致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-14页 |
·转录因子概况 | 第8页 |
·NAC 转录因子简介 | 第8-9页 |
·NAC 转录因子的生物调控作用 | 第9-10页 |
·转录调控 | 第9页 |
·转录后调控 | 第9-10页 |
·翻译后调控 | 第10页 |
·NAC 转录因子对根系发育影响研究进展 | 第10-11页 |
·打顶对烟草根系发育及烟碱合成的影响 | 第11-12页 |
·植物转录因子功能分析的主要方法 | 第12-14页 |
·瞬时表达分析技术 | 第12页 |
·过表达的转基因分析 | 第12-13页 |
·基因沉默技术 | 第13-14页 |
2 引言 | 第14-15页 |
3 材料与方法 | 第15-24页 |
·材料、试剂与仪器 | 第15页 |
·植物材料 | 第15页 |
·菌株、载体与主要试剂 | 第15页 |
·主要仪器 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-24页 |
·总 DNA、RNA 的提取及 mRNA 的反转录 | 第15页 |
·烟株打顶前、后 NtNAC-R1 和 PMT 的 RT-PCR 检测 | 第15-16页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16页 |
·NtRNA-R1 基因 ORF 的克隆 | 第16页 |
·克隆载体 pMD19-T-NtNAC-R1 的构建 | 第16-17页 |
·大肠杆菌转化 | 第17页 |
·大肠杆菌转化子的鉴定 | 第17页 |
·亚细胞定位及过表达载体的构建 | 第17-18页 |
·农杆菌介导转化烟草叶片及 pS1300-NtNAC-R1 的瞬时表达 | 第18-19页 |
·NtNAC-R1 基因亚细胞定位分析 | 第19页 |
·NtNAC-R1 基因瞬时表达分析 | 第19页 |
·NtRNA-R1 基因的聚类分析 | 第19-20页 |
·NtRNA-R1 基因 RANi 载体的构建 | 第20-21页 |
·病毒介导的 RNAi 及分析 | 第21页 |
·实时荧光定量 PCR 检测 Auxin 基因 | 第21-22页 |
·叶盘法转化烟草愈伤组织及鉴定 | 第22-24页 |
4 结果与分析 | 第24-35页 |
·烟株打顶前、后 NtNAC-R1 和 PMT 的表达水平分析 | 第24-25页 |
·总 RNA 质量检测 | 第24页 |
·NtNAC-R1 和 PMT 表达水平的 RT-PCR 检测 | 第24-25页 |
·烟草 NtNAC-R1 基因的内含子鉴定 | 第25-26页 |
·烟草 NtNAC-R1 基因序列比对和进化分析 | 第26-27页 |
·烟草 NtNAC-R1 对 PMT 及 IAA 和 JA 信号途径的影响 | 第27-34页 |
·Auxin 基因的相对表达量分析 | 第27-28页 |
·NtNAC-R1 载体构建 | 第28-31页 |
·pS1300-NtNAC-R1-GFP 载体构建 | 第28-29页 |
·IR-NtNAC-R1-RI 载体构建 | 第29-31页 |
·NtNAC-R1 对 PMT 及 IAA 和 JA 信号途径的影响 | 第31-34页 |
·NtNAC-R1 过表达后对 PMT、PDF1.2、IAA13 基因表达的影响 | 第31-32页 |
·NtNAC-R1 基因的遗传转化 | 第32页 |
·NtNAC-R1 沉默后对 PMT、PDF1.2、IAA13 基因表达的影响 | 第32-34页 |
·NtNAC-R1 基因亚细胞定位 | 第34-35页 |
5 结论与讨论 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
ABSTRACT | 第41-42页 |