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长链非编码RNA HOTAIR在食管鳞癌中的功能及调控机制研究

中英文缩略词对照第1-8页
中文摘要第8-9页
ABSTRACT第9-11页
前言第11-15页
材料与方法第15-35页
 1. 实验材料、试剂与仪器第15-18页
   ·病例及临床组织标本来源第15页
   ·实验动物第15页
   ·细胞系第15页
   ·主要仪器设备第15-17页
   ·试剂来源第17-18页
 2. 实验方法第18-35页
   ·样品制备第18-19页
   ·细胞培养第19页
   ·总RNA的提取第19-20页
   ·实时荧光定量PCR第20-24页
   ·蛋白质的提取与浓度测定第24-25页
   ·蛋白质免疫印迹(western blot)第25-28页
   ·HOTAIR si-RNA、HK2 si-RNA、mi R-143mimic的瞬时转染第28-29页
   ·流式细胞仪检测细胞周期第29页
   ·MTT法检测细胞增殖活力第29页
   ·流式细胞术检测细胞凋亡第29-30页
   ·克隆形成试验第30页
   ·实验动物及裸鼠移植瘤模型第30-31页
   ·免疫组织化学第31-33页
   ·Transwell侵袭及迁移实验第33页
   ·划痕实验第33-34页
   ·双荧光素酶检测实验第34页
   ·数据处理第34-35页
结果第35-58页
 1. 食管鳞癌患者的预后与LNCRNA HOTAIR的相对表达量的关系第35-38页
 2. HOTAIR在细胞系中的表达水平检测以及细胞转染第38-41页
 3. 干扰HOTAIR对肿瘤细胞的侵袭和迁移能力的影响第41-43页
 4. 干扰HOTAIR后对肿瘤细胞凋亡的改变第43-44页
 5. 干扰HOTAIR后细胞周期和MTT增殖能力的变化第44-45页
 6. 食管鳞癌增殖功能实验—平板克隆形成实验第45-46页
 7. 裸鼠移植瘤模型第46-47页
 8. 生物信息学预测与双荧光素酶活性检测第47-49页
 9. 通过细胞层面,在MIRNA、蛋白水平上验证CERNA理论第49-52页
 10. 抑制HK2后细胞增殖、侵袭及迁移能力降低第52-55页
 11. 食管鳞癌组织样本MIR-143、HK2蛋白表达呈负相关第55-58页
讨论与展望第58-61页
参考文献第61-67页
文献综述第67-84页
 参考文献第77-84页
攻读学位期间科研成果及获得奖励第84-86页
致谢第86页

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