| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 体细胞克隆猪的国内外研究进展及存在的问题 | 第11-12页 |
| 2 大动物基因打靶的研究进展 | 第12-15页 |
| 3 MSTN 基因敲除猪和GGTA1 基因敲除猪的研究进展 | 第15-17页 |
| ·MSTN 基因敲除猪的研究进展 | 第15-16页 |
| ·GGTA1 基因敲除猪的研究进展 | 第16-17页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二部分 试验部分 | 第19页 |
| 试验一 MSTN 基因敲除猪的生产 | 第19-30页 |
| 前言 | 第19页 |
| 1 试验材料 | 第19-22页 |
| ·生物材料 | 第19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| ·主要实验耗材 | 第20页 |
| ·主要试剂配制 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-24页 |
| ·供体细胞的准备 | 第22页 |
| ·卵母细胞的收集和体外成熟 | 第22页 |
| ·体细胞核移植 | 第22页 |
| ·重构卵融合与激活 | 第22-23页 |
| ·克隆胚胎培养 | 第23页 |
| ·克隆胚胎的移植与妊娠检测 | 第23-24页 |
| ·基因敲除猪分子生物学鉴定 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-30页 |
| ·MSTN＋/－克隆胚胎的体外发育 | 第24-25页 |
| ·MSTN＋/－克隆胚胎的体内发育和转基因克隆猪的效率 | 第25-26页 |
| ·不同阶段期的胚胎对胚胎移植效率的影响 | 第26-27页 |
| ·移植季节对克隆仔猪出生成活率的影响 | 第27页 |
| ·再克隆 | 第27-28页 |
| ·克隆仔猪分子生物学鉴定 | 第28-30页 |
| 试验二 GGTA1 基因敲除猪的生产 | 第30-38页 |
| 前言 | 第30页 |
| 1 试验材料 | 第30-31页 |
| ·生物材料 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要实验耗材 | 第31页 |
| ·主要试剂配制 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| ·供体细胞的准备 | 第31页 |
| ·卵母细胞的收集和体外成熟 | 第31页 |
| ·体细胞核移植 | 第31页 |
| ·重构卵融合与激活 | 第31页 |
| ·激活后处理和胚胎培养 | 第31页 |
| ·不同浓度 Scriptaid 和不同时间处理下克隆胚胎的发育能力 | 第31-32页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第32页 |
| ·克隆胚胎的移植与妊娠检测 | 第32页 |
| ·数据处理 | 第32页 |
| ·基因敲除猪分子生物学鉴定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-38页 |
| ·克隆胚胎的体外发育 | 第33页 |
| ·克隆胚胎的体内发育及其体细胞克隆猪的效率 | 第33-35页 |
| ·不同阶段期的胚胎对胚胎移植效率的影响 | 第35-36页 |
| ·移植季节对克隆仔猪出生成活率的影响 | 第36页 |
| ·克隆仔猪分子生物学鉴定 | 第36-38页 |
| 第三部分 讨论 | 第38-42页 |
| ·克隆胚胎体内发育和体细胞克隆效率 | 第38页 |
| ·阳性克隆细胞的获得 | 第38-39页 |
| ·再克隆 | 第39页 |
| ·不同阶段期的胚胎对胚胎移植效率的影响 | 第39-40页 |
| ·移植季节对克隆仔猪出生成活率的影响 | 第40-41页 |
| ·表观遗传对克隆效率的影响 | 第41-42页 |
| 第四部分 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50-52页 |
