中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 甲基乙二醛的生物学作用 | 第12-13页 |
1.2 甲基乙二醛代谢途径 | 第13-15页 |
1.2.1 甲基乙二醛的合成途径 | 第13-14页 |
1.2.2 甲基乙二醛的清除途径 | 第14-15页 |
1.3 乙二醛酶研究进展 | 第15-21页 |
1.3.1 乙二醛酶结构与化学功能 | 第15-18页 |
1.3.1.1 乙二醛酶Ⅰ(GLYI) | 第15-16页 |
1.3.1.2 乙二醛酶Ⅱ(GLYII) | 第16-17页 |
1.3.1.3 乙二醛酶Ⅲ(GLYIII) | 第17-18页 |
1.3.2 乙二醛酶的生物学功能 | 第18-21页 |
1.3.2.1 乙二醛酶与生长发育 | 第18页 |
1.3.2.2 乙二醛酶与胁迫抗性 | 第18-21页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
2 实验材料与方法 | 第22-37页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第22页 |
2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第23页 |
2.1.5 工具软件与数据库 | 第23页 |
2.1.6 引物 | 第23-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-37页 |
2.2.1 植物材料的培养 | 第25页 |
2.2.1.1 玉米幼苗的培养 | 第25页 |
2.2.1.2 拟南芥的培养 | 第25页 |
2.2.2 植物微量RNA的提取(Trizol法) | 第25-26页 |
2.2.3 RNA的甲醛变性琼脂糖胶电泳 | 第26-27页 |
2.2.4 cDNA的合成 | 第27页 |
2.2.5 荧光定量PCR | 第27-28页 |
2.2.6 目的片段的PCR扩增 | 第28页 |
2.2.7 PCR扩增产物的切胶回收(试剂盒) | 第28-29页 |
2.2.8 目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
2.2.9 大肠杆菌感受态的制备 | 第29-30页 |
2.2.10 大肠杆菌感受态的转化 | 第30页 |
2.2.11 大肠杆菌质粒DNA的提取(OMEGA试剂盒) | 第30-31页 |
2.2.12 重组pBI121载体的构建 | 第31-32页 |
2.2.13 农杆菌感受态的制备 | 第32页 |
2.2.14 农杆菌感受态的转化(冻融法) | 第32-33页 |
2.2.15 农杆菌介导拟南芥的转化(花序侵染法) | 第33页 |
2.2.16 CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第33-34页 |
2.2.17 转基因拟南芥的鉴定 | 第34页 |
2.2.18 H_2O_2和O~(2-)的染色观察 | 第34页 |
2.2.19 抗氧化酶活性测定 | 第34-35页 |
2.2.20 农杆菌介导的烟草表皮的蛋白亚细胞定位 | 第35-36页 |
2.2.21 大肠杆菌中蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-67页 |
3.1 玉米乙二醛酶系统的基因组学分析 | 第37-52页 |
3.1.1 玉米乙二醛酶基因的筛选鉴定 | 第37-38页 |
3.1.2 玉米乙二醛酶基因理化性质分析 | 第38-40页 |
3.1.3 玉米乙二醛酶基因的进化分析 | 第40-42页 |
3.1.4 玉米乙二醛酶基因的结构分析 | 第42-44页 |
3.1.5 玉米乙二醛酶的蛋白结构域分析 | 第44-46页 |
3.1.6 玉米乙二醛酶基因的染色体分布 | 第46-47页 |
3.1.7 玉米乙二醛酶基因的表达特性分析 | 第47-52页 |
3.2 玉米ZmGLYI-8cDNA序列的分离及功能鉴定 | 第52-67页 |
3.2.1 玉米ZmGLYI-8 cDNA序列的分离 | 第52-54页 |
3.2.2 玉米ZmGLYI-8 蛋白的序列相似性及进化分析 | 第54-55页 |
3.2.3 玉米ZmGLYI-8 蛋白的亚细胞定位分析 | 第55-56页 |
3.2.4 玉米ZmGLYI-8 基因的表达特性分析 | 第56-58页 |
3.2.4.1 ZmGLYI-8 基因在玉米不同组织部位的表达特性 | 第56页 |
3.2.4.2 ZmGLYI-8 响应非生物胁迫的表达特性分析 | 第56-58页 |
3.2.5 玉米ZmGLYI-8 基因的原核表达和酶活鉴定 | 第58-60页 |
3.2.6 过表达ZmGLYI-8 基因拟南芥的获得 | 第60-61页 |
3.2.7 玉米ZmGLYI-8 基因在拟南芥中的的功能鉴定 | 第61-67页 |
3.2.7.1 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥的MG抗性的影响 | 第61-62页 |
3.2.7.2 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥干旱胁迫抗性的影响 | 第62-64页 |
3.2.7.3 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥盐胁迫抗性的影响 | 第64-67页 |
4 讨论 | 第67-72页 |
4.1 玉米乙二醛酶基因家族的进化多样性 | 第67-68页 |
4.2 玉米乙二醛酶系统的表达调控特性 | 第68-69页 |
4.3 玉米乙二醛酶系统的生物学功能 | 第69-70页 |
4.4 MG的“活性碳”信号分子作用 | 第70-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
致谢 | 第83页 |