| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-31页 |
| 1.1 卵泡发育与闭锁 | 第9-12页 |
| 1.1.1 卵泡发育过程 | 第9-10页 |
| 1.1.2 卵原细胞发育到原始卵泡 | 第10页 |
| 1.1.3 原始卵泡发育到初级卵泡 | 第10页 |
| 1.1.4 初级卵泡发育到有腔卵泡 | 第10-11页 |
| 1.1.5 有腔卵泡发育及优势卵泡选择 | 第11页 |
| 1.1.6 卵泡发育过程中激素调控 | 第11-12页 |
| 1.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁 | 第12-19页 |
| 1.2.1 细胞凋亡研究进展 | 第12页 |
| 1.2.2 细胞凋亡与卵泡闭锁的相关性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 卵泡闭锁过程中参与细胞凋亡的调控因子 | 第13-19页 |
| 1.2.3.1 雌激素相关细胞因子 | 第13-15页 |
| 1.2.3.2 胰岛素样生长因子 | 第15页 |
| 1.2.3.3 其他细胞存活因子 | 第15-16页 |
| 1.2.3.4 FAS配体与FAS调控系统 | 第16-17页 |
| 1.2.3.5 肿瘤坏死因子(TNF-α) | 第17-18页 |
| 1.2.3.6 TNF-α诱导凋亡相关配体(TRAIL) | 第18页 |
| 1.2.3.7 BCL家族成员(线粒体介导的凋亡) | 第18-19页 |
| 1.3 氧化应激引起颗粒细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 1.3.1 氧化应激的概念 | 第19页 |
| 1.3.2 氧化应激的产生和危害 | 第19页 |
| 1.3.3 氧化应激与颗粒细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究工作的目的与意义 | 第20页 |
| 参考文献 | 第20-31页 |
| 第二章 试验研究JNK/FoxO1/puma参与调控颗粒细胞凋亡的过程 | 第31-73页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 材料和方法 | 第33-52页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.2.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 2.2.1.2 主要试剂与耗材 | 第33-34页 |
| 2.2.1.3 仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2.1.4 RT-PCR引物 | 第35页 |
| 2.2.1.5 相关生物学数据库及软件 | 第35-36页 |
| 2.2.1.6 相关溶液的配制 | 第36页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第36-52页 |
| 2.2.2.1 实验动物的预处理 | 第36-37页 |
| 2.2.2.2 颗粒细胞的采集 | 第37页 |
| 2.2.2.3 卵泡颗粒细胞总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.2.4 反转录cDNA的合成 | 第38-39页 |
| 2.2.2.5 实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR) | 第39-40页 |
| 2.2.2.6 聚合酶链式反应(PCR) | 第40-41页 |
| 2.2.2.7 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第41页 |
| 2.2.2.8 免疫组化 | 第41-44页 |
| 2.2.2.9 TUNEL染色 | 第44页 |
| 2.2.2.10 质粒的获取 | 第44-49页 |
| 2.2.2.11 western blot分析 | 第49-50页 |
| 2.2.2.12 颗粒细胞的免疫荧光染色 | 第50-52页 |
| 2.2.2.13 数据分析 | 第52页 |
| 2.3 试验结果 | 第52-65页 |
| 2.3.1 FoxO1参与氧化应激引起的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡 | 第52-54页 |
| 2.3.1.1 氧化应激可导致小鼠卵巢颗粒细胞发生凋亡 | 第52-54页 |
| 2.3.1.2 凋亡的小鼠卵巢颗粒细胞中FoxO1表达升高 | 第54页 |
| 2.3.2 JNK参与氧化应激引起颗粒细胞凋亡过程中FoxO1的调控 | 第54-59页 |
| 2.3.2.1 JNK参与氧化应激诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡 | 第54-56页 |
| 2.3.2.2 JNK参与氧化应激诱导的FoxO1表达升高 | 第56-57页 |
| 2.3.2.3 JNK激活导致FoxO1发生入核 | 第57-58页 |
| 2.3.2.4 FoxO1入核后调节自身转录 | 第58-59页 |
| 2.3.3 氧化应激引起颗粒细胞凋亡过程中FoxO1介导puma表达 | 第59-65页 |
| 2.3.3.1 puma在氧化应激引起的小鼠闭锁卵巢组织中表达 | 第59-61页 |
| 2.3.3.2 H_2O_2诱导体外培养卵巢颗粒细胞凋亡过程中puma表达升高 | 第61-63页 |
| 2.3.3.3 卵巢颗粒细胞中FoxO1调控puma的蛋白水平 | 第63-64页 |
| 2.3.3.4 利用FoxO1的核定位调节其转录活性对puma表达的影响 | 第64-65页 |
| 2.4 讨论 | 第65-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 全文结论 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第77页 |
