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真菌甘露聚糖酶的基因克隆表达及热稳定性机制初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
英文缩略表第15-16页
第一章 引言第16-23页
   ·β-甘露聚糖酶的研究进展第16-19页
     ·β-甘露聚糖酶的来源第16页
     ·β-甘露聚糖酶的分类第16-17页
     ·β-甘露聚糖酶的酶学性质第17页
     ·β-甘露聚糖酶的作用方式和水解产物第17-18页
     ·β-甘露聚糖酶的应用第18-19页
   ·嗜热甘露聚糖酶的研究进展第19-20页
     ·嗜热微生物与嗜热酶第19-20页
     ·嗜热 β-甘露聚糖酶及资源筛选第20页
     ·嗜热 β-甘露聚糖酶的特性第20页
   ·甘露聚糖酶的热稳定性改良研究进展第20-22页
     ·利用N-糖基化修饰对 β-甘露聚糖酶进行热稳定性的改造第21页
     ·碳水化合物结合模块(CBM)对热稳定性的影响第21页
     ·离子键及疏水作用影响甘露聚糖酶的热稳定性第21-22页
     ·其他影响甘露聚糖酶热稳定性的因素第22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
第二章 真菌甘露聚糖酶基因的克隆第23-38页
   ·实验材料第23-24页
     ·菌株、质粒第23页
     ·引物合成及测序第23页
     ·试剂及试剂盒第23页
     ·培养基及试剂的配制第23页
     ·主要仪器第23-24页
   ·实验方法第24-28页
     ·引物设计第24-25页
     ·甘露聚糖酶基因DNA全长序列的获得第25-26页
     ·甘露聚糖酶基因cDNA全长序列的获得第26-28页
   ·结果与分析第28-36页
     ·T. leycettanus JCM12802来源的甘露聚糖酶Man5A的全长序列的获得和三维结构分析第28-30页
     ·G. trabeum CBS900.73来源的甘露聚糖酶Man5B的全长序列的获得和三维结构分析第30-32页
     ·S. coccosporum NBRC 31817来源的甘露聚糖酶Man5D和Man5DB的序列分析第32-34页
     ·Alternaria sp.来源的甘露聚糖酶Man5DW和Man26DW的序列分析 .. 192.4 讨论第34-36页
   ·讨论第36-37页
 本章小结第37-38页
第三章 真菌甘露聚糖酶基因的表达与酶学性质分析第38-76页
   ·实验材料第38-39页
     ·菌株及质粒第38页
     ·试剂及试剂盒第38页
     ·培养基及试剂的配制第38-39页
     ·主要仪器第39页
   ·实验方法第39-43页
     ·酵母重组表达载体的构建第39页
     ·甘露聚糖酶的表达和纯化第39-41页
     ·重组甘露聚糖酶的酶学性质测定第41-43页
   ·实验结果与分析第43-69页
     ·T. leycettanus JCM12802来源的甘露聚糖酶Man5A的表达与性质分析第43-50页
     ·G. trabeum CBS900.73来源的甘露聚糖酶Man5B的表达与性质分析 . 35第50-55页
     ·S. coccosporum NBRC 31817来源的甘露聚糖酶Man5D和Man5DB的表达与性质分析第55-62页
     ·Alternaria sp.来源的甘露聚糖酶Man5DW和Man26DW的表达与性质分析第62-69页
   ·讨论第69-75页
 本章小结第75-76页
第四章 甘露聚糖酶热稳定性的研究第76-88页
   ·实验材料第76页
     ·菌株、质粒第76页
     ·引物合成及测序第76页
     ·试剂及试剂盒第76页
     ·培养基及试剂的配制第76页
   ·实验方法第76-79页
     ·T. leycettanus JCM12802来源的Man5A的热稳定性突变第76-77页
     ·Bispora sp. MEY-1 来源的Bman的糖基化位点突变第77-79页
   ·实验结果与分析第79-86页
     ·T. leycettanus JCM12802来源的Man5A的热稳定性突变第79-83页
     ·Bispora sp. MEY-1 来源的Bman的糖基化位点突变第83-86页
   ·讨论第86页
 本章小结第86-88页
第五章 全文结论第88-89页
参考文献第89-96页
致谢第96-97页
作者简历第97页

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