中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第12-13页 |
第一部分SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养 | 第13-17页 |
1 实验材料 | 第13-14页 |
1.1 实验器材 | 第13页 |
1.2 实验试剂 | 第13页 |
1.3 实验动物 | 第13-14页 |
2 实验方法 | 第14-15页 |
2.1 SD大鼠BMSCs的获取及接种 | 第14-15页 |
2.2 BMSCs的传代 | 第15页 |
3 结果 | 第15-17页 |
第二部分SD大鼠BMSCs的诱导分化及表面分子鉴定 | 第17-24页 |
1 SD大鼠BMSCs的成脂肪诱导分化 | 第17-19页 |
1.1 主要实验仪器 | 第17页 |
1.2 主要实验试剂 | 第17页 |
1.3 实验方法 | 第17-18页 |
1.4 结果 | 第18-19页 |
2 SD大鼠BMSCs的成软骨诱导分化 | 第19-21页 |
2.1 主要实验仪器 | 第19页 |
2.2 主要实验试剂 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-20页 |
2.4 结果 | 第20-21页 |
3 SD大鼠BMSCs的表面分子鉴定 | 第21-24页 |
3.1 主要实验仪器 | 第21页 |
3.2 主要实验试剂 | 第21-22页 |
3.3 实验步骤 | 第22页 |
3.4 实验结果 | 第22-24页 |
第三部分SD大鼠BMSCs源性微囊泡的分离、提取及形态鉴定 | 第24-28页 |
1 实验材料 | 第24页 |
1.1 主要实验仪器及器材 | 第24页 |
1.2 主要实验试剂 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-26页 |
2.1 BMSCs的“饥饿”处理 | 第24页 |
2.2 超高速离心法分离BMSCs-MVs | 第24-25页 |
2.3 SD大鼠BMSCs-MVs的冻存与复苏 | 第25页 |
2.4 BCA法测定BMSCs-MVs蛋白浓度 | 第25-26页 |
2.5 BMSCs-MVs形态学观察鉴定 | 第26页 |
3 结果 | 第26-28页 |
3.1 BMSCs-MVs悬液蛋白浓度测定 | 第26页 |
3.2 形态学鉴定 | 第26-28页 |
第四部分SD大鼠膝关节表面软骨细胞的分离及培养 | 第28-32页 |
1 材料 | 第28-29页 |
1.1 主要实验仪器 | 第28页 |
1.2 主要实验试剂 | 第28页 |
1.3 实验动物 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-31页 |
2.1 实验前准备 | 第29页 |
2.2 操作步骤 | 第29-31页 |
3 结果 | 第31-32页 |
第五部分SD大鼠BMSCs-MVs对软骨细胞增殖活性的影响 | 第32-39页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 主要实验仪器 | 第32页 |
1.2 主要实验试剂 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-35页 |
2.1 EdU法检测与BMSCs-MVs共培养软骨细胞增殖活性 | 第33页 |
2.2 操作步骤 | 第33-34页 |
2.3 CCK-8 法检测与BMSCs-MVs共培养软骨细胞增殖活性 | 第34页 |
2.4 操作步骤 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-39页 |
3.1 EdU细胞增殖检测 | 第35-37页 |
3.2 CCK-8 细胞增殖检测 | 第37-39页 |
第六部分SD大鼠BMSCs-MVs对软骨细胞基质合成的影响 | 第39-47页 |
1 材料 | 第39页 |
1.1 主要实验仪器 | 第39页 |
1.2 主要实验试剂 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-42页 |
2.1 BMSCs-MVs与软骨细胞共培养 | 第40页 |
2.2 提取软骨细胞mRNA | 第40-41页 |
2.3 RNA逆转录为cDNA | 第41页 |
2.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第41-42页 |
3 RT-PCR检测基因表达结果 | 第42-47页 |
3.1 共培养软骨细胞蛋白聚糖(Acan)基因表达 | 第42-43页 |
3.2 共培养软骨细胞Ⅱ型胶原基因表达 | 第43-44页 |
3.3 共培养软骨细胞Ⅹ型胶原基因表达 | 第44-45页 |
3.4 共培养软骨细胞MMP-3 基因表达 | 第45-46页 |
3.5 共培养软骨细胞IL-1β基因表达 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
综述 | 第51-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |
在学期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简介 | 第59页 |