摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第9-18页 |
1.1 骨骼肌的发育和成肌分化 | 第9-10页 |
1.2 miRNA与成肌分化 | 第10-15页 |
1.2.1 肌肉特异表达的miRNA(myo-miRNA)与非myo-miRNA | 第10-11页 |
1.2.2 myo-miR与成肌分化的研究进展 | 第11-14页 |
1.2.3 几个重要的非myo-miR与成肌分化 | 第14-15页 |
1.3 miR-34 的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 研究内容和意义 | 第16-18页 |
第2章 材料方法 | 第18-32页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 实验模型及耗材 | 第18-19页 |
2.1.2 主要试剂及数据处理软件 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-32页 |
2.2.1 小鼠成肌分化模型的建立及细胞培养 | 第20-21页 |
2.2.2 小鼠肌肉再生模型的建立 | 第21页 |
2.2.3 荧光定量PCR | 第21-24页 |
2.2.4 Myog启动子荧光素酶报告载体构建 | 第24页 |
2.2.5 miRNA靶基因的生物学预测 | 第24页 |
2.2.6 3′UTR载体的构建 | 第24-25页 |
2.2.7 3′UTR突变载体的构建 | 第25-26页 |
2.2.8 慢病毒载体构建 | 第26页 |
2.2.9 慢病毒包装与感染 | 第26-27页 |
2.2.10 瞬时转染 | 第27-28页 |
2.2.11 荧光素酶活性测定及分析 | 第28页 |
2.2.12 细胞增殖实验 | 第28-29页 |
2.2.13 Western blot | 第29-30页 |
2.2.14 iTRAQ | 第30页 |
2.2.15 细胞免疫荧光染色 | 第30-31页 |
2.2.16 数据处理 | 第31-32页 |
第3章 结果分析 | 第32-47页 |
3.1 miR-34b在成肌分化过程中表达上调 | 第32-33页 |
3.2 miR-34b抑制成肌细胞增殖,促进成肌细胞分化 | 第33-34页 |
3.3 miR-34b调控成肌分化的蛋白质组学分析 | 第34-39页 |
3.4 Ncl是miR-34b的靶基因 | 第39-41页 |
3.5 NUCL以剂量依赖性的方式调节成肌分化 | 第41-46页 |
3.5.1 在成肌分化过程中,NUCL亚细胞内的含量受到调控 | 第41-42页 |
3.5.2 NUCL的不同表达水平,呈现不同生物学功能 | 第42-46页 |
3.6 miR-34b的表达受甲基化调控 | 第46-47页 |
第4章 讨论 | 第47-51页 |
4.1 成肌分化过程中,miR-34b参与调控的信号通路及靶基因 | 第47-48页 |
4.2 NUCL以剂量依赖性的方式调控成肌分化 | 第48-49页 |
4.3 miR-34b与成肌分化 | 第49-51页 |
第5章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录 | 第61-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第65页 |