| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 天然免疫概述 | 第14页 |
| 1.2 Viperin概述 | 第14-20页 |
| 1.2.1 Viperin的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 Viperin的功能 | 第16页 |
| 1.2.3 Viperin的亚细胞定位 | 第16-17页 |
| 1.2.4 与Viperin相互作用的因子 | 第17页 |
| 1.2.5 Viperin蛋白调控细胞代谢 | 第17-18页 |
| 1.2.6 TLR信号通路介导Viperin表达 | 第18-19页 |
| 1.2.7 RLR信号通路介导Viperin表达 | 第19-20页 |
| 1.2.8 病毒逃逸Viperin的机制 | 第20页 |
| 1.3 新城疫概述 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 鸭Viperin基因克隆及序列分析 | 第22-31页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 鸭 | 第22页 |
| 2.1.2 细胞 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂和器材 | 第22页 |
| 2.1.4 引物 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 鸭血液淋巴细胞分离 | 第23页 |
| 2.2.2 细胞RNA的提取和反转录 | 第23页 |
| 2.2.3 PCR扩增和序列测定 | 第23-24页 |
| 2.2.4 序列拼接和提交 | 第24页 |
| 2.2.5 Viperin序列的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.6 Viperin二级结构和空间结构预测 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-29页 |
| 2.3.1 鸭Viperin基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| 2.3.2 鸭Viperin生物信息学分析结果 | 第25-27页 |
| 2.3.3 鸭Viperin二级结构和空间结构预测 | 第27-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 鸭Viperin蛋白的多克隆抗体制备及其表达分析 | 第31-41页 |
| 3.1 材料 | 第31页 |
| 3.1.1 鸭胚和病毒 | 第31页 |
| 3.1.2 质粒和菌株 | 第31页 |
| 3.1.3 试剂和酶 | 第31页 |
| 3.1.4 动物 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 鸭Viperin基因扩增和酶切 | 第32页 |
| 3.2.2 连接、转化和鉴定 | 第32页 |
| 3.2.3 抗原的制备 | 第32页 |
| 3.2.4 动物免疫及血清检测 | 第32-33页 |
| 3.2.5 鸭胚原代细胞制备 | 第33页 |
| 3.2.6 细胞感染 | 第33页 |
| 3.2.7 动物实验 | 第33页 |
| 3.2.8 定量PCR及蛋白表达检测 | 第33-34页 |
| 3.3 结果 | 第34-39页 |
| 3.3.1 鸭Viperin原核表达重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| 3.3.2 鸭Viperin原核表达分析 | 第35页 |
| 3.3.3 Viperin多克隆抗体血清的检测 | 第35-36页 |
| 3.3.4 细胞水平的Viperin检测 | 第36-37页 |
| 3.3.5 鸭Viperin的脏器分布 | 第37页 |
| 3.3.6 NDV感染鸭后的Viperin表达检测 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 鸭Viperin抗新城疫病毒机制的初步研究 | 第41-49页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 鸭胚和病毒 | 第41页 |
| 4.1.2 质粒和菌株 | 第41页 |
| 4.1.3 试剂和酶 | 第41页 |
| 4.1.4 细胞 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 真核表达重组质粒的构建 | 第42页 |
| 4.2.2 RNAi载体的构建 | 第42-43页 |
| 4.2.3 细胞培养、转染及感染 | 第43页 |
| 4.2.4 重组蛋白表达检测 | 第43页 |
| 4.2.5 NDV病毒量检测 | 第43-44页 |
| 4.2.6 EID_(50)测定 | 第44页 |
| 4.3 结果 | 第44-47页 |
| 4.3.1 鸭Viperin全长和截短体重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| 4.3.2 鸭Viperin全长和截短体重组蛋白的鉴定 | 第45页 |
| 4.3.3 siRNA质粒抑制鸭Viperin的表达鉴定 | 第45-46页 |
| 4.3.4 鸭Viperin抗病毒作用 | 第46-47页 |
| 4.3.5 鸭Viperin抗病毒的关键区域 | 第47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
