| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 病原学研究 | 第10-11页 |
| 2 流行病学研究 | 第11-12页 |
| 3 主要表面蛋白基因的研究 | 第12-14页 |
| 4 腺病毒研究 | 第14-16页 |
| 5 转染技术的研究 | 第16-17页 |
| 6 本研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 试验研究 | 第18-35页 |
| 1 材料 | 第18-24页 |
| ·试验样本 | 第18页 |
| ·试验菌株与细胞系 | 第18页 |
| ·试验动物 | 第18页 |
| ·载体与主要试剂 | 第18页 |
| ·试验所需溶液 | 第18-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-24页 |
| 2 方法 | 第24-35页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·目的片段的扩增 | 第25页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·融合基因与pMD 18-T Simple克隆载体的连接 | 第26页 |
| ·重组连接后质粒DNA的转化 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第27页 |
| ·重组质粒pMD18-T-P23-33的鉴定 | 第27页 |
| ·重组腺病毒穿梭载体的构建 | 第27-28页 |
| ·pCR259-P23-33重组腺病毒穿梭质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·P23-33融合基因重组腺病毒表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·pAD-P23-33重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·重组腺病毒质粒pAd-P23-33的大量制备 | 第29-30页 |
| ·重组腺病毒质粒pAd-P23-33的线性化 | 第30页 |
| ·HEK-293细胞的复苏、培养 | 第30-31页 |
| ·重组腺病毒质粒pAd-P23-33转染HEK-293细胞 | 第31页 |
| ·表达产物的RT-PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组腺病毒的IPMA鉴定 | 第32页 |
| ·病毒滴度测定 | 第32页 |
| ·动物免疫前准备 | 第32-33页 |
| ·动物免疫及血清分离 | 第33页 |
| ·间接ELISA检测体液免疫水平 | 第33页 |
| ·细胞因子水平测定 | 第33-35页 |
| 结果 | 第35-43页 |
| 1 PCR扩增结果 | 第35页 |
| 2 克隆质粒的PCR及酶切鉴定 | 第35-36页 |
| 3 重组质粒PMD18-T-P23-33的序列测定 | 第36-37页 |
| 4 穿梭质粒的PCR及酶切鉴定 | 第37页 |
| 5 PAD-P23-33重组质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 6 腺病毒质粒PACⅠ线性化 | 第38-39页 |
| 7 细胞培养与接种病毒后比较图 | 第39页 |
| 8 重组腺病毒的RT-PCR鉴定 | 第39页 |
| 9 重组腺病毒的IPMA鉴定 | 第39-40页 |
| 10 病毒滴度测定结果 | 第40页 |
| 11 小鼠血清中ELISA抗体检测结果 | 第40-41页 |
| 12 免疫小鼠血清中细胞因子IL-4及IFN-Γ检测结果 | 第41-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56-57页 |
| 在研期间发表的论文 | 第57页 |
