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玉米ZmSTOMAGEN基因的克隆及表达特性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-11页
第一章 综述第11-23页
   ·双、单子叶植物气孔发育途径的研究现状第11-16页
   ·气孔蛋白的发现及研究现状第16-19页
   ·植物基因启动子的基本结构和功能第19-20页
   ·实时荧光定量PCR技术的原理及分析方法第20-22页
   ·论文研究意义及技术路线第22-23页
第二章 材料与方法第23-35页
   ·材料和处理第23-26页
     ·植物材料及其处理方法第23-25页
     ·药品、菌种和仪器第25-26页
   ·序列的同源比对和顺式作用元件预测第26-27页
   ·引物设计第27页
   ·总RNA提取、纯化及质量鉴定第27-28页
     ·酚/氯仿抽提法提取高纯度总RNA第27-28页
     ·总RNA的纯化第28页
     ·总RNA质量及浓度测定第28页
   ·RT-PCR获得目的基因片段第28-29页
     ·反转录合成cDNA第一链第28-29页
     ·PCR扩增目的基因序列第29页
   ·实时荧光定量PCR第29-30页
     ·模板制备第29页
     ·实时荧光定量PCR第29-30页
   ·ZmSTOMAGEN基因表达载体的构建和重组质粒的转化第30-35页
     ·构建ZmSTOMAGEN基因的干扰表达载体并转化第31-32页
     ·构建ZmSTOMAGEN基因的过量表达载体并转化第32-33页
     ·酶切反应第33页
     ·连接反应第33页
     ·重组质粒的大肠杆菌转化第33-34页
     ·重组质粒的农杆菌三亲接合转化第34-35页
第三章 结果与分析第35-60页
   ·拟南芥STOMAGEN基因在玉米中的同源比对分析第35页
   ·玉米STOMAGEN同源基因的克隆及测序鉴定第35-37页
   ·ZmSTOMAGEN基因序列和顺式作用元件分析第37-50页
     ·ZmSTOMAGEN基因序列、结构的生物信息学软件分析第37-43页
     ·顺式作用元件预测和分析第43-50页
   ·ZmSTOMAGEN基因的表达特性第50-58页
     ·制作ZmSTOMAGEN基因和actin内参基因的标准曲线第50-51页
     ·不同组织中的气孔分布及ZmSTOMAGEN基因的组织表达特性第51-52页
     ·ZmSTOMAGEN基因的光诱导表达第52-58页
   ·ZmSTOMAGEN基因干扰表达载体和过量表达载体的构建第58-60页
     ·ZmSTOMAGEN基因干扰表达载体的构建第58-59页
     ·ZmSTOMAGEN基因过量表达载体的构建第59-60页
第四章 讨论第60-65页
   ·序列分析初步确定ZmSTOMAGEN基因为玉米气孔发育相关基因第60-61页
   ·ZmSTOMAGEN基因上游表达调控元件的预测分析第61-62页
   ·ZmSTOMAGEN基因的组织表达特性和诱导表达特性分析第62-65页
     ·ZmSTOMAGEN基因的组织表达特性分析第62页
     ·ZmSTOMAGEN基因的光诱导表达特性分析第62-63页
     ·ZmSTOMAGEN基因的干旱诱导表达特性分析第63-65页
第五章 结论与展望第65-67页
   ·结论第65-66页
   ·展望第66-67页
参考文献第67-78页
附录第78-89页
致谢第89-90页
攻读硕士学位期间发表的论文第90页

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