摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
·丹参的概况 | 第10-11页 |
·丹参的化学成分 | 第11页 |
·水溶性成分 | 第11页 |
·脂溶性成分 | 第11页 |
·丹参的药理活性 | 第11-14页 |
·抗心血管疾病的活性 | 第11-12页 |
·抗动脉粥样硬化的活性 | 第12页 |
·抗脑缺血的活性 | 第12-13页 |
·保护肝脏的活性 | 第13页 |
·抗肿瘤的活性 | 第13-14页 |
·抗血栓的活性 | 第14页 |
·植物雄性不育 | 第14-18页 |
·细胞核雄性不育 | 第15-16页 |
·核质互作雄性不育 | 第16-18页 |
·蛋白质组学概述 | 第18-21页 |
·iTRAQ技术 | 第18-19页 |
·蛋白质组学在植物雄性不育的研究领域之中的应用 | 第19-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-35页 |
·试验材料 | 第21页 |
·植物材料 | 第21页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-35页 |
·蛋白质提取及酶解 | 第21-22页 |
·iTRAQ标记 | 第22页 |
·SCX分离 | 第22页 |
·液质联用分析 | 第22页 |
·数据处理和生物信息学分析 | 第22-24页 |
·总RNA的提取 | 第24-25页 |
·总RNA的质量检测 | 第25页 |
·第一链cDNA的合成 | 第25页 |
·cDNA质量的初步检测 | 第25-26页 |
·目的基因的实时荧光定量PCR检测 | 第26-28页 |
·PSAB、PETB基因的克隆 | 第28-30页 |
·琼脂糖凝胶产物回收纯化cDNA | 第30页 |
·目的片段与PMD19-T载体的连接 | 第30页 |
·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第30-31页 |
·连接产物的转化 | 第31页 |
·单克隆菌落检测 | 第31-32页 |
·提取PSAB-T、PETB-T和pCsGFPBT载体的质粒 | 第32页 |
·双酶切及连接 | 第32-34页 |
·连接产物的转化及单克隆菌落的检测 | 第34页 |
·测序验证及双酶切验证 | 第34-35页 |
第三章 实验结果与分析 | 第35-49页 |
·蛋白的鉴定 | 第35-38页 |
·基本鉴定信息 | 第35页 |
·蛋白相对分子质量分布 | 第35页 |
·肽段序列长度分布 | 第35-36页 |
·特有肽段数量分布 | 第36-37页 |
·肽段序列覆盖度 | 第37-38页 |
·蛋白的注释 | 第38-40页 |
·GO分析 | 第38页 |
·COG分析 | 第38-40页 |
·Pathway分析 | 第40页 |
·差异表达蛋白的分析 | 第40-43页 |
·部分差异蛋白的转录水平分析 | 第43-46页 |
·总RNA质量分析 | 第43-44页 |
·实时荧光定量 | 第44-46页 |
·PSAB及PETB基因过表达载体的构建 | 第46-49页 |
·cDNA质量检测结果 | 第46页 |
·PSAB-T及PETB-T的测序结果分析 | 第46-47页 |
·pCsGFPBT-PSAB及pCsGFPBT-PETB过表达载体测序验证及双酶切鉴定结果 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-52页 |
·iTRAQ技术的优缺点 | 第49页 |
·丹参总RNA的提取 | 第49-50页 |
·转录水平和蛋白质表达水平的一致性分析 | 第50-51页 |
·实时荧光定量PCR引物设计注意事项 | 第51页 |
·重组质粒双酶切位点的选择 | 第51-52页 |
第五章 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 | 第58-60页 |
缩略词 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |