| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 图表目录 | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-20页 |
| ·国内外研究进展 | 第15-16页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第16-19页 |
| ·稳定表达外源标签的猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建与病毒拯救 | 第16-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞互作蛋白的筛选与分析 | 第17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞蛋白BAG6相互作用的分子机制 | 第17-18页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞蛋白AIF1相互作用的分子机制 | 第18-19页 |
| ·研究目标 | 第19-20页 |
| 第二章 稳定表达外源标签的猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建与病毒拯救 | 第20-35页 |
| 摘要 | 第20页 |
| ·前言 | 第20-21页 |
| ·材料方法 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-33页 |
| ·3×Myc标签基因片段的扩增 | 第29-30页 |
| ·表达3×Myc标签的中间质粒的构建 | 第30页 |
| ·表达3×Myc标签的JXwn06全长cDNA质粒的构建 | 第30页 |
| ·病毒的拯救 | 第30-31页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第31页 |
| ·拯救病毒体外增殖动态 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞互作蛋白的筛选与分析 | 第35-60页 |
| 摘要 | 第35页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料方法 | 第35-40页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·方法 | 第37-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-58页 |
| ·与Nsp2互作宿主细胞蛋白筛选的时间点的确定 | 第40页 |
| ·与Nsp2互作的宿主细胞蛋白的筛选 | 第40-41页 |
| ·与Nsp2互作的宿主细胞蛋白的质谱鉴定 | 第41-50页 |
| ·与Nsp2互作宿主细胞蛋白的生物信息学分析 | 第50-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞蛋白BAG6相互作用的分子机制 | 第60-84页 |
| 摘要 | 第60页 |
| ·前言 | 第60-62页 |
| ·材料方法 | 第62-69页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-81页 |
| ·宿主细胞蛋白BAG6基因的扩增 | 第69页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP)验证Nsp2与宿主细胞蛋白BAG6的相互作用 | 第69-70页 |
| ·激光共聚焦验证Nsp2与宿主细胞蛋白BAG6的相互作用 | 第70-72页 |
| ·Nsp2与宿主细胞蛋白BAG6相互作用区域的确定 | 第72-73页 |
| ·Nsp2突变体能够被泛素-蛋白酶体途径降解 | 第73页 |
| ·BAG6促进Nsp2突变体的泛素化 | 第73-74页 |
| ·干扰BAG6影响Nsp2的定位 | 第74-76页 |
| ·PRRSV感染对BAG6表达的影响 | 第76-77页 |
| ·Nsp2对BAG6表达的影响 | 第77页 |
| ·PRRSV感染可激活内质网应激介导的细胞凋亡通路 | 第77页 |
| ·Nsp2表达可激活内质网应激所介导的细胞凋亡通路 | 第77-78页 |
| ·Nsp2能够降低宿主细胞蛋白的泛素化水平 | 第78页 |
| ·干扰BAG6促进PRRSV感染所引起的细胞凋亡 | 第78-79页 |
| ·BAG6对PRRSV复制的影响 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与宿主细胞蛋白AIF1相互作用的分子机制 | 第84-101页 |
| 摘要 | 第84页 |
| ·前言 | 第84-85页 |
| ·材料方法 | 第85-89页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-99页 |
| ·宿主细胞蛋白AIF1基因的扩增 | 第89页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP)验证Nsp2与宿主细胞蛋白AIF1的相互作用 | 第89-90页 |
| ·激光共聚焦验证Nsp2与宿主细胞蛋白AIF1的相互作用 | 第90-92页 |
| ·Nsp2与宿主细胞蛋白AIF1相互作用区域的确定 | 第92-93页 |
| ·PRRSV感染对AIF1表达的影响 | 第93页 |
| ·Nsp2对AIF1表达的影响 | 第93页 |
| ·Nsp2能够抑制AIF1被泛素-蛋白酶体途径降解 | 第93-94页 |
| ·PRRSV感染能够引起非Caspase依赖性细胞凋亡 | 第94页 |
| ·Nsp2的表达能够引起非Caspase依赖性细胞凋亡 | 第94-96页 |
| ·AIF1为PRRSV复制提供能量 | 第96-97页 |
| ·AIF1对PRRSV复制的影响 | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 第六章 结论 | 第101-102页 |
| 第七章 创新点 | 第102-103页 |
| 第八章 文献综述 | 第103-111页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) | 第103-104页 |
| ·Nsp2的结构 | 第104页 |
| ·Nsp2与遗传变异 | 第104-105页 |
| ·Nsp2与PRRSV复制 | 第105-106页 |
| ·Nsp2与免疫应答 | 第106-107页 |
| ·Nsp2与获得性免疫 | 第106页 |
| ·Nsp2与先天性免疫 | 第106-107页 |
| ·Nsp2与PRRSV致病性 | 第107-108页 |
| ·Nsp2与自噬和凋亡 | 第108页 |
| ·Nsp2与细胞自噬 | 第108页 |
| ·Nsp2与细胞凋亡 | 第108页 |
| ·Nsp2与PRRSV疫苗 | 第108-109页 |
| ·展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-123页 |
| 致谢 | 第123-125页 |
| 作者简历 | 第125页 |
