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NtNAC-R1介导烟株打顶诱导烟碱生物合成过程

致谢第1-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-14页
   ·转录因子概况第8页
   ·NAC 转录因子简介第8-9页
   ·NAC 转录因子的生物调控作用第9-10页
     ·转录调控第9页
     ·转录后调控第9-10页
     ·翻译后调控第10页
   ·NAC 转录因子对根系发育影响研究进展第10-11页
   ·打顶对烟草根系发育及烟碱合成的影响第11-12页
   ·植物转录因子功能分析的主要方法第12-14页
     ·瞬时表达分析技术第12页
     ·过表达的转基因分析第12-13页
     ·基因沉默技术第13-14页
2 引言第14-15页
3 材料与方法第15-24页
   ·材料、试剂与仪器第15页
     ·植物材料第15页
     ·菌株、载体与主要试剂第15页
     ·主要仪器第15页
   ·实验方法第15-24页
     ·总 DNA、RNA 的提取及 mRNA 的反转录第15页
     ·烟株打顶前、后 NtNAC-R1 和 PMT 的 RT-PCR 检测第15-16页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第16页
     ·NtRNA-R1 基因 ORF 的克隆第16页
     ·克隆载体 pMD19-T-NtNAC-R1 的构建第16-17页
       ·大肠杆菌转化第17页
       ·大肠杆菌转化子的鉴定第17页
     ·亚细胞定位及过表达载体的构建第17-18页
     ·农杆菌介导转化烟草叶片及 pS1300-NtNAC-R1 的瞬时表达第18-19页
     ·NtNAC-R1 基因亚细胞定位分析第19页
     ·NtNAC-R1 基因瞬时表达分析第19页
     ·NtRNA-R1 基因的聚类分析第19-20页
     ·NtRNA-R1 基因 RANi 载体的构建第20-21页
     ·病毒介导的 RNAi 及分析第21页
     ·实时荧光定量 PCR 检测 Auxin 基因第21-22页
     ·叶盘法转化烟草愈伤组织及鉴定第22-24页
4 结果与分析第24-35页
   ·烟株打顶前、后 NtNAC-R1 和 PMT 的表达水平分析第24-25页
     ·总 RNA 质量检测第24页
     ·NtNAC-R1 和 PMT 表达水平的 RT-PCR 检测第24-25页
   ·烟草 NtNAC-R1 基因的内含子鉴定第25-26页
   ·烟草 NtNAC-R1 基因序列比对和进化分析第26-27页
   ·烟草 NtNAC-R1 对 PMT 及 IAA 和 JA 信号途径的影响第27-34页
     ·Auxin 基因的相对表达量分析第27-28页
     ·NtNAC-R1 载体构建第28-31页
       ·pS1300-NtNAC-R1-GFP 载体构建第28-29页
       ·IR-NtNAC-R1-RI 载体构建第29-31页
     ·NtNAC-R1 对 PMT 及 IAA 和 JA 信号途径的影响第31-34页
       ·NtNAC-R1 过表达后对 PMT、PDF1.2、IAA13 基因表达的影响第31-32页
       ·NtNAC-R1 基因的遗传转化第32页
       ·NtNAC-R1 沉默后对 PMT、PDF1.2、IAA13 基因表达的影响第32-34页
   ·NtNAC-R1 基因亚细胞定位第34-35页
5 结论与讨论第35-37页
参考文献第37-41页
ABSTRACT第41-42页

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