摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
目录 | 第10-13页 |
第一章 前言 | 第13-55页 |
第一节 斑马鱼—脊椎动物模型 | 第13-15页 |
第二节 斑马鱼是研究昼夜节律的理想动物模型 | 第15-35页 |
·生物节律概述 | 第15-16页 |
·哺乳动物生物节律的分子机理 | 第16-18页 |
·斑马鱼的松果体 | 第18-23页 |
·斑马鱼是良好生物节律研究模型 | 第23-24页 |
·生物节律在斑马鱼上的研究进展 | 第24-35页 |
第三节 转基因斑马鱼的研究与应用 | 第35-43页 |
·Tol2转座技术 | 第36-38页 |
·GAL4/UAS在斑马鱼中的应用 | 第38-41页 |
·NTR/Mtz系统在斑马鱼中的应用 | 第41-43页 |
第四节 斑马鱼的ENU诱变 | 第43-47页 |
第五节 学习和记忆相关的基因 | 第47-55页 |
·即刻早期基因IEGs(immediate-early genes)的概述 | 第47-50页 |
·IEG的细胞功能 | 第50页 |
·一个特别的IEG:c-fos | 第50-55页 |
第二章 斑马鱼松果体对维持视觉敏感性生物钟的作用 | 第55-86页 |
第一节 材料和方法 | 第55-66页 |
·实验动物 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·转基因载体pT2KXIG-gnat2-Gal4/VP16的构建 | 第56-58页 |
·pCSTZ2.8转座酶mRNA的体外转录 | 第58-60页 |
·显微注射 | 第60-61页 |
·转基因斑马鱼的筛选和养殖 | 第61-62页 |
·转基因斑马鱼的荧光观察 | 第62页 |
·斑马鱼眼睛和松果体的剥离 | 第62页 |
·冰冻切片(zpr-1抗体适用) | 第62-63页 |
·冰冻切片(opsin抗体适用) | 第63页 |
·冰冻切片的免疫组化 | 第63-64页 |
·TUNEL | 第64-65页 |
·甲哨唑处理 | 第65页 |
·行为视觉阈测量 | 第65-66页 |
·斑马鱼自主活动能力的测量 | 第66页 |
第二节 实验结果 | 第66-80页 |
·转基因斑马鱼品系的建立 | 第66-67页 |
·转基因在发育的胚胎视网膜和松果体中的表达 | 第67页 |
·转基因在视网膜和松果体中的表达与视蛋白免疫反应共定位情况 | 第67-70页 |
·在成年斑马鱼视网膜感光细胞中转基因表达减弱 | 第70-72页 |
·甲哨唑处理引起松果体感光细胞的消亡 | 第72-74页 |
·松果体感光细胞的消亡不影响视觉敏感性 | 第74-75页 |
·松果体感光细胞消亡破坏了视觉敏感性的昼夜节律 | 第75-78页 |
·甲硝唑处理的转基因斑马鱼经短时间光照一定程度上恢复行为视觉敏感性的昼夜节律 | 第78-79页 |
·松果体感光细胞的消失破坏了行为活动能力的昼夜节律 | 第79-80页 |
第三节 实验讨论和分析 | 第80-85页 |
第四节 实验结论与展望 | 第85-86页 |
第三章 斑马鱼学习和记忆缺陷突变体的筛选 | 第86-107页 |
第一节 实验材料与方法 | 第86-95页 |
·实验动物 | 第86页 |
·主要试剂 | 第86-87页 |
·主要仪器 | 第87-88页 |
·ENU诱变突变体筛选流程图 | 第88页 |
·fgt突变体筛选与鉴定 | 第88-89页 |
·ENU诱变处理 | 第89页 |
·突变体的行为学筛选 | 第89-91页 |
·诱导c-fos基因表达的行为学 | 第91页 |
·REAL-TIME PCR | 第91-95页 |
·统计学分析 | 第95页 |
第二节 实验结果与分析 | 第95-101页 |
·野生型斑马鱼的黑色倾向性 | 第95-96页 |
·斑马鱼在抑制逃避电击后形成稳定长时记忆 | 第96-97页 |
·学习和记忆突变体的筛选 | 第97-99页 |
·基因表达水平鉴定突变体 | 第99-101页 |
第三节 实验讨论与总结 | 第101-106页 |
第四节 实验结论与展望 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120页 |
个人简历 | 第120页 |
在学期间发表的学术论文 | 第120页 |