摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
1. 前言 | 第11-13页 |
2. 材料与方法 | 第13-37页 |
1. 实验材料与仪器 | 第13-16页 |
·细胞系 | 第13页 |
·实验动物 | 第13页 |
·肺腺癌组织标本 | 第13页 |
·实验试剂 | 第13-14页 |
·实验仪器 | 第14-16页 |
2. 实验方法 | 第16-37页 |
·细胞培养 | 第16-19页 |
·总RNA的提取 | 第19-20页 |
·实时定量PCR | 第20-22页 |
·蛋白质的提取与浓度测定 | 第22-23页 |
·蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第23-26页 |
·免疫组化 | 第26-28页 |
·细胞转染siHOTAIR、siNC | 第28页 |
·细胞转染pc DNA3.1/ p21~(WAF1/CIP1) | 第28-31页 |
·G418筛选稳转细胞 | 第31-32页 |
·MTT法检测细胞增殖活力 | 第32-33页 |
·流式细胞术检测细胞周期 | 第33-34页 |
·Hoechst 33258染色 | 第34页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
·裸鼠成瘤实验 | 第35-36页 |
·数据处理 | 第36-37页 |
3. 实验结果 | 第37-48页 |
·HOTAIR在人肺腺癌细胞系耐顺铂细胞株A549/DDP中的表达量显著上调 | 第37页 |
·外源性封闭人肺腺癌细胞系耐顺铂细胞株A549/DDP中HOTAIR的表达 | 第37-39页 |
·HOTAIR对A549/DDP细胞的顺铂敏感性和细胞凋亡的影响 | 第39页 |
·HOTAIR对细胞增殖和细胞周期的影响 | 第39-41页 |
·HOTAIR调控肺腺癌细胞信号通路表达 | 第41-42页 |
·HOTAIR在活体水平影响A549/DDP细胞对顺铂的敏感性 | 第42-44页 |
·上调p21表达可逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性 | 第44-46页 |
·HOTAIR与P21在肺腺癌组织中的表达水平呈负相关并与对顺铂的敏感性密切相关 | 第46-48页 |
4. 讨论 | 第48-52页 |
全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录(一) 综述 | 第59-68页 |
参考文献 | 第64-68页 |
附录(二) 缩略词表 | 第68-69页 |
硕士期间发表及待发表文章 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |