摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
第一部分 绪论 | 第10-21页 |
1 丙烯醛概述 | 第10-13页 |
·丙烯醛的主要用途 | 第10-13页 |
·丙烯醛的直接应用 | 第10-11页 |
·在有机合成中的运用 | 第11-12页 |
·丙烯醛类聚合物的应用 | 第12-13页 |
2 丙烯醛的危害 | 第13-14页 |
3 丙烯醛主要检测方法与预处理技术 | 第14-16页 |
·丙烯醛主要检测方法 | 第14-15页 |
·高效液相色谱 | 第14-15页 |
·气相色谱串联质谱 | 第15页 |
·液相色谱串联质谱 | 第15页 |
·检测样品中丙烯醛的预处理技术 | 第15-16页 |
·固相微萃取技术(SPME) | 第15-16页 |
·搅拌棒吸附萃取技术(SBSE) | 第16页 |
·大容量样品富集探针技术(SEP) | 第16页 |
4 免疫检测技术要点 | 第16-19页 |
·小分子抗原的合成与鉴定 | 第16-19页 |
·小分子抗原的合成 | 第16-18页 |
·抗原的鉴定方法 | 第18-19页 |
5 研究的目的与意义 | 第19-20页 |
6 实验路线 | 第20-21页 |
第二部分 材料与方法 | 第21-38页 |
1 试剂材料与仪器 | 第21-23页 |
·主要试剂与材料 | 第21-22页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·主要溶液的配制方法 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-38页 |
·丙烯醛完全抗原的合成与鉴定 | 第23-25页 |
·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的合成 | 第23-24页 |
·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的合成原理 | 第24页 |
·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的鉴定 | 第24-25页 |
·完全抗原蛋白浓度测定 | 第24-25页 |
·完全抗原紫外扫描分析 | 第25页 |
·完全抗原偶联比测定 | 第25页 |
·完全抗原 Acrolein-BSA 的合成与鉴定 | 第25页 |
·完全抗原的免疫原性检测 | 第25-27页 |
·动物的免疫 | 第25-26页 |
·免疫小鼠抗血清的测定 | 第26页 |
·间接 ELISA 法的试验操作步骤 | 第26-27页 |
·间接竞争 ELISA 法的试验操作步骤 | 第27页 |
·免疫小鼠抗血清特异性分析 | 第27页 |
·丙烯醛单克隆抗体的制备与鉴定 | 第27-35页 |
·SP2/0 细胞的复苏和培养 | 第27-33页 |
·SP2/0 细胞的复苏 | 第27-28页 |
·SP2/0 细胞的培养 | 第28页 |
·饲养细胞的制备 | 第28-29页 |
·脾细胞的制备 | 第29页 |
·细胞的融合 | 第29-30页 |
·融合细胞的培养与观察 | 第30页 |
·杂交瘤细胞上清的检测 | 第30-31页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第31页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第31-32页 |
·阳性杂交瘤细胞的扩增与冻存 | 第32页 |
·杂交瘤细胞的接种与腹水的采集 | 第32-33页 |
·腹水的纯化 | 第33页 |
·丙烯醛单克隆抗体的鉴定 | 第33-35页 |
·单克隆抗体效价的测定 | 第33-34页 |
·抗体亚类鉴定 | 第34页 |
·抗体特异性测定 | 第34-35页 |
·间接竞争 ELISA 方法的优化和建立 | 第35-38页 |
·包被缓冲液的选择 | 第35页 |
·包被温度和时间的选择 | 第35页 |
·封闭液的选择 | 第35页 |
·封闭时间的选择 | 第35页 |
·体系反应时间的选择 | 第35-36页 |
·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度 | 第36页 |
·间接竞争 ELISA 标准抑制曲线 | 第36-38页 |
第三部分 结果与讨论 | 第38-59页 |
1 丙烯醛完全抗原的鉴定 | 第38-42页 |
·完全抗原中蛋白浓度的测定 | 第38页 |
·完全抗原紫外光谱扫描分析 | 第38-40页 |
·完全抗原偶联比的计算 | 第40页 |
·抗血清抗体效价和特异性测定 | 第40-42页 |
·抗血清效价的测定 | 第40-41页 |
·抗血清特异性分析 | 第41-42页 |
2 丙烯醛单克隆抗体的制备与鉴定 | 第42-48页 |
·丙烯醛单克隆抗体细胞株的建立 | 第42-45页 |
·SP2/0 细胞复苏与观察 | 第42页 |
·饲养细胞的制备 | 第42-43页 |
·融合细胞培养与观察 | 第43页 |
·阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第43-44页 |
·单克隆抗体腹水的制备 | 第44-45页 |
·丙烯醛单克隆抗体的鉴定 | 第45-46页 |
·单克隆抗体效价的测定 | 第45-46页 |
·抗体亚类的鉴定用亚类试剂盒 | 第46页 |
·抗体的特异性鉴定 | 第46-48页 |
3 间接竞争 ELISA 方法的优化和建立 | 第48-55页 |
·包被缓冲液的选择 | 第48-49页 |
·包被温度和时间的选择 | 第49-50页 |
·封闭液的选择 | 第50-51页 |
·封闭时间的选择 | 第51页 |
·体系反应时间的选择 | 第51-53页 |
·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度 | 第53-54页 |
·间接竞争 ELISA 标准抑制曲线 | 第54-55页 |
4. 讨论 | 第55-59页 |
·小分子抗原的合成 | 第55-56页 |
·动物免疫方案对单克隆抗体制备的影响 | 第56页 |
·细胞培养 | 第56-57页 |
·单克隆抗体的制备 | 第57页 |
·ELISA 检测方法的条件选择 | 第57-58页 |
·免疫学分析法与仪器分析法的比较 | 第58-59页 |
第四部分 结论与展望 | 第59-61页 |
·结论 | 第59页 |
·展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
在读期间发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |