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斑马鱼松果体对视觉敏感性生物钟的维持作用及长时记忆缺陷突变体的筛选

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
符号说明第9-10页
目录第10-13页
第一章 前言第13-55页
 第一节 斑马鱼—脊椎动物模型第13-15页
 第二节 斑马鱼是研究昼夜节律的理想动物模型第15-35页
     ·生物节律概述第15-16页
     ·哺乳动物生物节律的分子机理第16-18页
     ·斑马鱼的松果体第18-23页
     ·斑马鱼是良好生物节律研究模型第23-24页
     ·生物节律在斑马鱼上的研究进展第24-35页
 第三节 转基因斑马鱼的研究与应用第35-43页
     ·Tol2转座技术第36-38页
     ·GAL4/UAS在斑马鱼中的应用第38-41页
     ·NTR/Mtz系统在斑马鱼中的应用第41-43页
 第四节 斑马鱼的ENU诱变第43-47页
 第五节 学习和记忆相关的基因第47-55页
     ·即刻早期基因IEGs(immediate-early genes)的概述第47-50页
     ·IEG的细胞功能第50页
     ·一个特别的IEG:c-fos第50-55页
第二章 斑马鱼松果体对维持视觉敏感性生物钟的作用第55-86页
 第一节 材料和方法第55-66页
     ·实验动物第55页
     ·主要试剂第55-56页
     ·主要仪器第56页
     ·转基因载体pT2KXIG-gnat2-Gal4/VP16的构建第56-58页
     ·pCSTZ2.8转座酶mRNA的体外转录第58-60页
     ·显微注射第60-61页
     ·转基因斑马鱼的筛选和养殖第61-62页
     ·转基因斑马鱼的荧光观察第62页
     ·斑马鱼眼睛和松果体的剥离第62页
     ·冰冻切片(zpr-1抗体适用)第62-63页
     ·冰冻切片(opsin抗体适用)第63页
     ·冰冻切片的免疫组化第63-64页
     ·TUNEL第64-65页
     ·甲哨唑处理第65页
     ·行为视觉阈测量第65-66页
     ·斑马鱼自主活动能力的测量第66页
 第二节 实验结果第66-80页
     ·转基因斑马鱼品系的建立第66-67页
     ·转基因在发育的胚胎视网膜和松果体中的表达第67页
     ·转基因在视网膜和松果体中的表达与视蛋白免疫反应共定位情况第67-70页
     ·在成年斑马鱼视网膜感光细胞中转基因表达减弱第70-72页
     ·甲哨唑处理引起松果体感光细胞的消亡第72-74页
     ·松果体感光细胞的消亡不影响视觉敏感性第74-75页
     ·松果体感光细胞消亡破坏了视觉敏感性的昼夜节律第75-78页
     ·甲硝唑处理的转基因斑马鱼经短时间光照一定程度上恢复行为视觉敏感性的昼夜节律第78-79页
     ·松果体感光细胞的消失破坏了行为活动能力的昼夜节律第79-80页
 第三节 实验讨论和分析第80-85页
 第四节 实验结论与展望第85-86页
第三章 斑马鱼学习和记忆缺陷突变体的筛选第86-107页
 第一节 实验材料与方法第86-95页
     ·实验动物第86页
     ·主要试剂第86-87页
     ·主要仪器第87-88页
     ·ENU诱变突变体筛选流程图第88页
     ·fgt突变体筛选与鉴定第88-89页
     ·ENU诱变处理第89页
     ·突变体的行为学筛选第89-91页
     ·诱导c-fos基因表达的行为学第91页
     ·REAL-TIME PCR第91-95页
     ·统计学分析第95页
 第二节 实验结果与分析第95-101页
     ·野生型斑马鱼的黑色倾向性第95-96页
     ·斑马鱼在抑制逃避电击后形成稳定长时记忆第96-97页
     ·学习和记忆突变体的筛选第97-99页
     ·基因表达水平鉴定突变体第99-101页
 第三节 实验讨论与总结第101-106页
 第四节 实验结论与展望第106-107页
参考文献第107-119页
致谢第119-120页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第120页
 个人简历第120页
 在学期间发表的学术论文第120页

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