| ·PP5 蛋白结构分析 | 第49-52页 |
| ·其他生物信息学分析 | 第52-53页 |
| ·PP5 基因在两种产孢模式中的表达特征分析 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-58页 |
| ·MAAGA 调控绿僵菌的微循环产孢过程及耐热性 | 第54-55页 |
| ·绿僵菌微循环产孢基因PYK 的克隆及RNA 干扰分析 | 第55-56页 |
| ·绿僵菌第五类SER/THR 蛋白磷酸酶基因的克隆及表达特征分析 | 第56-58页 |
| 6 结论与后续工作建议 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第65页 |
