| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第7-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-24页 |
| 第一章 肿瘤干细胞与肿瘤微环境之间的关系 | 第12-20页 |
| 1 肿瘤干细胞 | 第12页 |
| 2 TICs与微环境之间的关系 | 第12-13页 |
| 3 TICs的多种表面标志物 | 第13-14页 |
| 4 CD133结构及表面标志物 | 第14-16页 |
| 5 靶向TICs标志物的研究进展 | 第16-17页 |
| 参考文献 | 第17-20页 |
| 第二章 抗体-药物融合物导向治疗研究概况 | 第20-24页 |
| 1 抗体简介 | 第20页 |
| 2 ADCs的研究进展 | 第20-21页 |
| 3 Colicin Ia及蛙皮抗菌肽简介 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-24页 |
| 第二部分 实验研究 | 第24-69页 |
| 第一章 抗CD133胞外区骆驼多克隆抗体的制备及鉴定 | 第24-32页 |
| 摘要 | 第24-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-30页 |
| ·重组质粒pET28a-CD133的构建与鉴定 | 第27页 |
| ·CD133-606的原核表达及融合蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·抗体效价的测定 | 第28-29页 |
| ·Western Blot检测多抗的特异结合活性 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二章 非免疫骆驼单域抗体库的构建及筛选 | 第32-49页 |
| 摘要 | 第32页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-40页 |
| ·新疆双峰驼天然抗体库的构建及评估 | 第33-38页 |
| ·骆驼重链抗体天然噬菌体展示文库的表达 | 第38-39页 |
| ·CD133-606抗原蛋白对噬菌体展示文库的筛选 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-46页 |
| ·骆驼VHH抗体基因的准备： | 第40-41页 |
| ·pMECS载体的准备 | 第41-42页 |
| ·转化效率计算和骆驼天然抗体库库容估算 | 第42-43页 |
| ·新疆双峰驼噬菌体展示文库的构建及筛选 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 抗CD133_(-606)纳米抗体的初步鉴定 | 第49-62页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| ·菌种及载体 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第50-51页 |
| ·亚克隆引物设计 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-55页 |
| ·小量诱导TG1-pMECS-VHH-X表达蛋白 | 第51页 |
| ·小量诱导HB2151-pMECS-VHH-X表达VHH蛋白 | 第51页 |
| ·小量诱导BL21-pMECS-VHH-X表达VHH蛋白 | 第51页 |
| ·重复序列测序 | 第51-52页 |
| ·验证VHH-02抗体蛋白与CD133蛋白结合活性 | 第52-54页 |
| ·构建pET28a-VHH07，pET28-VHH13，pET28a-VHH35重组载体 | 第54-55页 |
| 3.结果 | 第55-59页 |
| ·VHH-02蛋白的诱导表达及纯化 | 第55页 |
| ·三轮筛选获得的重复序列的亚克隆 | 第55-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 第四章 大肠杆菌毒素分子和蛙皮素抗菌肽诱导表达及毒性检测 | 第62-69页 |
| 摘要 | 第62-63页 |
| 1 材料 | 第63-64页 |
| ·菌种和肿瘤细胞株 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·细胞培养所需试剂 | 第63-64页 |
| 2 方法 | 第64页 |
| ·诱导表达Colicin Ia蛋白和Brevinin-2R蛋白表达及纯化 | 第64页 |
| ·CCK-8 检测Colicin Ia蛋白及Brevinin-2R对癌细胞的生长抑制作用 | 第64页 |
| 3 结果 | 第64-66页 |
| ·Colicin Ia蛋白的表达纯化 | 第65页 |
| ·Brevinin-2R蛋白的诱导表达 | 第65-66页 |
| ·CCK-8 检测两种细胞毒性肽对癌细胞的生长抑制作用 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 总结 | 第69-70页 |
| 展望 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
| 参与课题及发表文章 | 第72-73页 |
| 参与课题 | 第72-73页 |
