缩略词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
前言 | 第13-20页 |
技术路线图 | 第20-21页 |
实验材料与设备 | 第21-24页 |
1 实验细胞和血样 | 第21页 |
2 主要试剂和设备 | 第21-22页 |
3 实验所需溶液的配置 | 第22页 |
4 载体所用质粒 | 第22-23页 |
5 实验所用的引物序列 | 第23-24页 |
实验方法 | 第24-31页 |
1 改良的MS-RDA的原理 | 第24-25页 |
2 改良的MS-RDA的实验步骤 | 第25-29页 |
·细胞培养、细胞和血凝块DNA提取 | 第25页 |
·检测子和驱赶子制备 | 第25-26页 |
·检测子和驱赶子的扩增 | 第26-27页 |
·消减杂交 | 第27页 |
·片段回收测序 | 第27-28页 |
·结果分析 | 第28-29页 |
3 T载体构建及连接方法优化 | 第29-31页 |
·PCR引物的磷酸化及PCR扩增反应的条件 | 第29页 |
·检查菌液PCR鉴定转化子的阳性率 | 第29-30页 |
·基于XcmI识别序列和pCDNA3 骨架的T载体的构建 | 第30页 |
·T载体和PCR片段连接的条件优化 | 第30-31页 |
实验结果 | 第31-47页 |
第一章 表观遗传学DNA甲基化MS-RDA技术方法的优化 | 第31-35页 |
1 改良的MS-RDA验证过程电泳图: | 第31-34页 |
2 片段克隆与转化测序: | 第34页 |
结语: | 第34-35页 |
第二章 基于XcmI识别序列的T载体的构建及其与PCR片段连接的条件优化 .. 31 | 第35-40页 |
1 pCDNA3-XcmI-H4-XcmI质粒及T载体的构建 | 第35-36页 |
2 T载体与人组蛋白H4 cDNA PCR片段的连接及其条件的优化 | 第36-37页 |
3 T载体与人CRBN cDNA PCR片段的连接及其条件的优化 | 第37-39页 |
结语: | 第39-40页 |
第三章 用改进MS-RDA法进行高原与平原柯尔克孜族样品甲基化差异研究 | 第40-47页 |
1 MS-RDA过程电泳图: | 第40-43页 |
2 五对样品杂交筛选所得片段克隆与测序结果 | 第43-45页 |
3 Blast和Genbank比对查询测序 | 第45-46页 |
结语: | 第46-47页 |
讨论 | 第47-51页 |
全文总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
文献综述 | 第55-65页 |
参考文献 | 第62-65页 |
个人简历 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |