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丙烯醛单克隆抗体的制备以及ELISA方法的建立

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一部分 绪论第10-21页
 1 丙烯醛概述第10-13页
   ·丙烯醛的主要用途第10-13页
     ·丙烯醛的直接应用第10-11页
     ·在有机合成中的运用第11-12页
     ·丙烯醛类聚合物的应用第12-13页
 2 丙烯醛的危害第13-14页
 3 丙烯醛主要检测方法与预处理技术第14-16页
   ·丙烯醛主要检测方法第14-15页
     ·高效液相色谱第14-15页
     ·气相色谱串联质谱第15页
     ·液相色谱串联质谱第15页
   ·检测样品中丙烯醛的预处理技术第15-16页
     ·固相微萃取技术(SPME)第15-16页
     ·搅拌棒吸附萃取技术(SBSE)第16页
     ·大容量样品富集探针技术(SEP)第16页
 4 免疫检测技术要点第16-19页
   ·小分子抗原的合成与鉴定第16-19页
     ·小分子抗原的合成第16-18页
     ·抗原的鉴定方法第18-19页
 5 研究的目的与意义第19-20页
 6 实验路线第20-21页
第二部分 材料与方法第21-38页
 1 试剂材料与仪器第21-23页
   ·主要试剂与材料第21-22页
   ·主要仪器设备第22页
   ·主要溶液的配制方法第22-23页
 2 实验方法第23-38页
   ·丙烯醛完全抗原的合成与鉴定第23-25页
     ·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的合成第23-24页
     ·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的合成原理第24页
     ·丙烯醛完全抗原 Acrolein-KLH 的鉴定第24-25页
       ·完全抗原蛋白浓度测定第24-25页
       ·完全抗原紫外扫描分析第25页
       ·完全抗原偶联比测定第25页
     ·完全抗原 Acrolein-BSA 的合成与鉴定第25页
   ·完全抗原的免疫原性检测第25-27页
     ·动物的免疫第25-26页
     ·免疫小鼠抗血清的测定第26页
     ·间接 ELISA 法的试验操作步骤第26-27页
     ·间接竞争 ELISA 法的试验操作步骤第27页
     ·免疫小鼠抗血清特异性分析第27页
   ·丙烯醛单克隆抗体的制备与鉴定第27-35页
     ·SP2/0 细胞的复苏和培养第27-33页
       ·SP2/0 细胞的复苏第27-28页
       ·SP2/0 细胞的培养第28页
       ·饲养细胞的制备第28-29页
       ·脾细胞的制备第29页
       ·细胞的融合第29-30页
       ·融合细胞的培养与观察第30页
       ·杂交瘤细胞上清的检测第30-31页
       ·阳性杂交瘤细胞的筛选第31页
       ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第31-32页
       ·阳性杂交瘤细胞的扩增与冻存第32页
       ·杂交瘤细胞的接种与腹水的采集第32-33页
       ·腹水的纯化第33页
     ·丙烯醛单克隆抗体的鉴定第33-35页
       ·单克隆抗体效价的测定第33-34页
       ·抗体亚类鉴定第34页
       ·抗体特异性测定第34-35页
   ·间接竞争 ELISA 方法的优化和建立第35-38页
     ·包被缓冲液的选择第35页
     ·包被温度和时间的选择第35页
     ·封闭液的选择第35页
     ·封闭时间的选择第35页
     ·体系反应时间的选择第35-36页
     ·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度第36页
     ·间接竞争 ELISA 标准抑制曲线第36-38页
第三部分 结果与讨论第38-59页
 1 丙烯醛完全抗原的鉴定第38-42页
   ·完全抗原中蛋白浓度的测定第38页
   ·完全抗原紫外光谱扫描分析第38-40页
   ·完全抗原偶联比的计算第40页
   ·抗血清抗体效价和特异性测定第40-42页
     ·抗血清效价的测定第40-41页
     ·抗血清特异性分析第41-42页
 2 丙烯醛单克隆抗体的制备与鉴定第42-48页
   ·丙烯醛单克隆抗体细胞株的建立第42-45页
     ·SP2/0 细胞复苏与观察第42页
     ·饲养细胞的制备第42-43页
     ·融合细胞培养与观察第43页
     ·阳性杂交瘤细胞株的建立第43-44页
     ·单克隆抗体腹水的制备第44-45页
   ·丙烯醛单克隆抗体的鉴定第45-46页
     ·单克隆抗体效价的测定第45-46页
     ·抗体亚类的鉴定用亚类试剂盒第46页
   ·抗体的特异性鉴定第46-48页
 3 间接竞争 ELISA 方法的优化和建立第48-55页
   ·包被缓冲液的选择第48-49页
   ·包被温度和时间的选择第49-50页
   ·封闭液的选择第50-51页
   ·封闭时间的选择第51页
   ·体系反应时间的选择第51-53页
   ·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度第53-54页
   ·间接竞争 ELISA 标准抑制曲线第54-55页
 4. 讨论第55-59页
   ·小分子抗原的合成第55-56页
   ·动物免疫方案对单克隆抗体制备的影响第56页
   ·细胞培养第56-57页
   ·单克隆抗体的制备第57页
   ·ELISA 检测方法的条件选择第57-58页
   ·免疫学分析法与仪器分析法的比较第58-59页
第四部分 结论与展望第59-61页
   ·结论第59页
   ·展望第59-61页
参考文献第61-64页
在读期间发表的论文第64-65页
致谢第65页

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