摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1 SPAG11概述 | 第12-20页 |
·防御素 | 第12-14页 |
·SPAG11研究进展 | 第14-20页 |
·SPAG11基因 | 第14-16页 |
·SPAG11蛋白亚型 | 第16页 |
·SPAG11蛋白结构 | 第16-17页 |
·SPAG11蛋白表达部位 | 第17-18页 |
·SPAG11蛋白生物学活性 | 第18-20页 |
2 TLRs概述 | 第20-25页 |
·TLRs结构 | 第21页 |
·TLRs分布 | 第21-22页 |
·TLRs配体 | 第22-23页 |
·TLRs信号传导机制 | 第23-24页 |
·TLRs生物学功能 | 第24-25页 |
3 NOD样受体概述 | 第25-27页 |
4 研究目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 牦牛SPAG11基因克隆及序列分析 | 第28-51页 |
1 材料与方法 | 第28-34页 |
·材料 | 第28-30页 |
·实验动物与组织 | 第28页 |
·菌株和载体 | 第28页 |
·主要仪器与设备 | 第28-29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要溶液配制 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-34页 |
·引物设计及合成 | 第30-31页 |
·总RNA提取 | 第31页 |
·RT-PCR扩增牦牛SPAG11基因 | 第31-32页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第32页 |
·牦牛SPAG11基因连接与转化 | 第32-33页 |
·菌液和质粒PCR鉴定 | 第33-34页 |
·牦牛SPAG11基因测序与序列分析 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-49页 |
·RT-PCR扩增牦牛SPAG11基因 | 第34-35页 |
·菌液和质粒PCR鉴定 | 第35页 |
·SPAG11基因序列分析 | 第35-49页 |
·DNA序列分析 | 第35-41页 |
·生物信息学分析 | 第41-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
第三章 牦牛SPAG11基因在生殖器官中的表达检测及SPAG11E多克隆抗体制备 | 第51-59页 |
1 材料与方法 | 第51-54页 |
·材料 | 第51-52页 |
·实验动物及组织 | 第51-52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要溶液配制 | 第52页 |
·方法 | 第52-54页 |
·牦牛SPAG11基因组织表达谱及半定量分析 | 第52页 |
·牦牛SPAG11E多肽设计与合成 | 第52-53页 |
·牦牛SPAG11E多克隆抗体制备 | 第53页 |
·间接ELISA法检测抗体效价 | 第53页 |
·免疫组化检测多克隆抗体特异性 | 第53-54页 |
2 结果 | 第54-57页 |
·牦牛SPAG11基因组织表达谱及半定量分析 | 第54-55页 |
·多肽合成、纯化及鉴定 | 第55-56页 |
·间接ELISA法检测抗体效价 | 第56页 |
·免疫组织化学染色结果 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
第四章 牦牛TLRs基因克隆及其在雄性生殖器官中的表达检测 | 第59-66页 |
1 材料与方法 | 第59-61页 |
·材料 | 第59页 |
·方法 | 第59-61页 |
·引物设计及合成 | 第59-60页 |
·牦牛TLRs基因RT-PCR | 第60-61页 |
·牦牛TLRs基因分子克隆及测序 | 第61页 |
·牦牛TLRs基因组织表达谱及半定量分析 | 第61页 |
2 结果 | 第61-64页 |
·牦牛TLRs基因RT-PCR | 第61页 |
·菌液和质粒PCR鉴定 | 第61-62页 |
·牦牛TLRs基因组织表达谱及半定量分析 | 第62-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第五章 牦牛NOD1和NOD2基因克隆及其在雄性生殖器官中的表达检测 | 第66-71页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
·材料 | 第66页 |
·方法 | 第66-68页 |
·引物设计及合成 | 第66-67页 |
·牦牛NOD1/NOD2基因RT-PCR | 第67页 |
·牦牛NOD1/NOD2分子克隆及测序 | 第67页 |
·牦牛NOD1/NOD2组织表达谱及半定量分析 | 第67-68页 |
2 结果 | 第68-69页 |
·牦牛NOD1/NOD2基因RT-PCR | 第68页 |
·菌液和质粒PCR鉴定 | 第68-69页 |
·牦牛NOD1/NOD2基因组织表达谱及半定量分析 | 第69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80页 |