| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 跨膜蛋白简介 | 第15页 |
| 1.2 PSGL-1简介 | 第15-16页 |
| 1.3 跨膜蛋白相互作用模型 | 第16-19页 |
| 1.3.1 Glycophorin A(GPA)和GxxxG motif | 第16-17页 |
| 1.3.2 极性氨基酸序列 | 第17-18页 |
| 1.3.3 亮氨酸拉链 | 第18-19页 |
| 1.4 影响跨膜蛋白相互作用的重要因素 | 第19-21页 |
| 1.4.1 跨膜区氨基酸序列的长度和位置 | 第19-20页 |
| 1.4.2 极性残基 | 第20页 |
| 1.4.3 芳香族氨基酸 | 第20-21页 |
| 1.4.4 带正电残基 | 第21页 |
| 1.5 跨膜蛋白相互作用的常用实验检测手段 | 第21-23页 |
| 1.5.1 TOXCAT体系 | 第22页 |
| 1.5.2 荧光共振能量转移 | 第22页 |
| 1.5.3 色氨酸诱导淬灭(TrIQ)方法 | 第22-23页 |
| 1.6 计算机模拟法表征跨膜蛋白之间的相互作用 | 第23-24页 |
| 1.7 跨膜短肽的应用 | 第24页 |
| 1.8 选题的意义及课题的主要内容 | 第24-27页 |
| 1.8.1 选题的意义 | 第24-25页 |
| 1.8.2 课题的主要内容 | 第25-27页 |
| 第二章 跨膜区长度对跨膜蛋白相互作用的影响 | 第27-47页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验部分 | 第27-38页 |
| 2.2.1 实验仪器与材料 | 第27-29页 |
| 2.2.1.1 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.1.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 TOXCAT载体的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.2.1 跨膜区的选择及退火 | 第29-30页 |
| 2.2.2.2 酶切 | 第30-31页 |
| 2.2.2.3 胶回收 | 第31-32页 |
| 2.2.2.4 酶连 | 第32页 |
| 2.2.3 感受态细胞MM39的制备 | 第32页 |
| 2.2.4 转化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 菌落PCR | 第33-34页 |
| 2.2.6 CAT活性测定 | 第34-35页 |
| 2.2.7 MalE互补实验 | 第35-36页 |
| 2.2.8 Western blot实验 | 第36-38页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第38-46页 |
| 2.3.1 PSGL-1跨膜区的野生型TOXCAT载体构建 | 第38-39页 |
| 2.3.2 PSGL-1跨膜区的野生型TOXCAT载体单克隆验证 | 第39-40页 |
| 2.3.3 PSGL-1不同长度跨膜区的TOXCAT载体测序结果 | 第40-43页 |
| 2.3.4 不同长度跨膜区的CAT活性测定 | 第43-45页 |
| 2.3.5 不同长度跨膜区的MalE互补实验结果 | 第45页 |
| 2.3.6 不同长度跨膜区的Western blot实验结果 | 第45-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 亮氨酸拉链模型对跨膜蛋白相互作用的影响 | 第47-65页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验部分 | 第47-50页 |
| 3.2.1 实验仪器与材料 | 第47页 |
| 3.2.2 TOXCAT突变体引物设计 | 第47-49页 |
| 3.2.3 定点突变 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第50-63页 |
| 3.3.1 PSGL-1跨膜区定点突变结果 | 第50-57页 |
| 3.3.2 亮氨酸扫描突变 | 第57-59页 |
| 3.3.3 丙氨酸扫描突变 | 第59-61页 |
| 3.3.4 突变体MalE互补实验结果 | 第61-62页 |
| 3.3.5 突变体Western blot实验结果 | 第62-63页 |
| 3.4 本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 PSGL-1跨膜区相互作用的分子动力学模拟 | 第65-73页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 模拟体系构建和参数设定 | 第65-66页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第66-71页 |
| 4.3.1 PSGL-1-TM野生型在DPPC膜中相互作用的粗粒化模拟 | 第66-68页 |
| 4.3.2 PSGL-1-TM突变体在DPPC膜中相互作用的粗粒化模拟 | 第68-71页 |
| 4.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第83-85页 |
| 作者和导师简介 | 第85-86页 |
| 附件 | 第86-87页 |
