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玉米乙二醛酶系统的基因组学分析及ZmGLYI-8基因的功能鉴定

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-22页
    1.1 甲基乙二醛的生物学作用第12-13页
    1.2 甲基乙二醛代谢途径第13-15页
        1.2.1 甲基乙二醛的合成途径第13-14页
        1.2.2 甲基乙二醛的清除途径第14-15页
    1.3 乙二醛酶研究进展第15-21页
        1.3.1 乙二醛酶结构与化学功能第15-18页
            1.3.1.1 乙二醛酶Ⅰ(GLYI)第15-16页
            1.3.1.2 乙二醛酶Ⅱ(GLYII)第16-17页
            1.3.1.3 乙二醛酶Ⅲ(GLYIII)第17-18页
        1.3.2 乙二醛酶的生物学功能第18-21页
            1.3.2.1 乙二醛酶与生长发育第18页
            1.3.2.2 乙二醛酶与胁迫抗性第18-21页
    1.4 本研究的目的及意义第21-22页
2 实验材料与方法第22-37页
    2.1 实验材料第22-25页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株与质粒第22页
        2.1.3 酶与各种生化试剂第22-23页
        2.1.4 主要实验仪器第23页
        2.1.5 工具软件与数据库第23页
        2.1.6 引物第23-25页
    2.2 实验方法第25-37页
        2.2.1 植物材料的培养第25页
            2.2.1.1 玉米幼苗的培养第25页
            2.2.1.2 拟南芥的培养第25页
        2.2.2 植物微量RNA的提取(Trizol法)第25-26页
        2.2.3 RNA的甲醛变性琼脂糖胶电泳第26-27页
        2.2.4 cDNA的合成第27页
        2.2.5 荧光定量PCR第27-28页
        2.2.6 目的片段的PCR扩增第28页
        2.2.7 PCR扩增产物的切胶回收(试剂盒)第28-29页
        2.2.8 目的片段与克隆载体的连接第29页
        2.2.9 大肠杆菌感受态的制备第29-30页
        2.2.10 大肠杆菌感受态的转化第30页
        2.2.11 大肠杆菌质粒DNA的提取(OMEGA试剂盒)第30-31页
        2.2.12 重组pBI121载体的构建第31-32页
        2.2.13 农杆菌感受态的制备第32页
        2.2.14 农杆菌感受态的转化(冻融法)第32-33页
        2.2.15 农杆菌介导拟南芥的转化(花序侵染法)第33页
        2.2.16 CTAB法提取拟南芥基因组DNA第33-34页
        2.2.17 转基因拟南芥的鉴定第34页
        2.2.18 H_2O_2和O~(2-)的染色观察第34页
        2.2.19 抗氧化酶活性测定第34-35页
        2.2.20 农杆菌介导的烟草表皮的蛋白亚细胞定位第35-36页
        2.2.21 大肠杆菌中蛋白的诱导表达第36-37页
3 结果与分析第37-67页
    3.1 玉米乙二醛酶系统的基因组学分析第37-52页
        3.1.1 玉米乙二醛酶基因的筛选鉴定第37-38页
        3.1.2 玉米乙二醛酶基因理化性质分析第38-40页
        3.1.3 玉米乙二醛酶基因的进化分析第40-42页
        3.1.4 玉米乙二醛酶基因的结构分析第42-44页
        3.1.5 玉米乙二醛酶的蛋白结构域分析第44-46页
        3.1.6 玉米乙二醛酶基因的染色体分布第46-47页
        3.1.7 玉米乙二醛酶基因的表达特性分析第47-52页
    3.2 玉米ZmGLYI-8cDNA序列的分离及功能鉴定第52-67页
        3.2.1 玉米ZmGLYI-8 cDNA序列的分离第52-54页
        3.2.2 玉米ZmGLYI-8 蛋白的序列相似性及进化分析第54-55页
        3.2.3 玉米ZmGLYI-8 蛋白的亚细胞定位分析第55-56页
        3.2.4 玉米ZmGLYI-8 基因的表达特性分析第56-58页
            3.2.4.1 ZmGLYI-8 基因在玉米不同组织部位的表达特性第56页
            3.2.4.2 ZmGLYI-8 响应非生物胁迫的表达特性分析第56-58页
        3.2.5 玉米ZmGLYI-8 基因的原核表达和酶活鉴定第58-60页
        3.2.6 过表达ZmGLYI-8 基因拟南芥的获得第60-61页
        3.2.7 玉米ZmGLYI-8 基因在拟南芥中的的功能鉴定第61-67页
            3.2.7.1 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥的MG抗性的影响第61-62页
            3.2.7.2 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥干旱胁迫抗性的影响第62-64页
            3.2.7.3 过表达ZmGLYI-8 基因对拟南芥盐胁迫抗性的影响第64-67页
4 讨论第67-72页
    4.1 玉米乙二醛酶基因家族的进化多样性第67-68页
    4.2 玉米乙二醛酶系统的表达调控特性第68-69页
    4.3 玉米乙二醛酶系统的生物学功能第69-70页
    4.4 MG的“活性碳”信号分子作用第70-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-83页
致谢第83页

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