| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstracts | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第14-33页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 骨和软骨的结构 | 第15-17页 |
| 1.3 拓扑结构的制备方法 | 第17-25页 |
| 1.3.1 脱细胞外基质 | 第17页 |
| 1.3.2 传统无序表面拓扑结构的制备 | 第17-19页 |
| 1.3.4 相分离技术 | 第19-20页 |
| 1.3.5 阳极氧化技术 | 第20页 |
| 1.3.6 光刻技术 | 第20-22页 |
| 1.3.7 软光刻 | 第22-25页 |
| 1.4 拓扑结构对细胞迁移的影响 | 第25-26页 |
| 1.5 拓扑结构对成骨分化的影响 | 第26-29页 |
| 1.5.1 纳米级拓扑结构对细胞成骨分化的影响 | 第27-28页 |
| 1.5.2 微米级拓扑结构对细胞成骨分化的影响 | 第28-29页 |
| 1.6 拓扑结构对成软骨分化的影响 | 第29-30页 |
| 1.7 本文的研究目的、意义及技术路线 | 第30-33页 |
| 第二章 生物材料表面微米拓扑结构的构建 | 第33-53页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 材料与方法 | 第33-41页 |
| 2.2.1 实验试剂与仪器 | 第33-36页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第36-40页 |
| 2.2.3 测试与表征 | 第40-41页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第41-52页 |
| 2.3.1 光刻工艺的优化 | 第41-45页 |
| 2.3.2 热塑性高分子材料表面拓扑结构的构建 | 第45-47页 |
| 2.3.3 壳聚糖材料表面拓扑结构的构建 | 第47-48页 |
| 2.3.4 生物玻璃表面拓扑结构的构建 | 第48-49页 |
| 2.3.5 BG/PCL复合图案化材料 | 第49-52页 |
| 2.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 第三章 细胞在沟槽结构上架桥现象的研究 | 第53-81页 |
| 3.1 引言 | 第53-54页 |
| 3.2 材料与方法 | 第54-59页 |
| 3.2.1 实验试剂与仪器 | 第54-56页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第56页 |
| 3.2.3 材料的灭菌 | 第56-57页 |
| 3.2.4 激光共聚焦对细胞的形态观察 | 第57页 |
| 3.2.5 扫描电子显微镜对细胞的形态观察 | 第57页 |
| 3.2.6 3D数字显微镜对细胞的形态观察 | 第57页 |
| 3.2.7 细胞弹性模量的测试 | 第57页 |
| 3.2.8 骨钙蛋白和结蛋白的免疫荧光染色 | 第57-58页 |
| 3.2.9 细胞松弛素D和诺考达唑作用对细胞架桥的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.10 数据统计分析与处理 | 第59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-80页 |
| 3.3.1 所用的沟槽结构 | 第59-60页 |
| 3.3.2 hMSCs在沟槽结构表面的架桥行为 | 第60-62页 |
| 3.3.3 hMSCs在沟槽表面架桥的条件 | 第62-65页 |
| 3.3.4 hMSCs实现架桥的方式 | 第65-66页 |
| 3.3.5 细胞骨架对“架桥”稳定性的影响 | 第66页 |
| 3.3.6 hMSCs架桥后其细胞骨架和细胞核的变化 | 第66-68页 |
| 3.3.7 hMSCs架桥后其细胞弹性模量的变化 | 第68-69页 |
| 3.3.8 hMSCs架桥后其蛋白的表达变化 | 第69-73页 |
| 3.3.9 其他类型细胞的架桥行为 | 第73-80页 |
| 3.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第四章 沟槽拓扑结构引导细胞定向生长 | 第81-104页 |
| 4.1 引言 | 第81页 |
| 4.2 材料与方法 | 第81-84页 |
| 4.2.1 实验试剂与仪器 | 第81-82页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第82页 |
| 4.2.3 材料的灭菌 | 第82-83页 |
| 4.2.4 细胞体外的划痕实验 | 第83页 |
| 4.2.5 激光共聚焦显微镜对细胞形态的观察 | 第83页 |
| 4.2.6 扫描电子显微镜对细胞形态的观察 | 第83页 |
| 4.2.7 细胞增殖实验 | 第83-84页 |
| 4.2.8 数据统计分析与处理 | 第84页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第84-103页 |
| 4.3.1 沟槽结构对垂直沟槽方向细胞生长的影响 | 第84-87页 |
| 4.3.2 沟槽结构对细胞平行沟槽方向生长的影响 | 第87-92页 |
| 4.3.3 沟槽促进细胞平行于沟槽生长的机理 | 第92-97页 |
| 4.3.4 沟槽结构对不同细胞平行于沟槽生长的影响 | 第97-103页 |
| 4.4 本章小结 | 第103-104页 |
| 第五章 材料表面拓扑结构对细胞分化的影响 | 第104-125页 |
| 5.1 引言 | 第104页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第104-112页 |
| 5.2.1 实验试剂与仪器 | 第104-107页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第107页 |
| 5.2.3 hMSCs在D25W200 PCL沟槽表面和BG/PCL表面成骨分化的诱导 | 第107页 |
| 5.2.4 ATDC5在凹坑结构表面成软骨分化的诱导 | 第107-108页 |
| 5.2.5 材料的灭菌 | 第108页 |
| 5.2.6 激光共聚焦对细胞形态和分布的观察 | 第108页 |
| 5.2.7 碱性磷酸酶（ALP）染色及定量 | 第108页 |
| 5.2.8 茜素红染色及定量 | 第108-109页 |
| 5.2.9Ⅰ型胶原的免疫荧光染色 | 第109页 |
| 5.2.10 阿尔新蓝染色 | 第109页 |
| 5.2.11 番红O染色 | 第109-110页 |
| 5.2.12 mRNA转录水平的实时定量分析 | 第110-112页 |
| 5.2.13 数据统计分析与处理 | 第112页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第112-124页 |
| 5.3.1 PCL表面D25W200对hMSCs成骨分化的影响 | 第112-116页 |
| 5.3.2 BG/PCL化学图案化对hMSCs成骨分化的影响 | 第116-121页 |
| 5.3.3 PMMA表面凹坑结构对ATDC5成软骨分化的影响 | 第121-124页 |
| 5.4 本章小结 | 第124-125页 |
| 结论 | 第125-128页 |
| 本论文的创新性 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-143页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第143-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 附件 | 第146页 |
