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丹参雄性不育相关蛋白的挖掘及其功能验证

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-21页
   ·丹参的概况第10-11页
   ·丹参的化学成分第11页
     ·水溶性成分第11页
     ·脂溶性成分第11页
   ·丹参的药理活性第11-14页
     ·抗心血管疾病的活性第11-12页
     ·抗动脉粥样硬化的活性第12页
     ·抗脑缺血的活性第12-13页
     ·保护肝脏的活性第13页
     ·抗肿瘤的活性第13-14页
     ·抗血栓的活性第14页
   ·植物雄性不育第14-18页
     ·细胞核雄性不育第15-16页
     ·核质互作雄性不育第16-18页
   ·蛋白质组学概述第18-21页
     ·iTRAQ技术第18-19页
     ·蛋白质组学在植物雄性不育的研究领域之中的应用第19-21页
第二章 材料和方法第21-35页
   ·试验材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·主要试剂及试剂盒第21页
   ·试验方法第21-35页
     ·蛋白质提取及酶解第21-22页
     ·iTRAQ标记第22页
     ·SCX分离第22页
     ·液质联用分析第22页
     ·数据处理和生物信息学分析第22-24页
     ·总RNA的提取第24-25页
     ·总RNA的质量检测第25页
     ·第一链cDNA的合成第25页
     ·cDNA质量的初步检测第25-26页
     ·目的基因的实时荧光定量PCR检测第26-28页
     ·PSAB、PETB基因的克隆第28-30页
     ·琼脂糖凝胶产物回收纯化cDNA第30页
     ·目的片段与PMD19-T载体的连接第30页
     ·制备大肠杆菌感受态细胞第30-31页
     ·连接产物的转化第31页
     ·单克隆菌落检测第31-32页
     ·提取PSAB-T、PETB-T和pCsGFPBT载体的质粒第32页
     ·双酶切及连接第32-34页
     ·连接产物的转化及单克隆菌落的检测第34页
     ·测序验证及双酶切验证第34-35页
第三章 实验结果与分析第35-49页
   ·蛋白的鉴定第35-38页
     ·基本鉴定信息第35页
     ·蛋白相对分子质量分布第35页
     ·肽段序列长度分布第35-36页
     ·特有肽段数量分布第36-37页
     ·肽段序列覆盖度第37-38页
   ·蛋白的注释第38-40页
     ·GO分析第38页
     ·COG分析第38-40页
     ·Pathway分析第40页
   ·差异表达蛋白的分析第40-43页
   ·部分差异蛋白的转录水平分析第43-46页
     ·总RNA质量分析第43-44页
     ·实时荧光定量第44-46页
   ·PSAB及PETB基因过表达载体的构建第46-49页
     ·cDNA质量检测结果第46页
     ·PSAB-T及PETB-T的测序结果分析第46-47页
     ·pCsGFPBT-PSAB及pCsGFPBT-PETB过表达载体测序验证及双酶切鉴定结果第47-49页
第四章 讨论第49-52页
   ·iTRAQ技术的优缺点第49页
   ·丹参总RNA的提取第49-50页
   ·转录水平和蛋白质表达水平的一致性分析第50-51页
   ·实时荧光定量PCR引物设计注意事项第51页
   ·重组质粒双酶切位点的选择第51-52页
第五章 结论第52-53页
参考文献第53-58页
附录第58-60页
缩略词第60-61页
致谢第61-62页
作者简历第62页

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