| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 金黄色葡萄球菌概述 | 第12-13页 |
| 1.2 金黄色葡萄球菌疫苗的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 传统疫苗 | 第13-14页 |
| 1.2.2 基因工程疫苗 | 第14-16页 |
| 1.3 左旋咪唑佐剂研究概述 | 第16-19页 |
| 第二章 金黄色葡萄球菌凝集因子A(CIfA)的克隆与原核表达 | 第19-34页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 菌种与载体 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 CIfA基因的克隆 | 第20-22页 |
| 2.2.2 克隆载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.3 原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.4 重组质粒的诱导表达 | 第24-26页 |
| 2.2.5 重组蛋白的分析、鉴定与纯化 | 第26-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 CIfA基因的扩增结果 | 第28页 |
| 2.3.2 克隆载体的双酶切结果 | 第28-29页 |
| 2.3.3 重组表达载体鉴定 | 第29页 |
| 2.3.4 CIfA序列分析 | 第29-30页 |
| 2.3.5 重组载体诱导表达 | 第30-31页 |
| 2.3.6 重组蛋白表达形式分析结果 | 第31页 |
| 2.3.7 重组蛋白Western Blot鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.8 重组蛋白纯化结果 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 LMS作为免疫佐剂增强蛋白疫苗CIfA免疫应答的研究 | 第34-52页 |
| 3.1 材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 主要药品试剂及实验器材 | 第34-35页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 免疫原的制备 | 第36页 |
| 3.2.2 实验分组及免疫方法 | 第36-37页 |
| 3.2.3 间接ELISA法检测血清抗体水平 | 第37页 |
| 3.2.4 T淋巴细胞增殖实验 | 第37-38页 |
| 3.2.5 胞内流式分析法检测CD4+/CD8+T亚群细胞因子的表达 | 第38-39页 |
| 3.2.6 ELISA检测脾细胞培养上清细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17A | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-49页 |
| 3.3.1 血清IgG抗体及其亚型检测结果 | 第39-41页 |
| 3.3.2 T淋巴细胞增殖活性检测结果 | 第41-43页 |
| 3.3.3 胞内细胞因子表达量检测结果 | 第43-47页 |
| 3.3.4 脾细胞培养上清细胞因子检测结果 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
