| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·类胡萝卜素概述 | 第8-13页 |
| ·自然界中类胡萝卜素的种类 | 第8页 |
| ·类胡萝卜素的来源 | 第8页 |
| ·类胡萝卜素的性质 | 第8-10页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第10-11页 |
| ·类胡萝卜素合成途径中的关键基因 | 第11页 |
| ·类胡萝卜素对于生物的重要作用 | 第11-12页 |
| ·类胡萝卜素的提取方法 | 第12-13页 |
| ·类胡萝卜素的分析手段 | 第13页 |
| ·C.sakazakii与类胡萝卜素 | 第13-15页 |
| ·克罗诺杆菌相关研究进展 | 第13-14页 |
| ·C.sakazakii BAA-894 | 第14页 |
| ·类胡萝卜素合成对C.sakazakii的影响 | 第14-15页 |
| ·idi与类胡萝卜素的合成 | 第15页 |
| ·立题背景与意义 | 第15-16页 |
| ·课题研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·质粒与菌株 | 第18页 |
| ·PCR引物设计 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·酶、试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素提取、分离、纯化及分析 | 第20-21页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素的提取 | 第20页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素粗样的紫外可见光扫描分析 | 第20页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素的TLC分析 | 第20页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素的分离、纯化 | 第20-21页 |
| ·分离、纯化后的类胡萝卜素成分分析 | 第21页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素己糖基团的确定 | 第21页 |
| ·C.sakazakii BAA-894类胡萝卜素合成基因在E.coli DH5α中串联表达 | 第21-25页 |
| ·基因组和质粒的提取 | 第21页 |
| ·PCR、酶切及连接反应的反应体系和反应条件 | 第21-22页 |
| ·E. coli DH5α感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素合成基因簇的获得 | 第22页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素合成基因在 E. coli DH5α中的串联表达 | 第22-24页 |
| ·重组菌合成类胡萝卜素的提取、分离和纯化 | 第24页 |
| ·重组菌合成类胡萝卜素的分析 | 第24-25页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 中 idi 表达前后类胡萝卜素合成的分析 | 第25-26页 |
| ·C. sakazakii BAA-894/pWSK29-i 和 E. coli DH5α/pWSK29-EIB 的构建 | 第25页 |
| ·C. sakazakii BAA-894/pWSK29-i 与 BAA-894/pWSK29 的对比 | 第25页 |
| ·E. coli DH5α/pWSK29-EiIB 与 DH5α/pWSK29-EIB 的对比 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-43页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素的提取 | 第26-28页 |
| ·不同有机溶剂对 C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素提取效果的对比 | 第26页 |
| ·萃取时间对 C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素提取效果的影响 | 第26-27页 |
| ·萃取温度对 C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素提取效果的影响 | 第27-28页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 培养时间对于类胡萝卜素提取效果的影响 | 第28页 |
| ·阶段小结 | 第28页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素的分离、纯化 | 第28-30页 |
| ·除去 C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素中的磷脂 | 第28页 |
| ·分离 C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素得到两种成分 | 第28-29页 |
| ·CS1 和 CS2 的纯化 | 第29-30页 |
| ·阶段小结 | 第30页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 类胡萝卜素成分分析 | 第30-32页 |
| ·CS1 和 CS2 的紫外可见光吸收图谱 | 第30页 |
| ·CS1 和 CS2 的 MS 图谱 | 第30-31页 |
| ·CS1 和 CS2 己糖基团为葡萄糖 | 第31-32页 |
| ·阶段小结 | 第32页 |
| ·类胡萝卜素合成基因在 E. coli DH5α中的串联表达 | 第32-34页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 的类胡萝卜素合成基因簇 | 第32页 |
| ·类胡萝卜素合成基因在 E. coli DH5α中串联表达的验证 | 第32-34页 |
| ·阶段小结 | 第34页 |
| ·分离、纯化重组菌合成的类胡萝卜素得到六种成分 | 第34-35页 |
| ·对六种类胡萝卜素成分的分析 | 第35-38页 |
| ·六种成分的紫外可见光吸收图谱 | 第35-36页 |
| ·EC1、EC2、EC3 和 EC4 的 MS 图谱 | 第36-37页 |
| ·EC5 和 EC6 的高效液相色谱图 | 第37页 |
| ·阶段小结 | 第37-38页 |
| ·推测 C. sakazakii BAA-894 的类胡萝卜素合成途径 | 第38-39页 |
| ·C. sakazakii BAA-894 中 idi 对类胡萝卜素合成的影响 | 第39-43页 |
| ·C. sakazakii BAA-894/pWSK29-i 与 E. coli DH5α/pWSK29-EIB 的构建 | 第39-40页 |
| ·C. sakazakii BAA-894/pWSK29-i 类胡萝卜素产量高于 BAA-894/pWSK2933 | 第40页 |
| ·E. coli DH5α/pWSK29-EiIB 类胡萝卜素产量高于 DH5α/pWSK29-EIB | 第40页 |
| ·阶段小结 | 第40-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43页 |
| 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
