中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-28页 |
1.1 赤霉素的研究现状 | 第12-24页 |
1.1.1 赤霉素在植物体内的合成 | 第12-13页 |
1.1.2 赤霉素的信号转导途径 | 第13-18页 |
1.1.3 赤霉素对植物生殖生长的影响 | 第18-21页 |
1.1.4 赤霉素与其它激素的协同或拮抗作用 | 第21-24页 |
1.2 蛋白磷酸酶 | 第24-26页 |
1.3 研究目的与意义 | 第26-28页 |
第二章 实验材料与方法 | 第28-38页 |
2.1 实验材料 | 第28-31页 |
2.1.1 材料类型 | 第28-31页 |
2.1.2 培养条件 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-38页 |
2.2.1 酵母双杂交 | 第31-33页 |
2.2.2 抗体制备 | 第33-34页 |
2.2.3 Pull-down | 第34页 |
2.2.4 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
2.2.5 免疫印迹 | 第35页 |
2.2.6 蛋白去磷酸化实验 | 第35页 |
2.2.7 植株总RNA的提取 | 第35页 |
2.2.8 反转录 | 第35页 |
2.2.9 荧光定量PCR | 第35页 |
2.2.10 点突变 | 第35-36页 |
2.2.11 花序浸泡法转化植株 | 第36页 |
2.2.12 植株表型鉴定 | 第36页 |
2.2.13 生理实验GA_3和PAC处理 | 第36-37页 |
2.2.14 RGA蛋白的稳定性 | 第37-38页 |
第三章 实验结果 | 第38-87页 |
3.1 突变体topp4-1表现出GA缺失的表型 | 第38页 |
3.2 实验酵母双杂交证明TOPP4能够与DELLA蛋白相互作用 | 第38-40页 |
3.3 Pull-down证明TOPP4能够与DELLA蛋白相互作用 | 第40-41页 |
3.4 免疫共沉淀(Co-IP)证明TOPP4能够与DELLA蛋白相互作用 | 第41-44页 |
3.5 TOPP4蛋白能够将DELLA蛋白去磷酸化 | 第44-45页 |
3.6 TOPP4介导了DELLA蛋白RGA、GAI的降解 | 第45-46页 |
3.7 TOPP4与DELLA蛋白的C末端相互作用 | 第46-47页 |
3.8 TOPP4过表达转基因植株35S: TOPP4在植株高度、叶面积、花序等方面表现出变高、变大的表型 | 第47-51页 |
3.9 DELLA蛋白保守丝氨酸/苏氨酸位点单点突变对蛋白功能的影响 | 第51-55页 |
3.10 6个保守丝氨酸/苏氨酸多点突变模拟持续磷酸化和持续去磷酸化RGA对蛋白功能和稳定性的影响 | 第55-83页 |
3.10.1 过表达模拟持续去磷酸化RGA的转基因植株表现出DELLA蛋白缺失和GA过量的表型 | 第55-66页 |
3.10.2 过表达模拟持续磷酸化RGA的转基因植株表现出RGA不降解和GA缺失的表型 | 第66-71页 |
3.10.3 模拟去磷酸化/磷酸化的RGA改变了自身的生物学功能 | 第71-74页 |
3.10.4 不同磷酸化修饰的RGA影响了转基因植株对GA和PAC的敏感性 | 第74-76页 |
3.10.5 磷酸化修饰影响了RGA蛋白的稳定性 | 第76-78页 |
3.10.6 磷酸化修饰不影响RGA蛋白与TOPP4、SLY1的相互作用 | 第78-79页 |
3.10.7 磷酸化修饰并不影响RGA蛋白的亚细胞定位 | 第79-80页 |
3.10.8 35S:RGA6A部分恢复gal-3和gal-13 GA缺失的表型 | 第80-82页 |
3.10.9 过表达RGA6A转基因植株的表型不是由于DELLA基因被干扰引起的 | 第82页 |
3.10.10 过表达RGA6D的表型不是由于与RGA竞争结合SLY1引起的 | 第82-83页 |
3.11 6个保守丝氨酸/苏氨酸多点突变模拟持续磷酸化和去磷酸化GAI对蛋白功能的影响 | 第83-84页 |
3.12 DELLA蛋白磷酸化氨基酸位点的质谱鉴定 | 第84-87页 |
第四章 讨论 | 第87-97页 |
4.1 TOPP4能够与DELLA蛋白GRAS结构域相互作用 | 第88-89页 |
4.2 TOPP4能够将DELLA去磷酸化 | 第89页 |
4.3 TOPP4影响植株DELLA蛋白的含量 | 第89-90页 |
4.4 TOPP4过表达使植株变高、变大 | 第90-91页 |
4.5 DELLA蛋白单点突变对植株表型的影响 | 第91-92页 |
4.6 模拟持续去磷酸化RGA能够增强GA信号 | 第92-93页 |
4.7 模拟持续磷酸化的RGA蛋白更稳定并抑制GA信号 | 第93-95页 |
4.8 结论与展望 | 第95-97页 |
4.8.1 结论 | 第95页 |
4.8.2 展望 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-106页 |
在学期间的研究成果 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |