| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·病原特性 | 第10-11页 |
| ·PRV的分类地位 | 第10页 |
| ·PRV的结构与理化特性 | 第10页 |
| ·PRV的培养 | 第10-11页 |
| ·PRV基因组结构 | 第11页 |
| ·PRV的复制机理 | 第11-12页 |
| ·PRV重要编码蛋白 | 第12-14页 |
| ·gB蛋白 | 第12-13页 |
| ·gC蛋白 | 第13页 |
| ·gD蛋白 | 第13页 |
| ·gG蛋白 | 第13页 |
| ·gE蛋白 | 第13-14页 |
| ·tk蛋白 | 第14页 |
| ·pk蛋白 | 第14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·PRV流行现状 | 第14-15页 |
| ·易感动物 | 第15页 |
| ·传播方式 | 第15页 |
| ·PRV的诊断方法 | 第15-21页 |
| ·病毒分离与鉴定 | 第15-16页 |
| ·动物实验 | 第16页 |
| ·血清学诊断方法 | 第16-18页 |
| ·分子生物学技术 | 第18-21页 |
| 第二章 猪伪狂犬病毒gB基因的原核表达 | 第21-37页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·病毒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·gB基因重组质粒的构建 | 第22-26页 |
| ·猪伪狂犬病毒gB重组质粒的表达 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-35页 |
| ·gB基因的PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| ·gB重组质粒的的酶切鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·gB重组菌液测序结果 | 第30页 |
| ·gB重组蛋白小量诱导表达结果 | 第30-31页 |
| ·gB重组蛋白表达最优温度条件摸索结果 | 第31-34页 |
| ·gB重组蛋白的大量表达及纯化 | 第34页 |
| ·Western-blot鉴定纯化蛋白的反应原性结果 | 第34-35页 |
| ·gB蛋白浓度测定 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 猪伪狂犬病毒gB基因间接ELISA方法的初步建立 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·包被抗原蛋白及血清 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白最适包被浓度与血清稀释倍数的确定 | 第37-38页 |
| ·最适酶标二抗浓度的确定 | 第38页 |
| ·作用时间的确定 | 第38-39页 |
| ·重组gB抗原ELISA方法的重复性实验 | 第39页 |
| ·阴阳性临界值判定方法 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-47页 |
| ·重组蛋白最适包被浓度与血清稀释倍数的确定 | 第39-41页 |
| ·最适酶标二抗浓度的确定 | 第41页 |
| ·作用时间的确定 | 第41-43页 |
| ·重组gB抗原ELISA方法的重复性实验 | 第43-44页 |
| ·阴阳性临界值判定方法 | 第44-45页 |
| ·重组gB抗原ELISA方法与Biochek试剂盒比较结果 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第四章 猪伪狂犬病毒gB基因间接ELISA方法的优化 | 第49-59页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·重组蛋白、血清及细胞 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·gB重组蛋白构象优化及筛选 | 第49-50页 |
| ·消除待检血清中抗E.coli成份的干扰 | 第50页 |
| ·交叉反应性试验 | 第50页 |
| ·重组gB-ELISA检测方法优化后临界值的确定 | 第50页 |
| ·重组gB-ELISA检测方法优化后与Biochek试剂盒的一致性 | 第50-51页 |
| ·中和试验对差异血清的鉴定 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-56页 |
| ·gB重组蛋白的优化及筛选结果 | 第51-52页 |
| ·E.coli裂解液条件确定结果 | 第52-53页 |
| ·交叉反应试验结果 | 第53页 |
| ·重组gB-ELISA优化后临界值确定 | 第53-54页 |
| ·重组gB-ELISA检测方法优化后与Biochek试剂盒的一致性 | 第54页 |
| ·中和试验对差异血清的鉴定 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 符号说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
