| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第9-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-30页 |
| 1.1 细菌检测方法研究的必要性 | 第11-12页 |
| 1.2 常用的细菌检测方法及其特点 | 第12-14页 |
| 1.2.1 基于微生物培养的细菌检测方法 | 第12-13页 |
| 1.2.2 基于PCR的细菌检测方法 | 第13页 |
| 1.2.3 基于抗体的细菌检测方法 | 第13-14页 |
| 1.3 功能核酸及其在生物传感器上的应用 | 第14-24页 |
| 1.3.1 核酸适配体 | 第14-16页 |
| 1.3.2 脱氧核酶 | 第16-17页 |
| 1.3.3 功能核酸作为生物传感器的优势 | 第17-18页 |
| 1.3.4 基于核酸适配体的生物传感器 | 第18-22页 |
| 1.3.5 基于脱氧核酶的生物传感器 | 第22-24页 |
| 1.4 可检测大肠杆菌的荧光标记DNA探针 | 第24-27页 |
| 1.5 本课题的研究内容与意义 | 第27-30页 |
| 第2章 利用RFD-EC1检测细菌的抑制 | 第30-45页 |
| 2.1 引言 | 第30-32页 |
| 2.2 实验部分 | 第32-36页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第32页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第32页 |
| 2.2.3 细菌的准备 | 第32页 |
| 2.2.4 RFD-EC1探针的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.5 荧光光谱实验 | 第33页 |
| 2.2.6 RFD-EC1对 大肠杆菌检测限的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.7 用RFD-EC1和光密度法（OD）测定大肠杆菌的生长曲线 | 第34页 |
| 2.2.8 用RFD-EC1测定氨苄青霉素对大肠杆菌生长的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.9 用RFD-EC1测定化合物破坏细胞膜的能力 | 第35页 |
| 2.2.10 用RFD-EC1监测大肠杆菌和枯草杆菌的生长竞争 | 第35页 |
| 2.2.11 缓冲溶液组成 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-43页 |
| 2.3.1 大肠杆菌响应荧光DNA酶（RFD-EC1）的特性 | 第36-37页 |
| 2.3.2 RFD-EC1用于检测氨苄青霉素对大肠杆菌的生长影响 | 第37-39页 |
| 2.3.3 RFD-EC1用于指示靶点为细胞膜的化合物 | 第39-41页 |
| 2.3.4 RFD-EC1用于监测大肠杆菌与枯草杆菌的生长竞争 | 第41-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 RFD-EC1靶点的寻找 | 第45-59页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 实验部分 | 第46-49页 |
| 3.2.1 实验所用试剂和细胞 | 第46-47页 |
| 3.2.2 用 0.1%SDS处理大肠杆菌CEM | 第47页 |
| 3.2.3 复制培养Keio Collection细胞库 | 第47-48页 |
| 3.2.4 Keio Collection细胞系的重培养 | 第48页 |
| 3.2.5 靶点筛选反应 | 第48-49页 |
| 3.2.6 反应缓冲溶液 | 第49页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第49-57页 |
| 3.3.1 RFD-EC1靶点本质为蛋白质 | 第49-50页 |
| 3.3.2 利用Keio Collection对靶点的筛选 | 第50-53页 |
| 3.3.3 剪切反应活性来源的确认 | 第53-57页 |
| 3.4 本章总结 | 第57-59页 |
| 第4章 RFD-EC1碱基序列优化及其结构鉴定 | 第59-73页 |
| 4.1 引言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验部分 | 第60-61页 |
| 4.2.1 实验试剂与仪器 | 第60页 |
| 4.2.2 重筛选过程 | 第60页 |
| 4.2.3 实验所用缓冲溶液配制 | 第60-61页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第61-72页 |
| 4.3.1 通过碱基敲除验证RFD-EC1中重要碱基 | 第61-66页 |
| 4.3.2 以重筛选为基础研究RFD-EC1的结构 | 第66-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第5章 RFD探针对金黄葡萄球菌的检测 | 第73-83页 |
| 5.1 引言 | 第73-74页 |
| 5.2 实验部分 | 第74-77页 |
| 5.2.1 试剂及材料 | 第74页 |
| 5.2.2 金黄葡萄球菌和其他细菌培养外液的提取 | 第74-75页 |
| 5.2.3 随机DNA分子库与荧光底物RS28的连接 | 第75页 |
| 5.2.4 针对金黄葡萄球菌RFD探针的筛选过程 | 第75-76页 |
| 5.2.5 RFD-SA探针的制备合成 | 第76页 |
| 5.2.6 利用dPAGE胶的方法检测金黄葡萄球菌 | 第76页 |
| 5.2.7 96孔板在酶标仪上进行金黄葡萄球菌的检测 | 第76-77页 |
| 5.2.8 缓冲溶液系统 | 第77页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第77-82页 |
| 5.3.1 筛选过程及其结果 | 第77页 |
| 5.3.2 RFD-SA的特异性验证 | 第77-78页 |
| 5.3.3 RFD-SA的二价离子选择优化 | 第78-80页 |
| 5.3.4 RFD-SA检测牛奶中的金黄葡萄球菌 | 第80-81页 |
| 5.3.5 RFD-SA在临床样本上的检测 | 第81-82页 |
| 5.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 第6章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第97页 |
