| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一章 布鲁氏菌与先天免疫研究现状 | 第12-21页 |
| 1.1 布鲁氏菌概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 布鲁氏菌的种类和生物学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 布鲁氏菌的传播途径和致病性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 布鲁氏菌的免疫逃逸特性 | 第13页 |
| 1.1.4 布鲁氏菌的毒力因子与外膜蛋白 | 第13-15页 |
| 1.2 先天免疫概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 Toll样受体 | 第15-16页 |
| 1.2.2 NF-κB信号转导途径 | 第16页 |
| 1.2.3 巨噬细胞概述 | 第16-17页 |
| 1.2.4 IL-12的功能 | 第17页 |
| 1.3 布鲁氏菌与先天免疫 | 第17-21页 |
| 1.3.1 先天免疫对抗布鲁氏菌 | 第18页 |
| 1.3.2 布鲁氏菌感染中的TLRs作用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 布鲁氏菌感染抑制巨噬细胞分泌TNF-α | 第19页 |
| 1.3.4 布鲁氏菌外膜蛋白Omp25对TNF-α 的抑制作用 | 第19-21页 |
| 第二章 腺病毒载体系统 | 第21-22页 |
| 2.1 腺病毒概述 | 第21页 |
| 2.2 腺病毒为载体的优点 | 第21页 |
| 2.3 腺病毒为载体的缺点 | 第21页 |
| 2.4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 实验研究 | 第22-53页 |
| 第三章 布鲁氏菌外膜蛋白Omp25重组腺病毒的制备 | 第22-37页 |
| 3.1 材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 菌株、细胞和质粒 | 第22页 |
| 3.1.2 工具酶及主要试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 主要的仪器设备及耗材 | 第23页 |
| 3.1.4 培养基和相关试剂的配制 | 第23页 |
| 3.2 方法 | 第23-32页 |
| 3.2.1 重组穿梭载体p Shuttle-CMV-Omp25的构建 | 第23-27页 |
| 3.2.2 重组腺病毒载体p Ad-Omp25和p Ad-Blank的构建 | 第27-30页 |
| 3.2.3 重组腺病毒的包装 | 第30-32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.3.1 omp25基因扩增产物鉴定 | 第32页 |
| 3.3.2 pShuttle-CMV-Omp25重组穿梭载体的构建和鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3.3 基因序列分析 | 第33页 |
| 3.3.4 重组腺病毒载体p Ad-Omp25和p Ad-Blank的构建和鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.5 重组腺病毒r Ad-Omp25和r Ad-Blank的构建、扩增和鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.6 重组腺病毒r Ad-Omp25和r Ad-Blank滴度的测定 | 第35页 |
| 3.3.7 重组腺病毒中Omp25的表达 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 第四章 布鲁氏菌Omp25对巨噬细胞分泌IL-12的影响及其机制的研究 | 第37-53页 |
| 4.1 材料 | 第37-38页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第37页 |
| 4.1.2 试验仪器及耗材 | 第37-38页 |
| 4.1.3 主要试剂的配置 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38-45页 |
| 4.2.1 检测Omp25对LPS/R848诱导的单核巨噬细胞分泌IL-12p70的影响 | 第38-40页 |
| 4.2.2 Omp25对LPS/R848诱导的THP-1 产生IL-12p35和p40 m RNA的影响 | 第40-42页 |
| 4.2.3 Omp25对LPS/R848诱导的THP-1 中p-IκB和IκB变化的影响 | 第42-43页 |
| 4.2.4 Real Time PCR检测Omp25对THP-1 中相关micro RNA的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.5 统计学分析 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-51页 |
| 4.3.1 Omp25在THP-1 中的表达 | 第45页 |
| 4.3.2 Omp25对LPS/R848诱导IL-12p70产生的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.3 Omp25对LPS/R848诱导IL-12A(p35)和IL-12B(p40)基因转录产物的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.4 Omp25对LPS/R848诱导的THP-1 细胞中IκB的磷酸化的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.5 Omp25对THP-1 细胞中相关micro RNA的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.6 Omp25对 3D4/21细胞中相关micro RNA的影响 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51页 |
| 4.5 小结 | 第51-53页 |
| 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 英文缩略词及中英文对照表 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者介绍 | 第60页 |
