四川地区PCV2分子流行病学调查及分离鉴定
| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 縮略词表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-28页 |
| 1 PCV的发现与分类 | 第11-12页 |
| 2 PCV2的病原学 | 第12-13页 |
| ·生物学特性 | 第12-13页 |
| ·细胞培养特性 | 第13页 |
| 3 PCV的分子学特征 | 第13-17页 |
| ·病毒基因组特征 | 第13-15页 |
| ·复制与转录 | 第15页 |
| ·PCV2基因分型 | 第15-16页 |
| ·主要编码的蛋白 | 第16-17页 |
| 4 PCVD | 第17-20页 |
| ·断奶仔猪多系统衰竭综合征 | 第17-18页 |
| ·猪皮炎和肾病综合征 | 第18页 |
| ·新生仔猪的先天性震颤 | 第18页 |
| ·猪呼吸系统疾病 | 第18-19页 |
| ·增生和坏死性肺炎 | 第19页 |
| ·繁殖障碍 | 第19页 |
| ·肉芽肿性肠炎 | 第19-20页 |
| ·坏死性淋巴腺炎 | 第20页 |
| 5 PCVD的致病机理 | 第20-21页 |
| 6 PCV2的流行情况 | 第21-22页 |
| ·水平传播 | 第21-22页 |
| ·垂直传播 | 第22页 |
| 7 PCVD的诊断 | 第22-25页 |
| ·PCR | 第22-23页 |
| ·ELISA | 第23-24页 |
| ·原位杂交(ISH) | 第24页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第24页 |
| ·免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA) | 第24-25页 |
| ·病毒分离及电镜观察 | 第25页 |
| 8 PCV2的防治 | 第25-26页 |
| ·加强管理 | 第25页 |
| ·疫苗免疫 | 第25-26页 |
| 9 PCV2疫苗研究进展 | 第26-27页 |
| ·灭活疫苗 | 第26页 |
| ·弱毒疫苗 | 第26页 |
| ·亚单位疫苗 | 第26页 |
| ·活载体疫苗 | 第26-27页 |
| ·基因重组疫苗 | 第27页 |
| ·核酸疫苗 | 第27页 |
| 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 第一章 四川地区PCV2的分子流行病学调查 | 第28-35页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| ·样品 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第28-29页 |
| ·样品的处理 | 第29页 |
| ·样品病毒DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·样品中的PCV2的检测 | 第30页 |
| ·样品中的PCV2a与PCV2b的检测 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-33页 |
| ·样品的PCV2检测 | 第31-32页 |
| ·样品PCV2b与PCV2a感染情况 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 四川地区PCV2的分离鉴定 | 第35-45页 |
| 1 材料 | 第35页 |
| ·样品 | 第35页 |
| ·细胞株和菌株 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-38页 |
| ·病毒的分离培养 | 第35-36页 |
| ·细胞中的DNA提取 | 第36页 |
| ·分离株的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·基因分型 | 第36-37页 |
| ·电镜鉴定 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第37-38页 |
| ·免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA) | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-41页 |
| ·分离病毒株的鉴定 | 第38-39页 |
| ·PCR鉴定 | 第39页 |
| ·基因的分型 | 第39页 |
| ·电镜结果 | 第39-40页 |
| ·IFA结果 | 第40页 |
| ·IPMA结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·PCV2分离鉴定 | 第41-42页 |
| ·PCV2a和PCV2b | 第42页 |
| ·PCVD的感染机制 | 第42-45页 |
| 第三章 PCV2分离株的基因组分析 | 第45-58页 |
| 1 材料 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-50页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·全基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第46页 |
| ·PCV2全基因与pMDl9-T载体的连接 | 第46-47页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第47页 |
| ·转化 | 第47-48页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第48-49页 |
| ·序列测定与分析 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-56页 |
| ·全基因PCR扩增 | 第50页 |
| ·全基因的重组质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·分离毒株的全基因序列分析 | 第51页 |
| ·遗传进化分析 | 第51-52页 |
| ·与国内外流行株全基因组分析 | 第52-53页 |
| ·ORF1核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第53-54页 |
| ·ORF2核苷酸序列分析 | 第54-55页 |
| ·ORF2推导的氨基酸序列分析 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72页 |
