摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 新城疫病毒的研究进展 | 第12-18页 |
1.1.1 新城疫的发现及命名 | 第12页 |
1.1.2 NDV及其分类 | 第12-14页 |
1.1.3 NDV的流行 | 第14页 |
1.1.4 NDV的感染和复制 | 第14-15页 |
1.1.5 NDV基因组及其编码的蛋白 | 第15-18页 |
1.2 NDV V蛋白拮抗干扰素的研究进展 | 第18-24页 |
1.2.1 干扰素和干扰素受体 | 第18-19页 |
1.2.2 干扰素信号通路 | 第19-20页 |
1.2.3 副黏病毒V蛋白拮抗干扰素 | 第20-24页 |
第二章 NDV V蛋白对Ⅰ型IFN信号通路相关因子的影响 | 第24-36页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞、质粒和病毒 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂与主要仪器 | 第24页 |
2.1.3 溶液配制 | 第24-25页 |
2.1.4 引物设计 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-30页 |
2.2.1 不同NDV毒株V蛋白转染细胞对ISRE启动子活性的影响 | 第26-28页 |
2.2.2 病毒感染细胞后Ⅰ型IFN信号通路相关因子的mRNA表达水平 | 第28-29页 |
2.2.3 转染V蛋白后Ⅰ型IFN信号通路相关因子的mRNA表达水平 | 第29-30页 |
2.3 结果 | 第30-33页 |
2.3.1 双荧光素酶报告基因检测V蛋白拮抗Ⅰ型干扰素 | 第30页 |
2.3.2 NDV V蛋白对Ⅰ型IFN信号通路中相关因子mRNA表达水平的影响 | 第30-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三章 NDV Yulin株基因组全长cDNA克隆的构建 | 第36-48页 |
3.1 材料 | 第36-39页 |
3.1.1 SPF鸡胚 | 第36页 |
3.1.2 菌株及载体 | 第36页 |
3.1.3 主要试剂和仪器 | 第36-37页 |
3.1.4 常用试剂的配制 | 第37页 |
3.1.5 构建全长的策略 | 第37页 |
3.1.6 引物设计 | 第37-39页 |
3.2 方法 | 第39-41页 |
3.2.1 病毒的RNA提取 | 第39页 |
3.2.2 RT-PCR反应 | 第39-40页 |
3.2.3 胶回收 | 第40页 |
3.2.4 连接 | 第40页 |
3.2.5 转化 | 第40-41页 |
3.2.6 菌液PCR | 第41页 |
3.2.7 双酶切、连接和转化 | 第41页 |
3.3 结果 | 第41-45页 |
3.3.1 RNA提取结果 | 第41-42页 |
3.3.2 目的片段的扩增 | 第42页 |
3.3.3 构建各片段pMD-19T质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
3.3.4 构建各片段pBR322/Dr质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
3.3.5 质粒PCR鉴定Yulin株的8个片段 | 第44-45页 |
3.3.6 测序分析 | 第45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
3.5 小结 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |