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长链非编码RNA HOTAIR调控p21WAF1/CIP1对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
1. 前言第11-13页
2. 材料与方法第13-37页
 1. 实验材料与仪器第13-16页
     ·细胞系第13页
     ·实验动物第13页
     ·肺腺癌组织标本第13页
     ·实验试剂第13-14页
     ·实验仪器第14-16页
 2. 实验方法第16-37页
     ·细胞培养第16-19页
     ·总RNA的提取第19-20页
     ·实时定量PCR第20-22页
     ·蛋白质的提取与浓度测定第22-23页
     ·蛋白质免疫印迹(Western blot)第23-26页
     ·免疫组化第26-28页
     ·细胞转染siHOTAIR、siNC第28页
     ·细胞转染pc DNA3.1/ p21~(WAF1/CIP1)第28-31页
     ·G418筛选稳转细胞第31-32页
     ·MTT法检测细胞增殖活力第32-33页
     ·流式细胞术检测细胞周期第33-34页
     ·Hoechst 33258染色第34页
     ·流式细胞术检测细胞凋亡第34-35页
     ·裸鼠成瘤实验第35-36页
     ·数据处理第36-37页
3. 实验结果第37-48页
     ·HOTAIR在人肺腺癌细胞系耐顺铂细胞株A549/DDP中的表达量显著上调第37页
     ·外源性封闭人肺腺癌细胞系耐顺铂细胞株A549/DDP中HOTAIR的表达第37-39页
     ·HOTAIR对A549/DDP细胞的顺铂敏感性和细胞凋亡的影响第39页
     ·HOTAIR对细胞增殖和细胞周期的影响第39-41页
     ·HOTAIR调控肺腺癌细胞信号通路表达第41-42页
     ·HOTAIR在活体水平影响A549/DDP细胞对顺铂的敏感性第42-44页
     ·上调p21表达可逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性第44-46页
     ·HOTAIR与P21在肺腺癌组织中的表达水平呈负相关并与对顺铂的敏感性密切相关第46-48页
4. 讨论第48-52页
全文结论第52-53页
参考文献第53-59页
附录(一) 综述第59-68页
 参考文献第64-68页
附录(二) 缩略词表第68-69页
硕士期间发表及待发表文章第69-71页
致谢第71页

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