| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 1 材料和方法 | 第12-15页 |
| ·实验仪器 | 第12页 |
| ·实验材料和主要试剂 | 第12-13页 |
| ·主要溶剂的配制 | 第13-15页 |
| ·0.01 mol/L PBS | 第13页 |
| ·含 20% FBS 的内皮祖细胞条件培养基 | 第13页 |
| ·1μmol/L TTX 工作液 | 第13-14页 |
| ·100μmol/L NPPB 工作液 | 第14页 |
| ·5 mmol/L TEA 工作液 | 第14页 |
| ·5μmol/L 贝尼地平工作液 | 第14页 |
| ·western blot 用 A 液（100 ml） | 第14页 |
| ·western blot 用 B 液（100 ml） | 第14页 |
| ·western blot 用 C 液（100 ml） | 第14-15页 |
| 2 实验步骤和方法 | 第15-24页 |
| ·正常成人外周血 EPCs 分离、诱导培养和鉴定 | 第15-16页 |
| ·外周血 EPCs 分离、诱导培养 | 第15页 |
| ·鉴定 EPCs | 第15-16页 |
| ·鉴定内皮样细胞 | 第16-17页 |
| ·细胞生物学特性观察 | 第16页 |
| ·免疫细胞化学染色鉴定 | 第16-17页 |
| ·体外血管形成实验 | 第17页 |
| ·检测 EPCs 分化过程中关系最密切的离子通道 | 第17-18页 |
| ·流式细胞技术鉴定细胞表型，测出表达 CD133 的细胞比例 | 第18页 |
| ·倒置显微镜下进行细胞形态观察 | 第18页 |
| ·体外血管形成实验 | 第18页 |
| ·RT-PCR | 第18-22页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·逆转录（reverse transcription，RT） | 第19页 |
| ·聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR） | 第19-22页 |
| ·Western Blot | 第22-24页 |
| ·蛋白质样品的制备 | 第22页 |
| ·制胶、跑胶 | 第22-23页 |
| ·转膜、封闭 | 第23页 |
| ·一抗二抗杂交、底物显色、观察 | 第23-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-34页 |
| ·EPCs 的鉴定 | 第24-26页 |
| ·细胞形态学观察 | 第24页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第24-25页 |
| ·免疫双荧光鉴定 | 第25-26页 |
| ·流式鉴定 | 第26页 |
| ·内皮样细胞的鉴定 | 第26-28页 |
| ·细胞形态学观察 | 第26-27页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第27页 |
| ·体外血管形成实验 | 第27-28页 |
| ·检测 EPCs 分化过程中关系最密切的离子通道 | 第28-32页 |
| ·流式细胞检测 | 第28-31页 |
| ·细胞形态学观察 | 第31-32页 |
| ·体外血管形成实验 | 第32页 |
| ·RT-PCR | 第32-33页 |
| ·Western Blot | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 5 结论与不足 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 在学研究成果 | 第40页 |
| 致谢 | 第40页 |
