| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| ·引言 | 第8页 |
| ·细菌应对热激胁迫的机制及严紧反应 | 第8-10页 |
| ·CarD的发现及其结构功能 | 第10-12页 |
| ·CarD严紧调控rRNA转录 | 第12-13页 |
| ·耐辐射异常球菌 | 第13-14页 |
| ·立题依据及技术路线 | 第14-16页 |
| ·立题依据 | 第14-15页 |
| ·技术路线 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-37页 |
| ·实验材料 | 第16-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·抗生素 | 第17页 |
| ·酶和化学试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·实验用试剂盒 | 第18页 |
| ·主要溶液配制 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-37页 |
| ·DNA提取 | 第20-22页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第22-24页 |
| ·PCR产物的纯化和回收 | 第24-25页 |
| ·酶切及连接反应 | 第25-26页 |
| ·耐辐射异常球菌线性转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌热激转化 | 第27页 |
| ·生长曲线的测定 | 第27-28页 |
| ·热激胁迫实验 | 第28-29页 |
| ·RNA提取 | 第29页 |
| ·反转录 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·菌株代谢底物变化biolog分析 | 第31页 |
| ·透射电镜实验 | 第31-32页 |
| ·CarD蛋白表达载体的构建 | 第32页 |
| ·CarD蛋白的表达 | 第32-33页 |
| ·利用2ml几丁质亲和柱进行蛋白纯化 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第35-37页 |
| 3 结果分析 | 第37-58页 |
| ·DR基因组中CarD的基因序列及蛋白结构分析 | 第37-38页 |
| ·△carD缺失突变株的构建 | 第38页 |
| ·突变株△carD对热激胁迫的表型 | 第38-39页 |
| ·野生型、突变株及回补株正常条件下生长 | 第39-40页 |
| ·电镜结果分析 | 第40-41页 |
| ·野生型及突变株代谢底物变化biolog分析结果 | 第41-43页 |
| ·热冲击下热胁迫相关基因的表达 | 第43-44页 |
| ·CarD蛋白的表达纯化 | 第44-55页 |
| ·CarD蛋白表达载体的构建结果 | 第44-50页 |
| ·组氨酸标签的CarD蛋白的表达结果 | 第50-52页 |
| ·几丁质标签的CarD蛋白的表达及纯化结果 | 第52-55页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析CarD与热相关基因间的调控关系 | 第55-58页 |
| ·基因启动子：：LacZ融合表达载体的构建结果 | 第55页 |
| ·耐辐射异常球菌的DR_1314、dnal1、DR_0326和DR_0972基因启动子区的克隆 | 第55-56页 |
| ·转化实验确定CarD蛋白对耐辐射异常球菌的DR_1314、dnal1、DR_0326和DR_0972基因启动子的影响 | 第56-58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
