| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·植物连作障碍的研究进展 | 第10-11页 |
| ·植物连作障碍的症状与危害 | 第10页 |
| ·连作障碍产生的原因 | 第10-11页 |
| ·地黄连作障碍的研究进展 | 第11-13页 |
| ·地黄与连作障碍 | 第11-12页 |
| ·地黄连作障碍的研究进展 | 第12-13页 |
| ·钙信号相关研究 | 第13-15页 |
| ·钙信号 | 第13-14页 |
| ·钙信号在植物感知和响应不同环境刺激过程中扮演着重要角色 | 第14页 |
| ·钙信号可能参与连作障碍胁迫响应 | 第14-15页 |
| ·数字基因表达谱研究 | 第15-16页 |
| ·数字基因表达谱简介 | 第15页 |
| ·数字化基因表达谱的原理和方法 | 第15-16页 |
| ·数字化基因表达谱的应用 | 第16页 |
| ·研究钙信号的生物学手段 | 第16-20页 |
| ·细胞内游离钙离子检测方法 | 第16-18页 |
| ·焦锑酸盐沉淀法 | 第17页 |
| ·钙荧光指示剂法 | 第17-18页 |
| ·荧光蛋白指示剂 | 第18页 |
| ·钙信号阻断剂的作用与应用 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 钙信号相关基因在头茬与连作地黄根部的差异表达 | 第21-33页 |
| ·材料与方法 | 第21-26页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·所用试剂与仪器 | 第21页 |
| ·总RNA提取(采用TRIZOL法) | 第21-22页 |
| ·数字基因表达谱(DGE)样品制备与测序 | 第22页 |
| ·数字基因表达谱(DGE)测序数据处理 | 第22页 |
| ·数字基因表达谱(DGE)差异表达基因筛选 | 第22-23页 |
| ·钙信号相关差异表达基因筛选 | 第23页 |
| ·钙信号相关差异表达基因在头茬与连作地黄体内的时空表达分析 | 第23-26页 |
| ·QRT-PCR引物设计 | 第23-24页 |
| ·反转录反应 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| ·定量PCR结果分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·总RNA质量鉴定 | 第26页 |
| ·差异表达基因分析 | 第26-28页 |
| ·差异表达基因筛选 | 第26-27页 |
| ·差异表达基因功能注释 | 第27-28页 |
| ·钙信号相关差异表达基因筛选 | 第28-30页 |
| ·钙信号相关基因定量RT-PCR时空表达分析 | 第30-32页 |
| ·结论与讨论 | 第32-33页 |
| 4 游离钙离子在头茬与连作地黄块根组织和细胞中的差异分布检测 | 第33-43页 |
| ·材料与方法 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验药品与仪器 | 第34页 |
| ·树脂半薄组织切片制样与观察 | 第34页 |
| ·地黄根尖组织内钙离子的荧光检测 | 第34页 |
| ·钙离子焦锑酸盐沉淀超薄切片制样与观察 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-42页 |
| ·地黄块根不同发育时期的表型和解剖学观察分析 | 第35-37页 |
| ·拉线期和块根膨大初期头茬与连作地黄根尖钙离子分布差异 | 第37-38页 |
| ·地黄拉线期和块根膨大初期头茬与连作地黄块根分裂形成层细胞内钙离子分布差异 | 第38-42页 |
| ·结论与讨论 | 第42-43页 |
| 5 钙信号阻断剂对地黄连作毒害的减缓作用 | 第43-54页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验药品 | 第43-44页 |
| ·钙信号阻断剂处理 | 第44页 |
| ·采样与收获期生物量统计 | 第44页 |
| ·提取RNA与反转录 | 第44页 |
| ·QRT-PCR引物设计 | 第44-45页 |
| ·定量PCR与结果分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-52页 |
| ·钙信号抑制剂处理对连作盆栽地黄生长的影响 | 第45-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·钙信号抑制剂处理对连作地黄钙信号相关基因的表达调控 | 第47-50页 |
| ·钙信号抑制剂对钙信号编码系统相关蛋白基因表达的影响 | 第47-49页 |
| ·钙信号抑制剂对钙信号编码系统相关蛋白基因表达的影响 | 第49-50页 |
| ·钙信号抑制剂对地黄响应连作相关基因的表达调控 | 第50-52页 |
| ·结论与讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 英文摘要 | 第62-64页 |
