| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 小麦的营养品质 | 第12-13页 |
| 1.2 微量元素Fe、Zn的重要性 | 第13-14页 |
| 1.3 铁蛋白功能与结构 | 第14-15页 |
| 1.4 铁蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 野生二粒小麦及其优异性状 | 第16-17页 |
| 1.6 立题依据 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 供试材料 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 铁蛋白基因的克隆 | 第19-23页 |
| 2.2.1.1 基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.1.2 铁蛋白基因的PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.1.3 目的片段的回收纯化 | 第21页 |
| 2.2.1.4 感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.1.5 DNA片段与T载体的连接 | 第22页 |
| 2.2.1.6 大肠杆菌转化 | 第22-23页 |
| 2.2.1.7 阳性克隆的PCR检测 | 第23页 |
| 2.2.1.8 序列测定 | 第23页 |
| 2.2.2 小麦RNA提取及反转录 | 第23-25页 |
| 2.2.2.1 小麦RNA提取 | 第23-25页 |
| 2.2.2.2 反转录(cDNA第一链的合成) | 第25页 |
| 2.2.3 cDNA序列克隆 | 第25页 |
| 2.2.4 荧光定量表达分析 | 第25-27页 |
| 2.2.4.1 荧光定量引物 | 第25-26页 |
| 2.2.4.2 标准品的稀释 | 第26页 |
| 2.2.4.3 标准曲线的制作 | 第26页 |
| 2.2.4.4 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 2.2.5 籽粒蛋白质含量测定 | 第27页 |
| 2.2.6 籽粒微量元素含量测定 | 第27-28页 |
| 2.2.7 籽粒千粒重测定 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-49页 |
| 3.1 普通小麦祖先物种中铁蛋白基因的克隆分析 | 第28页 |
| 3.2 野生二粒小麦-普通小麦渐渗系中铁蛋白基因的克隆分析 | 第28-29页 |
| 3.3 RNA纯度检测结果 | 第29-30页 |
| 3.4 小麦铁蛋白基因cDNA序列结构分析 | 第30-31页 |
| 3.5 铁蛋白基因推导的氨基酸序列结构分析 | 第31-40页 |
| 3.5.1 铁蛋白的氨基酸序列结构分析 | 第31-34页 |
| 3.5.2 Ferritin的保守区分析 | 第34页 |
| 3.5.3 Ferritin的生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.5.4 铁蛋白二级结构分析 | 第36页 |
| 3.5.5 铁蛋白氨基酸序列三级结构分析 | 第36-37页 |
| 3.5.6 铁蛋白基因的系统进化分析 | 第37-40页 |
| 3.6 铁蛋白基因在D1、D97及其与CN16杂交后代渐渗系中的表达分析 | 第40-49页 |
| 3.6.1 引物的特异性检测 | 第40-41页 |
| 3.6.2 目的基因与内参基因的标准曲线及扩增曲线 | 第41-44页 |
| 3.6.3 目的基因的定量表达分析 | 第44-45页 |
| 3.6.4 籽粒蛋白质含量分析 | 第45-46页 |
| 3.6.5 籽粒Fe、Zn含量测定结果 | 第46-47页 |
| 3.6.6 籽粒千粒重含量测定结果 | 第47-48页 |
| 3.6.7 相关性分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 普通小麦铁蛋白基因的组成及其来源 | 第49页 |
| 4.2 小麦铁蛋白基因的结构与功能特征 | 第49-51页 |
| 4.3 野生二粒小麦对普通小麦营养品质的遗传改良作用 | 第51-52页 |
| 5 本研究的创新点 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
