摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 二化螟的发生与危害 | 第12-13页 |
2 信息化合物概述 | 第13-15页 |
·昆虫性信息素 | 第13页 |
·植物挥发物对昆虫取食和产卵选择性的影响 | 第13-15页 |
3 嗅觉感器及嗅觉感受机制 | 第15-16页 |
4 昆虫气味结合蛋白的研究进展 | 第16-24页 |
·昆虫气味结合蛋白的分子特征及其对气味分子的结合和释放机制 | 第16-18页 |
·昆虫气味结合蛋白的分类与分布 | 第18-21页 |
·昆虫气味结合蛋白的生理功能 | 第21-22页 |
·昆虫气味结合蛋白体外配体结合实验 | 第22-24页 |
5 本项研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 二化螟气味结合蛋白的基因克隆及序列分析 | 第26-42页 |
摘要 | 第26-27页 |
1 材料和方法 | 第27-34页 |
·供试昆虫 | 第27页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第27页 |
·昆虫总RNA的提取 | 第27-28页 |
·PCR引物设计 | 第28-31页 |
·PCR扩增 | 第31页 |
·RACE扩增 | 第31页 |
·PCR产物纯化、连接、转化、测序和序列分析 | 第31-34页 |
2 结果与分析 | 第34-40页 |
·二化螟气味结合蛋白基因cDNA片段的获得 | 第34-35页 |
·二化螟气味结合蛋白基因全长的cDNA克隆及序列分析 | 第35-38页 |
·二化螟气味结合蛋白的系统进化分析 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第三章 二化螟气味结合蛋白基因的表达谱研究 | 第42-52页 |
摘要 | 第42页 |
1 材料和方法 | 第42-47页 |
·供试昆虫及组织收集 | 第42-43页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第43页 |
·二化螟不同组织的总RNA提取 | 第43-44页 |
·cDNA第一链的合成 | 第44-45页 |
·PCR引物设计 | 第45-46页 |
·实时定量PCR反应 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-49页 |
·二化螟幼虫组织中气味结合蛋白的表达量比较 | 第47页 |
·二化螟成虫不同组织中气味结合蛋白的表达量比较 | 第47-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
第四章 二化螟CsupOBP1基因的原核表达及配体结合能力分析 | 第52-70页 |
摘要 | 第52-53页 |
1 材料和方法 | 第53-61页 |
·供试昆虫及组织收集 | 第53页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第53页 |
·昆虫总RNA的提取 | 第53-54页 |
·cDNA第一链的合成 | 第54页 |
·引物设计及PCR扩增 | 第54-55页 |
·PCR产物纯化、连接、转化和测序 | 第55页 |
·原核表达载体的构建 | 第55-58页 |
·蛋白CsupOBP的纯化 | 第58-60页 |
·荧光竞争性结合实验 | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-67页 |
·CsupOBP1原核表达载体的构建和鉴定 | 第61-62页 |
·CsupOBP1重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第62-63页 |
·1-NPN与CsupOBP1结合曲线的测定 | 第63页 |
·CsupOBP1与气味物质结合能力的测定 | 第63-67页 |
3 讨论 | 第67-70页 |
第五章 二化螟成虫对4种植物挥发性化合物的EAG反应 | 第70-74页 |
摘要 | 第70页 |
1 材料和方法 | 第70-71页 |
·供试昆虫 | 第70-71页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第71页 |
·气味溶液的配制 | 第71页 |
·EAG反应测定 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-72页 |
二化螟对4种植物挥发性化合物的EAG反应 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-74页 |
全文总结 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
附录:攻读硕士学位期间学术论文的发表情况 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |