| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-40页 |
| 1 结核病现状 | 第12-13页 |
| ·全球结核病疫情 | 第12页 |
| ·中国结核病疫情 | 第12-13页 |
| 2 结核分枝杆菌信号转导系统 | 第13-33页 |
| ·概况 | 第13-15页 |
| ·真核样丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 | 第15-20页 |
| ·PTK-磷酸酶系统 | 第20-24页 |
| ·结核菌信号转导系统运用潜力 | 第24-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 第2章 结核菌新型免疫抗原的筛选鉴定和运用初探 | 第40-54页 |
| 1 引言 | 第40-41页 |
| ·结核病诊断的重要性及现状 | 第40页 |
| ·电化学免疫传感器在诊断中的作用 | 第40-41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-44页 |
| ·菌株及培养条件 | 第41页 |
| ·结核分枝杆菌溶菌产物制备 | 第41-42页 |
| ·蛋白质双向凝胶电泳和Western blot及杂交点质谱鉴定 | 第42页 |
| ·Rv2175c的克隆表达及纯化 | 第42页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第42页 |
| ·血清样品 | 第42-43页 |
| ·ELISA | 第43页 |
| ·电化学免疫传感器的制备和血清检测 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-49页 |
| ·结核菌中4个蛋白点能够与结核菌患者血清杂交呈现较强信号 | 第44页 |
| ·免疫杂交点B为rv2175c基因编码的保守假设性的调节蛋白 | 第44-45页 |
| ·Rv2175c的克隆,表达及纯化 | 第45页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第45-46页 |
| ·Rv2175c特异性IgG健康人与结核病患者血清中很低,ELISA未能检测差异 | 第46-47页 |
| ·电化学免疫传感器能有效检测出结核病人血清中与Rv2175c相互作用分子 | 第47-49页 |
| 4 结论与建议 | 第49-51页 |
| ·结论与讨论 | 第49页 |
| ·建议 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第3章 结核菌H37Rv及牛分枝杆菌BCG中ptkA基因缺失后的蛋白质组学研究 | 第54-64页 |
| 1 引言 | 第54-55页 |
| 2 材料和方法 | 第55-56页 |
| ·菌株及培养条件 | 第55页 |
| ·结核菌全菌体蛋白的制备 | 第55页 |
| ·蛋白凝胶双向电泳 | 第55页 |
| ·蛋白差异点质谱鉴定 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-59页 |
| ·ptkA在结核菌H37Rv中的缺失导致蛋白质表达谱的上较大差异,但在牛分枝杆菌BCG中导致的差异并不明显 | 第56页 |
| ·结核菌H37Rv菌株中差异表达蛋白的鉴定 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| ·ptkA基因在结核菌中涉及压力反应,休眠及免疫原性 | 第59-61页 |
| ·为何ptkA基因的缺失对结核菌蛋白谱在不同菌株中差异较大? | 第61页 |
| 5 结论与建议 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第4章 结核菌PtkA受STPKs磷酸化调控 | 第64-78页 |
| 1 引言 | 第64-65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-67页 |
| ·菌株及培养条件 | 第65页 |
| ·基因克隆,蛋白表达与纯化 | 第65页 |
| ·结核菌全菌体蛋白制备 | 第65页 |
| ·体外蛋白激酶实验 | 第65-66页 |
| ·PtkA磷酸化位点鉴定 | 第66-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-76页 |
| ·PtkA被结核菌中内源性的蛋白激酶磷酸化 | 第67页 |
| ·STPKs体外磷酸化PtkA | 第67-68页 |
| ·PknD以时间和浓度依赖的方式磷酸化PtkA | 第68-69页 |
| ·PknD磷酸化PtkA的T~(119)和C-端靠近自磷酸化位点的一个基序 | 第69-76页 |
| 4 结论与建议 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第80页 |
