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高原适应表观遗传学甲基化研究技术MS-RDA的优化与应用

缩略词表第1-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
前言第13-20页
技术路线图第20-21页
实验材料与设备第21-24页
 1 实验细胞和血样第21页
 2 主要试剂和设备第21-22页
 3 实验所需溶液的配置第22页
 4 载体所用质粒第22-23页
 5 实验所用的引物序列第23-24页
实验方法第24-31页
 1 改良的MS-RDA的原理第24-25页
 2 改良的MS-RDA的实验步骤第25-29页
   ·细胞培养、细胞和血凝块DNA提取第25页
   ·检测子和驱赶子制备第25-26页
   ·检测子和驱赶子的扩增第26-27页
   ·消减杂交第27页
   ·片段回收测序第27-28页
   ·结果分析第28-29页
 3 T载体构建及连接方法优化第29-31页
   ·PCR引物的磷酸化及PCR扩增反应的条件第29页
   ·检查菌液PCR鉴定转化子的阳性率第29-30页
   ·基于XcmI识别序列和pCDNA3 骨架的T载体的构建第30页
   ·T载体和PCR片段连接的条件优化第30-31页
实验结果第31-47页
 第一章 表观遗传学DNA甲基化MS-RDA技术方法的优化第31-35页
  1 改良的MS-RDA验证过程电泳图:第31-34页
  2 片段克隆与转化测序:第34页
  结语:第34-35页
 第二章 基于XcmI识别序列的T载体的构建及其与PCR片段连接的条件优化 .. 31第35-40页
  1 pCDNA3-XcmI-H4-XcmI质粒及T载体的构建第35-36页
  2 T载体与人组蛋白H4 cDNA PCR片段的连接及其条件的优化第36-37页
  3 T载体与人CRBN cDNA PCR片段的连接及其条件的优化第37-39页
  结语:第39-40页
 第三章 用改进MS-RDA法进行高原与平原柯尔克孜族样品甲基化差异研究第40-47页
  1 MS-RDA过程电泳图:第40-43页
  2 五对样品杂交筛选所得片段克隆与测序结果第43-45页
  3 Blast和Genbank比对查询测序第45-46页
  结语:第46-47页
讨论第47-51页
全文总结第51-52页
参考文献第52-55页
文献综述第55-65页
 参考文献第62-65页
个人简历第65-66页
致谢第66页

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