中英文缩略词对照 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第11-15页 |
材料与方法 | 第15-35页 |
1. 实验材料、试剂与仪器 | 第15-18页 |
·病例及临床组织标本来源 | 第15页 |
·实验动物 | 第15页 |
·细胞系 | 第15页 |
·主要仪器设备 | 第15-17页 |
·试剂来源 | 第17-18页 |
2. 实验方法 | 第18-35页 |
·样品制备 | 第18-19页 |
·细胞培养 | 第19页 |
·总RNA的提取 | 第19-20页 |
·实时荧光定量PCR | 第20-24页 |
·蛋白质的提取与浓度测定 | 第24-25页 |
·蛋白质免疫印迹(western blot) | 第25-28页 |
·HOTAIR si-RNA、HK2 si-RNA、mi R-143mimic的瞬时转染 | 第28-29页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第29页 |
·MTT法检测细胞增殖活力 | 第29页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
·克隆形成试验 | 第30页 |
·实验动物及裸鼠移植瘤模型 | 第30-31页 |
·免疫组织化学 | 第31-33页 |
·Transwell侵袭及迁移实验 | 第33页 |
·划痕实验 | 第33-34页 |
·双荧光素酶检测实验 | 第34页 |
·数据处理 | 第34-35页 |
结果 | 第35-58页 |
1. 食管鳞癌患者的预后与LNCRNA HOTAIR的相对表达量的关系 | 第35-38页 |
2. HOTAIR在细胞系中的表达水平检测以及细胞转染 | 第38-41页 |
3. 干扰HOTAIR对肿瘤细胞的侵袭和迁移能力的影响 | 第41-43页 |
4. 干扰HOTAIR后对肿瘤细胞凋亡的改变 | 第43-44页 |
5. 干扰HOTAIR后细胞周期和MTT增殖能力的变化 | 第44-45页 |
6. 食管鳞癌增殖功能实验—平板克隆形成实验 | 第45-46页 |
7. 裸鼠移植瘤模型 | 第46-47页 |
8. 生物信息学预测与双荧光素酶活性检测 | 第47-49页 |
9. 通过细胞层面,在MIRNA、蛋白水平上验证CERNA理论 | 第49-52页 |
10. 抑制HK2后细胞增殖、侵袭及迁移能力降低 | 第52-55页 |
11. 食管鳞癌组织样本MIR-143、HK2蛋白表达呈负相关 | 第55-58页 |
讨论与展望 | 第58-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
文献综述 | 第67-84页 |
参考文献 | 第77-84页 |
攻读学位期间科研成果及获得奖励 | 第84-86页 |
致谢 | 第86页 |